詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:
方法簡介
公司實驗室分離的大鼠甲狀腺濾泡上皮采用-膠原酶混合消化法結(jié)合差速貼壁法,并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來,細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實驗室分離的大鼠甲狀腺濾泡上皮經(jīng)TG(甲狀腺球蛋白)免疫熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠甲狀腺濾泡上皮原代細(xì)胞 | 組織來源 | 甲狀腺組織 |
英文名稱 | Rat Thyroid Follicular Epithelial Cells | 貨號 | YS-01X7095 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實驗 |
細(xì)胞簡介:
大鼠甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞分離自甲狀腺組織;甲狀腺是脊椎動物非常重要的腺體,屬于內(nèi)分泌器官。在哺乳動物身體中,它位于頸部甲狀軟骨下方,氣管兩旁。甲狀腺表面有結(jié)締組織被膜,表面結(jié)締組織深入到腺實質(zhì),將實質(zhì)分為許多不明顯的小葉,小葉內(nèi)有很多甲狀腺濾泡和濾泡旁細(xì)胞。甲狀腺控制使用能量的速度、制造蛋白質(zhì)、調(diào)節(jié)機體對其他賀爾蒙的敏感性。甲狀腺依靠制造甲狀腺素來調(diào)整這些反應(yīng),有T3和T4。這兩者調(diào)控代謝、生長速率還有調(diào)解其他的身體系統(tǒng)。T3和T4由碘和酪胺酸合成。甲狀腺也生產(chǎn)降鈣素,調(diào)節(jié)體內(nèi)鈣的平衡。其中,甲狀腺濾泡上皮細(xì)胞(也稱為濾泡細(xì)胞或主要細(xì)胞)是在甲狀腺細(xì)胞是負(fù)責(zé)生產(chǎn)和分泌甲狀腺激素,甲狀腺素(T4)和三碘甲狀腺原(T3)。
培養(yǎng)信息:
包被條件 鼠尾膠原Ⅰ(2-5μg/cm2)
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達到80-90%時即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品:
豚鼠表皮生長因子(EGF)試劑盒 ,英文名: EGF ELISA Kit
One tea phenol amine (CA) ELISA Kit 人兒茶酚胺(CA)試劑盒
Rabbitthrombieceptor,ELISAKit 兔子受體()試劑盒 96T/48T 進口分裝
CLIAKitforBetaGAL(MouseBeta-galactosidase)ELISAKit小鼠β半乳糖苷酶
細(xì)菌鹽還原酶定性試劑盒20次
RabbitHeatShockProtein90,HSP-90ELISAKit兔熱休克蛋白90(HSP-90)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠B12(VB12)試劑盒 96T/48T
小鼠A(VA)試劑盒 96T/48T
小鼠病毒(MVM)試劑盒 96T/48T
小鼠網(wǎng)膜素(omein)試劑盒 96T/48T
大鼠第八因子相關(guān)抗原(FⅧAg)ELISAKit ELISA.
大鼠激酶M2型同工酶(M2-PK)ELISAKit ELISA.
大鼠乙酰受體抗體(AChRab)ELISAKit ELISA.
PLA2G12B重組小鼠 PLA2G12B / PLA2G13 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
2,4-D/BSA 2,4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白 1mg2,4-D/BSA 2,4-二氯苯氧乙酸偶聯(lián)牛血清白蛋白
USP46重組人 / 小鼠 USP46 蛋白 (N-SUMO) Protein
AK4 Protein Human 重組人 AK4 / Adenylate Kinase 4 / AK3L1 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽)
LTBR Protein Rat 重組大鼠 LTBR / TNFRSF3 蛋白 (His 標(biāo)簽)
CD59 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD59 / CD59A / MAC-IP 人細(xì)胞裂解液 小鼠海馬趾神經(jīng)元MN-h CL-0185PC-3(人前列腺癌細(xì)胞) 真皮微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many BEAS-2B 小鼠原代真皮毛乳頭細(xì)胞 人原代牙齦干細(xì)胞
大鼠甲狀腺濾泡上皮原代細(xì)胞Morphine/BSA 與牛血清白蛋白偶聯(lián)物 10mgMorphine/BSA 與牛血清白蛋白偶聯(lián)物
IL17A Protein Human 重組人 IL17 / IL17A 蛋白
CXCL13重組食蟹猴 CXCL13 / BCA-1 / BLC 蛋白 Protein
PREP Protein Mouse 重組小鼠 Prolyl endopeptidase / PREP 蛋白
DAPK3重組人 DAPK3 / ZIPK 蛋白 (GST 標(biāo)簽) Protein