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大鼠角膜上皮原代細胞

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    上研生
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更新時間:2025-05-13 14:57:22瀏覽次數:28

聯(lián)系我們時請說明是化工儀器網上看到的信息,謝謝!

產品簡介

供貨周期 現貨 規(guī)格 5×10?
貨號 YS-01X7387 應用領域 化工,生物產業(yè)
主要用途 僅供科研實驗    
大鼠角膜上皮原代細胞公司出售的產品:豚鼠腸脂肪酸結合蛋白(iFABP)ELISA 試劑盒 96T/48T Human surface membrane immunoglobulin (SmIg) ELISA Kit 人細胞膜表面免疫球蛋白(SmIg)試劑盒HumanhistoneH2A-H2B-DNAaoaibodyELISAKit 人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗

詳細介紹

本網站銷售的化學產品僅供科學研究或工業(yè)應用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細胞屬性:

大鼠角膜上皮原代細胞

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠角膜上皮采用-膠原酶混合消化法結合差速貼壁法,并通過上皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測

公司實驗室分離的大鼠角膜上皮經PCK免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBVHCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

產品名稱

大鼠角膜上皮原代細胞

組織來源

眼角膜組織

英文名稱

Rat Corneal   Epithelial Cells

貨號

YS-01X7387

產品規(guī)格

5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

用途

僅供科研實驗

 

細胞簡介:

大鼠角膜上皮細胞分離自眼角膜組織;角膜位于眼球前壁的一層透明膜,約占纖維膜的前1/6,從后面看角膜呈正圓形,從前面看為橫橢圓形。角膜厚度各部分不盡相同,中央部最薄。角膜有十分敏感的神經末梢,如有外物接觸角膜,眼瞼便會不由自主地合上以保護眼睛。為了保持透明,角膜并沒有血管,透過外界空氣、淚液及房水獲取養(yǎng)份及氧氣。角膜分為五層,由前向后依次為:上皮細胞層、前彈力層、基質層、后彈力層、內皮細胞層。其主要功能如下:①角膜是的無血管的組織,具有透明的特性和合成許多蛋白的功能,分三層細胞層,外層即是上皮細胞;②角膜上皮細胞能參與先天性免疫,能感應病原體存在并發(fā)出信號從而激活角膜防御系統(tǒng);③角膜上皮細胞能高效表達醛脫氫酶。角膜上皮細胞的體外培養(yǎng)對研究角膜的生理學、病理學、免疫學以及分子生物學都是極為重要的手段,常用于研究細胞代謝產物、病毒感染、各種生長因子和藥物對細胞生長的影響。

大鼠角膜上皮原代細胞

培養(yǎng)信息:

大鼠角膜上皮原代細胞

包被條件 鼠尾膠原2-5μg/cm2

培養(yǎng)基 FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin

換液頻率 2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 上皮細胞樣

傳代特性 可傳1-2

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%

大鼠角膜上皮原代細胞

細胞培養(yǎng)方法:

大鼠角膜上皮原代細胞

1、細胞傳代:細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細胞直接離心收集,細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存:待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細胞,大部分細胞回縮且有少量細胞脫落,輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

操作步驟:

大鼠角膜上皮原代細胞
1.將無菌的蓋玻片置于細胞培養(yǎng)皿中,將細胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細胞爬片,待細胞長至80%時取出爬片。

2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。

3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細胞通透。

4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。

5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。

6. 細胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。

7. 二抗孵育:選與一抗對應的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。

8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當出現棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。

9. 復染:用Harris蘇木素復染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。

10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側,再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側再輕輕放下另一側,以免產生氣泡,封好的爬片平放置于通風廚中晾干。

11. 鏡檢觀察。

公司產品:大鼠角膜上皮原代細胞


豚鼠白介素2(IL-2)試劑盒 ,英文名: IL-2 ELISA Kit

Human ubiquitin decomposition enzyme (DUB) ELISA Kit 人泛素分解酶(DUB)試劑盒

RabbitIerleukin3,IL-3ELISAKit 兔子白介素3(IL-3)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta-DFELISAKit大鼠β-防御素

細菌樣品二維電泳裂解液用于細菌蛋白二維電泳

RabbitGlucosedependeinsulieleasingpolypeptide,GIPELISAKit兔子葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)試劑盒規(guī)格:96T/48T

小鼠細胞色素氧化酶(CC0)試劑盒 96T/48T

Human lymphocyte function associated aigen 3 (LFA-3/CD58) ELISA Kit 人淋巴細胞功能相關抗原3(LFA-3/CD58)試劑盒

Humanfibronectioelatedaigen,FRAELISAKit 人纖維連接素相關抗原(FRA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

ChickenImmunoglobulinE,IgE試劑盒雞免疫球蛋白E(IgE)試劑盒規(guī)格:96T/48T

載玻片細胞CYP1A2蛋白表達熒光顯微鏡試劑盒10/20

Mousegrowthhormonereleasingpeptide-Ghrelin,GHRP-GhrelinELISAKit小鼠生長激素釋放肽ghrelin(GHRP-Ghrelin)試劑盒規(guī)格:96T/48T

大鼠髓過氧化物酶特異性抗粒細胞胞質抗體IgG(MPO-ANCAIgG)ELISAKit   ELISA. 

大鼠補體蛋白3(C3)ELISAKit   ELISA. 

大鼠(AZT)ELISAKit   ELISA.

FLT3重組小鼠 FLT-3 / CD135 / FLK-2 蛋白 Protein

紅細胞生成素受體(EPOR)重組蛋白 Recombinant Erythropoietin Receptor (EPOR)

CRABP1重組人 CRABP1 / RBP5 蛋白 Protein

CDK5 Protein Human 重組人 CDK5 蛋白 (GST 標簽)

IL17A Protein Canine 重組狗 IL17 / IL17A 蛋白

CD86 Others Human CD86 / B7-2 人細胞裂解液   CC Others Human CC / chymoypsin C 人細胞裂解液   FZD1 Others Mouse 小鼠 FZD1 人細胞裂解液   人胚胎氣管組織來源細胞 小鼠原代胰腺腺泡上皮細胞 大鼠原代乳腺上皮細胞

大鼠角膜上皮原代細胞趨化因子C-C-基元配體14(CCL14)重組蛋白 Recombinant Chemokine C-C-Motif Ligand 14 (CCL14)

AIMP1 Protein Human 重組人 AIMP1 / EMAP2 / SCYE1 蛋白 (His 標簽)

DCN重組人 Decorin / DCN / SLRR1B 蛋白  Protein

HA Protein H4N4 重組甲型流感 H4N4 (A/mallard duck/Alberta/299/1977) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 (His 標簽)

CD1D & B2M重組人 CD1D & B2M Heterodimer 蛋白 Protein


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