大鼠骨外膜原代細(xì)胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代外周血來源內(nèi)皮祖細(xì)胞 GBC-SD(人膽囊癌細(xì)胞) BEL-7405 人肝癌細(xì)胞 1ml/T75 KG-1 人髓性紅白血病細(xì)胞 NCI-H292 人肺癌細(xì)胞(淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移) 小鼠原代胚胎成纖維細(xì)胞

大鼠骨外膜原代細(xì)胞

大鼠骨外膜細(xì)胞分離自骨外膜組織；骨外膜是指成骨細(xì)胞與破骨細(xì)胞緊貼骨密質(zhì)外面包著的那層膜；在骨外膜和骨內(nèi)膜中含有一種能夠生成骨的細(xì)胞，稱為成骨細(xì)胞，這種細(xì)胞具有使骨骼生長的功能。在骨外膜中還有另外一種專門破壞骨細(xì)胞的細(xì)胞，稱為破骨細(xì)胞。這兩種細(xì)胞作用相反又相互依據(jù)。成骨細(xì)胞像建筑工人，不停地生成新的骨組織，破骨細(xì)胞則像維修工人，不停地清除老化、死亡、破碎的骨結(jié)構(gòu)，并且還負(fù)責(zé)拆除“違章建筑"，就是除去不需要的多余的骨組織，從而使骨的整體結(jié)構(gòu)更符合生物力學(xué)的需要。正常情況下，兩種細(xì)胞之間處于動態(tài)的平衡之中，完成骨的生長發(fā)育的新陳代謝。骨折之后，成骨細(xì)胞首先啟動，從而促使新骨痂的生成，即骨折的愈合。但是，股痂只是恢復(fù)了骨的連續(xù)性，往往不符合生物力學(xué)的需要，改建塑形的過程則必須有破骨細(xì)胞的參與才能完成。

產(chǎn)品名稱：大鼠骨外膜細(xì)胞

組織來源：骨組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 成纖維細(xì)胞樣

傳代特性 可傳5代左右；3代以內(nèi)狀態(tài)最佳

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠骨外膜采用膠原酶消化法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠骨外膜經(jīng)Vimentin免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

小鼠β葡萄糖酸苷酶(βGD)ELISA 試劑盒

Human vitamin A (VA) ELISA Kit 人A(VA)試劑盒

HumanCathepsinK,cath-KELISAKit 人組織蛋白酶K(cath-K)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

HumancecropinB,CecB試劑盒人殺菌肽B(CecB)試劑盒規(guī)格：96T/48T

轉(zhuǎn)基因玉米GA21品系試劑盒20次

HumanSerumamyloidP，SAPELISAKit人血清淀粉樣蛋白P(SAP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

豚鼠基質(zhì)金屬蛋白酶9(MMP-9)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat bromodeoxyuridine (BrdU) ELISA Kit 大鼠溴脫氧核苷尿(BrdU)試劑盒

HumanPemphigusFoliaceus,PFELISAKit 人落葉型天皰瘡抗體(PF)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

Humancyclicadenosinemonophosphate,cAMP試劑盒人環(huán)0酸腺苷(cAMP)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織FES激酶活性定量試劑盒(A/B/C)20次

HumanProcalcitonin，PCTELISAKit人降鈣素原(PCT)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人組胺試劑盒   人組胺試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人組胺試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人組胺試劑盒、人組胺試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白試劑盒   人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白試劑盒、人足細(xì)胞標(biāo)記蛋白試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人總前列腺特異抗原試劑盒   人總前列腺特異抗原試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人總前列腺特異抗原試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人總前列腺特異抗原試劑盒、人總前列腺特異抗原試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

人總膽汁酸試劑盒   人總膽汁酸試劑盒   規(guī)格型號：96T/48T   人總膽汁酸試劑盒，規(guī)格型號：96T/48T，來源：試劑盒（進(jìn)口分裝），產(chǎn)品別名：人總膽汁酸試劑盒、人總膽汁酸試劑盒   保存條件：2-8℃   保質(zhì)期：6個月。

ART4重組食蟹猴 ART4 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

Integrin alpha 1 整合素α1抗原 0.5mgIntegrin alpha 1 整合素α1抗原

PIN1重組人 PIN1 / Rotamase Pin1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

AMIGO2 Protein Human 重組人 AMIGO2 蛋白 (His 標(biāo)簽)

LAIR1 Protein Mouse 重組小鼠 LAIR1 蛋白 (His 標(biāo)簽)

C2C12細(xì)胞，鼠肌原細(xì)胞 H08910(卵巢癌細(xì)胞) 大鼠胰島細(xì)胞瘤細(xì)胞;INS-1  METAP2 Others Mouse 小鼠 METAP2 / MAP2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液   小鼠神經(jīng)干細(xì)胞 小鼠骨骼肌肌肉母細(xì)胞，Sol8細(xì)胞 S-180 羊睪丸間質(zhì)細(xì)胞永生化細(xì)胞 人原代膀胱癌相關(guān)成纖維細(xì)胞

大鼠骨外膜原代細(xì)胞Des(Desmin 0.5mgDes(Desmin) 結(jié)蛋白抗原

ALPI Protein Human 重組人 Alkaline Phosphatase / ALPI 蛋白 (His 標(biāo)簽)

TNFRSF13C重組大鼠 BAFFR / TNFRSF13C 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein

TNFRSF21 Protein Mouse 重組小鼠 DR6 / TNFRSF21 蛋白 (His 標(biāo)簽)

S100P重組人 S100P / S100E 蛋白 Protein

1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。

2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細(xì)胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細(xì)胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細(xì)胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細(xì)胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。