詳細(xì)介紹
本網(wǎng)站銷售的化學(xué)產(chǎn)品僅供科學(xué)研究或工業(yè)應(yīng)用,不直接用于食品、藥品、臨床或動(dòng)物的診斷或治療!
細(xì)胞屬性:
方法簡(jiǎn)介
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮采用-膠原酶聯(lián)合消化法結(jié)合差速貼壁法、并通過(guò)內(nèi)皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來(lái),細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測(cè)
公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮經(jīng)CD31免疫熒光鑒定,純度可達(dá)90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。
產(chǎn)品名稱 | 大鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮原代細(xì)胞 | 組織來(lái)源 | 腸組織 |
英文名稱 | Rat Intestinal Artery Endothelial Cells | 貨號(hào) | YS-01X7127 |
產(chǎn)品規(guī)格 | 5×10?Cells/T25培養(yǎng)瓶 | 用途 | 僅供科研實(shí)驗(yàn) |
細(xì)胞簡(jiǎn)介:
大鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞分離自腸動(dòng)脈;腸道指的是從胃幽門(mén)至的消化管。腸是消化管中最長(zhǎng)的一段,也是功能最重要的一段。哺乳動(dòng)物的腸包括小腸、大腸和直腸3大段。大量的消化作用和幾乎全部消化產(chǎn)物的吸收都是在小腸內(nèi)進(jìn)行的,大腸主要濃縮食物殘?jiān)?,形成糞便,再通過(guò)直腸經(jīng)排出體外。腸道堪稱身體最勞累的器官——每天不停地消化、吸收食物,以提供足夠的養(yǎng)分,其實(shí)它的功能還遠(yuǎn)不止此——它還是機(jī)體內(nèi)最大的微生態(tài)系統(tǒng)。
培養(yǎng)信息:
包被條件 PLL(0.1mg/ml),明膠(0.1%)
培養(yǎng)基 含FBS、生長(zhǎng)添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長(zhǎng)特性 貼壁
細(xì)胞形態(tài) 內(nèi)皮細(xì)胞樣
傳代特性 可傳2-3代
消化液 0.25%
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細(xì)胞培養(yǎng)方法:
1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;
②加入2ml0.25%(T25瓶),使覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;
③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;
④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;
⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;
⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。
2、細(xì)胞復(fù)蘇:
①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。
②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。
3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種
①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%(T25瓶)
②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入培養(yǎng)基終止消化;
③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;
④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。
操作步驟:
1.將無(wú)菌的蓋玻片置于細(xì)胞培養(yǎng)皿中,將細(xì)胞懸液接種于培養(yǎng)皿中進(jìn)行細(xì)胞爬片,待細(xì)胞長(zhǎng)至80%時(shí)取出爬片。
2. 用PBS浸洗爬片3次,4%的多聚甲醛固定爬片15min,再次用PBS浸洗玻片3次,每次3min。
3. 0.5% Triton X-100(PBS配制)室溫孵育爬片20min,使細(xì)胞通透。
4. 3% H2O2滴加爬片上以阻斷內(nèi)源性過(guò)氧化物酶,室溫孵育15min(一般用甲醇或蒸餾水稀釋30%過(guò)氧化氫),PBS沖洗3次,每次3min。
5. 封閉血清室溫孵育20min,PBS沖洗3次,每次3min。
6. 細(xì)胞特異性一抗孵育:按照抗體說(shuō)明書(shū)稀釋比例稀釋好一抗,滴加在爬片上,于4°C濕盒中孵育一夜,PBS沖洗3次,每次3min。
7. 二抗孵育:選與一抗對(duì)應(yīng)的二抗,按比例稀釋后滴加在爬片上,37°C濕盒中孵育30min,PBS沖洗3次,每次3min。
8. 將爬片周圍水漬吸干,爬片上滴加新鮮配制的DAB顯色液,顯微鏡下觀察,當(dāng)出現(xiàn)棕黃色或棕褐色的陽(yáng)性信號(hào)時(shí)用蒸餾水沖洗終止顯色。
9. 復(fù)染:用Harris蘇木素復(fù)染30s~1min,水洗后用1%的鹽酸酒精分化,再用蒸餾水(或PBS)水洗返藍(lán)。
10. 封片:將中性樹(shù)膠滴在爬片一側(cè),再用蓋玻片蓋上,先放平蓋玻片一側(cè)再輕輕放下另一側(cè),以免產(chǎn)生氣泡,封好的爬片平放置于通風(fēng)廚中晾干。
11. 鏡檢觀察。
公司產(chǎn)品:
小鼠血清(NO)ELISA 試劑盒
One target of rapamycin (mTOR) ELISA Kit 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)試劑盒
Humanβ-lactamaseELISAKit 人β內(nèi)酰胺酶(β-lactamase)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitfor(BAX)RatBcl-2associatedXprotein,BaxELISAKit大鼠Bcl-2相關(guān)X蛋白
熒光穩(wěn)定/稀釋溶液10毫升
MouseIerleukin16,IL-16ELISAKit小鼠白介素16(IL-16)試劑盒規(guī)格:96T/48T
豚鼠免疫球蛋白A(IgA)試劑盒 ,英文名: IgA ELISA Kit
Human hypoxia inducible factor 1 alpha (HIF-1 alpha) ELISA Kit 人低氧誘導(dǎo)因子1α(HIF-1α)試劑盒
Monkeysolublevasccularcelladhesionmolecule1,sVCAM-1ELISAKit 猴可溶性血管細(xì)胞粘附分子1(sVCAM-1)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝
CLIAKitforBidELISAKit大鼠BH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白
細(xì)菌檸檬酸利用試劑盒20次
rabbitLeptin,LEPELISAKit兔子瘦素(LEP)試劑盒規(guī)格:96T/48T
魚(yú)類釋放激素試劑盒 魚(yú)類釋放激素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 魚(yú)類釋放激素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:魚(yú)類釋放激素試劑盒、魚(yú)類釋放激素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
魚(yú)類白介素1α試劑盒 魚(yú)類白介素1α試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 魚(yú)類白介素1α試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:魚(yú)類白介素1α試劑盒、魚(yú)類白介素1αeisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
魚(yú)促上腺皮質(zhì)激素試劑盒 魚(yú)促上腺皮質(zhì)激素試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 魚(yú)促上腺皮質(zhì)激素試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:魚(yú)促上腺皮質(zhì)激素試劑盒、魚(yú)促上腺皮質(zhì)激素eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
豬甘油三酯試劑盒 豬甘油三酯試劑盒 規(guī)格型號(hào):96T/48T 豬甘油三酯試劑盒,規(guī)格型號(hào):96T/48T,來(lái)源:試劑盒(進(jìn)口分裝),產(chǎn)品別名:豬甘油三酯試劑盒、豬甘油三酯eisa試劑盒 保存條件:2-8℃ 保質(zhì)期:6個(gè)月。
CD79B重組大鼠 CD79B / B29 蛋白 Protein
FGF1 (aFGF 0.5mgFGF1 (aFGF )(ECGF-beta)(HBGF-1) 肝素結(jié)合生長(zhǎng)因子( 酸性成纖維細(xì)胞生長(zhǎng)因子)(多肽片斷抗原)
CCL17重組人 CCL17 / TARC / SCYA17 蛋白 Protein
IL36A Protein Human 重組人 IL1F6 / IL36A 蛋白
EFNA5 Protein Mouse 重組小鼠 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 標(biāo)簽)(Fc 標(biāo)簽)
786-O[786-0]細(xì)胞,腎透明細(xì)胞腺癌細(xì)胞 單核細(xì)胞白血病細(xì)胞,J-111細(xì)胞 人小細(xì)胞肺癌細(xì)胞;NCI-H209 視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細(xì)胞Many U-2 OS細(xì)胞,骨肉瘤細(xì)胞 人細(xì)胞系,KMB-17細(xì)胞 小鼠胚胎成纖維細(xì)胞;NIH/3T3 豬原代小腸黏膜上皮細(xì)胞 小鼠原代破骨細(xì)胞
大鼠腸動(dòng)脈內(nèi)皮原代細(xì)胞Cyclin D3(C-term 0.5mgCyclin D3(C-term) 周期素D3抗原
ACVR1 Protein Human 重組人 ALK-2 / ACVR1 / ALK2 蛋白 (His 標(biāo)簽)
TDGF1重組大鼠 Cripto / TDGF1 蛋白 (His 標(biāo)簽) Protein
CD200R4 Protein Mouse 重組小鼠 CD200R4 / CD200 Receptor 4 / CD200RLa 蛋白 (His 標(biāo)簽)
FABP6重組人 FABP6 / I-BABP 蛋白 Protein