大鼠睪丸支持原代細胞公司出售的產(chǎn)品：大鼠原代前列腺上皮細胞 CNE(人鼻咽癌細胞) SK-MEL-1 人皮膚黑色素瘤細胞 1ml/T75 HO-8910 人癌細胞 NAMALWA 人 Butt's淋巴瘤細胞 小鼠原代神經(jīng)星形膠質(zhì)細胞

大鼠睪丸支持原代細胞

大鼠睪丸支持細胞分離自睪丸；睪丸支持細胞又稱Sertoli細胞，在體內(nèi)呈不規(guī)則的高錐體形，細胞基部附著在基膜上，頂部伸至曲精小管腔面。它是生精細胞的支架，為其提供必需的營養(yǎng)物質(zhì)，能合成與分泌雄激素結(jié)合蛋白，為其提供高濃度的雄激素環(huán)境等，還具有構(gòu)成血-睪屏障，形成睪丸內(nèi)微環(huán)境，調(diào)節(jié)精子發(fā)生等功能。睪丸支持細胞是睪丸的主要組成細胞，能分泌多種生長因子和免疫抑制因子，不僅可為精子提供營養(yǎng)支持和免疫保護，也能對其他細胞，如胰島和神經(jīng)細胞提供營養(yǎng)支持，而且當其與胰島或神經(jīng)細胞共移植時，也能夠為這些細胞提供免疫保護，提高植活率。因此，睪丸支持細胞在細胞移植中具有廣泛的應(yīng)用前景。制備高活率的Sertoli不僅對Sertoli的基礎(chǔ)研究有重要價值，而且在精子發(fā)生等領(lǐng)域有重要意義。

產(chǎn)品名稱：大鼠睪丸支持細胞

組織來源：睪丸組織

產(chǎn)品規(guī)格：5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

方法簡介

公司實驗室分離的大鼠睪丸支持采用膠原酶消化法結(jié)合差速貼壁法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測

公司實驗室分離的大鼠睪丸支持經(jīng)Fas-L免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%（T25瓶），使覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

小鼠巨噬細胞集落刺激因子(M-CSF)ELISA 試劑盒

Rat ai cardiolipin aibody IgA (ACA-IgA) ELISA Kit 大鼠抗心0脂抗體IgA(ACA-IgA)試劑盒

Humahioredoxieductase,xRELISAKit 人硫氧還蛋白還原酶(xR)試劑盒 進口分裝

HumanaibodytogroupAseptococcalpolysaccharide,ASP試劑盒人A組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)試劑盒

植物過氧化氫酶(CATALASE)過氧化活性比色法定量試劑盒20次

Humanα-sarcomericactin,α-SCAELISAKit人α橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)試劑盒

豬S-100B蛋白(S-100B)試劑盒

Human epidermal baseme membrane aibody (EBMZ) ELISA Kit 人抗表皮細胞基底膜抗體(EBMZ)試劑盒

PorcineEpithelialgrowthfactor,EGFELISAKit 豬表皮生長因子(EGF)試劑盒 進口分裝

CLIAKitforaGT(Mouseangiotensinogen)ELISAKit小鼠血管緊張素原

血液蘋果酸脫氫酶(MDH)活性比色法定量試劑盒20次

Mouseoponi,Tn-TELISAKit小鼠肌鈣蛋白T(Tn-T)試劑盒

質(zhì)粒大量提取試劑盒   5T

PlasmidMaxiKit   10T

質(zhì)粒中量提取試劑盒   50T

PlasmidMidiKit   100T

EGFR重組人 EGFR / HER1 / ErbB1 蛋白 Protein

腦源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(BDNF)重組蛋白 Recombinant Brain Derived Neurotrophic Factor (BDNF)

GABARAP重組人 GABARAP / Apg8p1 蛋白 (His & MBP 標簽) Protein

CDK4 Protein Human 重組人 CDK4 / CMM3 蛋白 (GST 標簽)

NA Protein H7N9 重組甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 神經(jīng)酸酶 (Neuraminidase / NA) (高活性)

BALB/3T3 clone A31細胞，小鼠胚胎成纖維細胞 L1210(白血病細胞) EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細胞;KMY0901  FAM20B Others Human 人 FAM20B / Gxk1 人細胞裂解液   HK-2, 人腎皮質(zhì)近曲小管上皮細胞 羊原代胎盤絨毛膜滋養(yǎng)層細胞 兔原代成骨細胞

大鼠睪丸支持原代細胞Galanin 神經(jīng)節(jié)肽 0.5mgGalanin 神經(jīng)節(jié)肽

AGER Protein Human 重組人 AGER / RAGE 蛋白

BST1重組大鼠 CD157 / BST1 蛋白 (His 標簽) Protein

SLAMF8 Protein Mouse 重組小鼠 SLAMF8 / BLAME 蛋白 (His 標簽)

CXCL1重組人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & SUMO 標簽) Protein

1）復(fù)蘇細胞：將含有 1mL 細胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍，加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘，棄去上清液，補 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜（或?qū)?細胞懸液加入 10cm 皿中，加入約 8ml 培養(yǎng)基，培養(yǎng)過夜）。第二天換液并 檢查細胞密度。

2）細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。

1. 棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗細胞 1-2 次。

2. 加 1ml 消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培養(yǎng)瓶中，置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分 變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。

3. 按 6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基，輕輕打勻后吸出，在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘，棄去上清液，補加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。

4. 將細胞懸液按 1：2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

3）細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為類；

1. 細胞凍存時，棄去培養(yǎng)基后，PBS 清洗一遍后加入 1ml ，細胞變圓 脫 落后，加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化，可使用血球計數(shù)板計數(shù)。