詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠淋巴結(jié)淋巴采用分離淋巴結(jié)組織、研磨獲取單細(xì)胞懸液后通過密度梯度離心法制備而來,細(xì)胞總量約為1×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠淋巴結(jié)淋巴經(jīng)過檢測(cè),且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠淋巴結(jié)淋巴原代細(xì)胞 | 組織來源 | 淋巴結(jié) |
英文名稱 | Rat Lymph Node Lymphocyte Cells | 貨號(hào) | YS-01X7526 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介:
大鼠淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞分離自淋巴結(jié);淋巴結(jié)是哺乳類的周圍淋巴器官,由淋巴細(xì)胞集合而成。呈豆形,位于淋巴管行進(jìn)途中,是產(chǎn)生免疫應(yīng)答的重要器官之一。淋巴結(jié)表面包有被膜,被膜的結(jié)締組織伸入淋巴結(jié)內(nèi)形成小梁,構(gòu)成淋巴結(jié)的支架。被膜下為皮質(zhì)區(qū),淋巴結(jié)的中心及門部為髓質(zhì)區(qū)。皮質(zhì)區(qū)有淋巴小結(jié)、彌散淋巴組織和皮質(zhì)淋巴竇(簡稱皮竇),髓質(zhì)包括由致密淋巴組織構(gòu)成的髓索和髓質(zhì)淋巴竇(簡稱髓竇)。淋巴竇的竇腔內(nèi)有許多淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞,從輸入淋巴管流來的淋巴液先進(jìn)入皮竇再流向髓竇,最后經(jīng)輸出淋巴管離開淋巴結(jié)。淋巴結(jié)的主要功能是濾過淋巴液,產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞,參與機(jī)體的免疫反應(yīng)。淋巴結(jié)腫大或疼痛常表示其屬區(qū)范圍內(nèi)的器官有炎癥或其他病變。主要功能是濾過淋巴液,產(chǎn)生淋巴細(xì)胞和漿細(xì)胞,參與機(jī)體的免疫反應(yīng);當(dāng)局部感染時(shí),細(xì)菌、病毒或癌細(xì)胞等可沿淋巴管侵入,引起局部淋巴結(jié)腫大。如該淋巴結(jié)不能阻止和消滅它們,則病變可沿淋巴管的流注方向擴(kuò)散和轉(zhuǎn)移。淋巴結(jié)淋巴細(xì)胞是白細(xì)胞的一種,由次級(jí)淋巴器官淋巴結(jié)產(chǎn)生,是機(jī)體免疫應(yīng)答功能的重要細(xì)胞成分;細(xì)胞為圓形細(xì)胞核,細(xì)胞質(zhì)少。成熟淋巴細(xì)胞需依賴抗原刺激而分化增殖,繼而發(fā)揮其免疫功能。
培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 懸浮
細(xì)胞形態(tài) 圓形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品:
兔子內(nèi)皮抑素(ES)ELISA 試劑盒
People leils binding type AFP / AFP varia 1 (AFP-L1) ELISA kit E 人小扁結(jié)合型甲胎蛋白/甲胎蛋白異質(zhì)體1(AFP-L1)試劑盒E
Humankappaimmunoglobulinlightchain,κ-IgLCELISAKit 輕鏈kappa抗體(κ-IgLC)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
Humandynamin2,DNM2試劑盒人發(fā)動(dòng)蛋白2(DNM2)試劑盒規(guī)格:96T/48T
組織N-乙酰轉(zhuǎn)移酶(NAT)活性比色法定量試劑盒20次
HumanPeussioxin,PTELISAKit人百日咳毒素(PT)試劑盒規(guī)格:96T/48T
豚鼠鉤端IgG(Leptospira)試劑盒 ,英文名: Leptospira ELISA Kit
Human toxic shock syndrome toxin 1 iegrated (TSST-1) ELISA Kit 人毒性休克綜合征毒素1(TSST-1)試劑盒
RabbitMacrophageInflammatoryProtein-1α,MIP-1αELISAkit 兔子巨噬細(xì)胞性蛋白1α(MIP-1α/CCL3)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforbFGFELISAKit大鼠堿性成纖維生長因子
細(xì)菌色肉湯500毫升
RabbitIerleukin1,IL-1ELISAKit兔子白介素1(IL-1)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠纖維連結(jié)蛋白(mous FN) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠Fractalkine(mouse Fractalkine) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠X(mouse FX) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
小鼠(mouse Fibrinogen) 作用: ELISA 規(guī)格: 進(jìn)口分裝
GB重組巨細(xì)胞病毒 HCMV Glycoprotein B / gB 蛋白 Protein
TM(Thrombomodulin 0.5mgTM(Thrombomodulin) 血栓調(diào)節(jié)蛋白多肽
PARP1重組人 PARP-1 / PARP 蛋白 Protein
IL3 Protein Human 重組人 IL3 / IL-3 蛋白
HAVCR1 Protein Human 重組人 KIM-1 / TIM1 / HAVCR1 蛋白
CFD Others Mouse 小鼠 CFD / Adipsin 人細(xì)胞裂解液 III型膠原酶(含100mL酶解緩沖液) 10mL 海馬神經(jīng)應(yīng)細(xì)胞Many 豬胚胎傳代細(xì)胞;ST FGF1 Protein Mouse 重組小鼠 / 大鼠 aFGF / FGF1 蛋白 NFS-60 小鼠原代嗅球神經(jīng)元細(xì)胞 人原代小梁網(wǎng)細(xì)胞
大鼠淋巴結(jié)淋巴原代細(xì)胞2,4-D/BSA 2,4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mg2,4-D/BSA 2,4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白
AK4 Protein Human 重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
PLA2G12B重組小鼠 PLA2G12B / PLA2G13 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
LTBR Protein Rat 重組大鼠 LTBR / TNFRSF3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
USP46重組人 / 小鼠 USP46 蛋白 (N-SUMO) Protein