詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:
方法簡介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)采用膠原酶-酶聯(lián)合消化法、神經(jīng)元專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選結(jié)合化學(xué)試劑抑制法制備而來,細(xì)胞總量約為5×105cells/瓶。
質(zhì)量檢測
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)經(jīng)GC(Galactocerebroside)免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)原代細(xì)胞 | 組織來源 | 脊髓組織 |
英文名稱 | Rat Spinal Cord Oligodendrocyte Cells | 貨號 | YS-01X7691 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡介:
大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)細(xì)胞分離自脊髓組織;脊髓是細(xì)細(xì)的管束狀的神經(jīng)結(jié)構(gòu),位于脊柱的椎管內(nèi)且被脊椎保護(hù);是源自腦的中樞神經(jīng)系統(tǒng)延伸部分。中樞神經(jīng)系統(tǒng)的細(xì)胞依靠復(fù)雜的聯(lián)系來處理傳遞信息。脊髓的主要功能是傳送腦與外周之間的神經(jīng)信息。人和脊椎動(dòng)物中樞神經(jīng)系統(tǒng)的一部分,在椎管里面,上端連接延髓,兩旁發(fā)出成對的神經(jīng),分布到四肢、體壁和內(nèi)臟。脊髓的內(nèi)部有一個(gè)H形(蝴蝶型)灰質(zhì)區(qū),主要由神經(jīng)細(xì)胞構(gòu)成;在灰質(zhì)區(qū)周圍為白質(zhì)區(qū),主要由有髓神經(jīng)纖維組成;脊髓是許多簡單反射的中樞。脊髓兩旁發(fā)出許多成對的神經(jīng)(稱為脊神經(jīng))分布到全身皮膚、肌肉和內(nèi)臟器官。脊髓是周圍神經(jīng)與腦之間的通路,也是許多簡單反射活動(dòng)的低級中樞。按脊神經(jīng)的出入可把脊髓也分為相應(yīng)的31節(jié),31對脊神經(jīng)就是由不同的脊椎發(fā)出的。神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞,簡稱膠質(zhì)細(xì)胞,是神經(jīng)組織中除神經(jīng)元以外的另一大類細(xì)胞,也有突起,但無樹突和軸突之分,廣泛分布于中樞和周圍神經(jīng)系統(tǒng)。在哺乳類動(dòng)物中,神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞與神經(jīng)元的細(xì)胞數(shù)量比例約為10:1。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)(CNS)中的神經(jīng)膠質(zhì)細(xì)胞主要有星形膠質(zhì)細(xì)胞、少突膠質(zhì)細(xì)胞(與前者合稱為大膠質(zhì)細(xì)胞)和小膠質(zhì)細(xì)胞等。傳統(tǒng)認(rèn)為膠質(zhì)細(xì)胞屬于結(jié)締組織,其作用僅是連接和支持各種神經(jīng)成分,其實(shí)神經(jīng)膠質(zhì)還起著分配營養(yǎng)物質(zhì)、參與修復(fù)和吞噬的作用,在形態(tài)、化學(xué)特征和胚胎起源上都不同于普通結(jié)締組織。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml)
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、PDGF-AA、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 不增殖;不傳代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。
操作步驟:
1.將無菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說明書稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽性信號時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品:
豚鼠腫瘤壞死因子α(TNFα)試劑盒 ,英文名: TNFα ELISA Kit
Lung resistance protein (LRP) ELISA Kit 人肺耐藥蛋白(LRP)試劑盒
rabbitmaixmetalloproteinase5,MMP-5ELISAKit 兔子基質(zhì)金屬蛋白酶5(MMP-5)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBCR(HumanBcellreceptor)ELISAKit人B細(xì)胞受體
仙客來培養(yǎng)基500毫升溶液/片劑
rabbitC-ReactiveProtein,CRPELISAKit兔子C反應(yīng)蛋白(CRP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
豬白介素17(IL-17)ELISA 試劑盒
Human ai Sc1-70 aibody (Sc1-70-Ab) ELISA Kit 人抗Sc1-70抗體(Sc1-70-Ab)試劑盒
Porcineleukemiainhibitoryfactorreceptor,LIFRELISAKit 豬白血病抑制因子受體(LIFR)試劑盒 進(jìn)口分裝
CLIAKitforAIF(Mouseapoptosisinducingfactor)ELISAKit小鼠凋亡誘導(dǎo)因子
血液/活化II(THROMBIN/FACTORIIa)活性比色法定量試劑盒20次
Mouseulasensitivethyroid-stimulatinghormone,U-TSHELISAKit小鼠高靈敏度促甲狀腺激素(U-TSH)試劑盒
人葡萄糖依賴性胰島素釋放多肽(GIP)ELISAKit ELISA.
人胰島素原(PI)ELISAKit ELISA.
人胰島素受體β(ISR-β)ELISAKit ELISA.
DDC重組小鼠 DOPA Decarboxylase / DDC 蛋白 Protein
α1-酸性糖蛋白(α1AGP)重組蛋白 Recombinant Alpha-1-Acid Glycoprotein (a1AGP)
PPIL1重組人 PPIL1 蛋白 Protein
IL5RA Protein Human 重組人 IL5Ra / CD125 蛋白
ENPP3 Protein Cynomolgus 重組食蟹猴 ENPP3 / CD203c 蛋白
CD276 Others Mouse 小鼠 B7-H3 / CD276 人細(xì)胞裂解液 NCI-N87(人胃癌細(xì)胞) CL-0081F81(貓腎細(xì)胞) 雜交瘤(B類);Z1510C6D10F4G6 Jurkat(懸浮) 小鼠原代脂肪血管基質(zhì)細(xì)胞 大鼠原代腦血管成纖維細(xì)胞
大鼠脊髓神經(jīng)少突膠質(zhì)原代細(xì)胞FSCN1 (Fascin 1 protein; fascin homolog 1, actin-bundling protein 0.5mgFSCN1 (Fascin 1 protein; fascin homolog 1, actin-bundling protein) 纖維束蛋白同源物1/肌動(dòng)蛋白集束蛋白/圓線蟲紫癜 抗原
IL36G Protein Human 重組人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169, His 標(biāo)簽)
CD7重組大鼠 CD7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein
P4HB Protein Mouse 重組小鼠 P4HB / ERBA2L 蛋白
SECTM1重組人 SECTM1 / K12 蛋白 Protein