詳細(xì)介紹
大鼠腸靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞
大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自腸靜脈;腸道指的是從胃幽門(mén)至的消化管。腸是消化管中最長(zhǎng)的一段,也是功能最重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,大腸主要濃縮食物殘?jiān)?,形成糞便,再通過(guò)直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱(chēng)身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng)。
英文名稱(chēng) | Rat Intestinal Vein Endothelial Cells | 組織來(lái)源 | 腸組織 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 產(chǎn)品貨號(hào) | YS-01X7131 |
細(xì)胞形態(tài) | 內(nèi)皮細(xì)胞樣 | 生長(zhǎng)特性 | 貼壁 |
產(chǎn)品名稱(chēng):大鼠腸靜脈內(nèi)皮細(xì)胞
組織來(lái)源:腸組織
產(chǎn)品規(guī)格:5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腸靜脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專(zhuān)用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腸靜脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
小鼠仙臺(tái)病毒(Sendai)試劑盒
Rat bone morphogenetic protein 4 (BMP-4) ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白4(BMP-4)試劑盒
Humanproteinase-aineuophilcytoplasmicaibody,PR3-ANCAELISAKit 人蛋白酶3特異性抗粒細(xì)胞胞質(zhì)抗體(PR3-ANCA)試劑盒 進(jìn)口分裝
Chickenheparansulfate,HS試劑盒雞類(lèi)肝素(HS)試劑盒
載玻片細(xì)胞CDK4蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseHeatShockProtein70,Hsp-70ELISAKit小鼠熱休克蛋白70(HSP-70)試劑盒
小鼠脫氫表雄酮S7(DHEA-S7)ELISA 試劑盒 96T/48T
Rat peroxisome proliferator activated receptor alpha (PPAR- alpha) ELISA Kit 大鼠過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α(PPAR-α)試劑盒
Humanserine/threonineproteinkinase,STKELISAKit 人絲/蘇蛋酸酶(STK)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
ChickenParathyroidhormone,PTH試劑盒雞甲狀旁腺激素(PTH)試劑盒規(guī)格:96T/48T
載玻片細(xì)胞PAR-1蛋白表達(dá)熒光顯微鏡試劑盒10/20次
MouseFolicacid,FAELISAKit小鼠(FA)試劑盒規(guī)格:96T/48T
小鼠脫酶(ID)試劑盒 96T/48T
小鼠褪黑素(MT/MLT)試劑盒 96T/48T
小鼠透明質(zhì)酸結(jié)合蛋白(HABP)試劑盒 96T/48T
小鼠透明質(zhì)酸(HA)試劑盒 96T/48T
IGFBP4重組食蟹猴 IGFBP4 蛋白 Protein
Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原 0.5mgMelan-A/MART-1 黑色素-A(抗原)
PDE9A重組人 PDE9A 蛋白 (His & GST 標(biāo)簽) Protein
CBFB Protein Human 重組人 CBFB / CBF-beta 蛋白
KLK7 Protein Mouse 重組小鼠 KLK7 / Kallikrein 7 蛋白
95-D細(xì)胞,人高轉(zhuǎn)移肺癌細(xì)胞 轉(zhuǎn)血小板基因倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞,CHO-pt細(xì)胞 CM-M018小鼠頜下腺上皮細(xì)胞Eca-109細(xì)胞,人食管癌細(xì)胞 人腦瘤細(xì)胞,SF126細(xì)胞 中國(guó)倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);CHO Hu 164 SCF 17 RA, 豬原代視網(wǎng)膜色素上皮細(xì)胞 小鼠原代腎間質(zhì)成纖維細(xì)胞
大鼠腸靜脈內(nèi)皮原代細(xì)胞PTEN/MMAC1 一種抑制基因抗原 0.5mgPTEN/MMAC1 一種抑制基因抗原
CECR1 Protein Human 重組人 CECR1 / ADA2 蛋白
NS2重組甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural Protein 2 / NS2 Protein
EFNA5 Protein Human 重組人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)
FCGR2A重組人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (166 Arg, His 標(biāo)簽) Protein
1)復(fù)蘇細(xì)胞:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過(guò)夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過(guò)夜)。第二天換液并 檢查細(xì)胞密度。
2)細(xì)胞傳代:如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤(rùn)洗細(xì)胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若細(xì)胞大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類(lèi);
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。