詳細(xì)介紹
小鼠原代甲狀旁腺細(xì)胞專用培養(yǎng)基
小鼠原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基由團(tuán)隊(duì)精心優(yōu)化,經(jīng)過長期測試,本產(chǎn)品可保持小鼠原代甲狀旁腺細(xì)胞最佳的生長狀態(tài)。
本產(chǎn)品中已包含小鼠原代甲狀旁腺細(xì)胞胞生長所需的各種成分,無需添加任何成分,可直接用于小鼠原代甲狀旁腺細(xì)胞的培養(yǎng)。
產(chǎn)品主要成分:
名稱 | 體積 | 濃度 | 保存條件 |
原代上皮細(xì)胞基礎(chǔ)培養(yǎng)基 | 500mL | 1× | 4℃、避光 |
原代上皮細(xì)胞培養(yǎng)添加劑 | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
胎牛血清(FBS) | 25mL | 終濃度5% | -20℃、避光 |
雙抗(P/S) | 5mL | 100× | -20℃、避光 |
運(yùn)輸和保存
運(yùn)輸:放置于含有生物冰袋的保溫箱中低溫運(yùn)輸
保存方法:2℃~8℃,避光,保存2個(gè)月;-20℃,避光,保存6個(gè)月。
1)復(fù)蘇小鼠原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基:將含有 1mL 細(xì)胞懸液的凍存管在 37℃水浴中迅速搖晃解凍,加 入 4mL 培養(yǎng)基混合均 勻。在 1000RPM 條件下離心 4 分鐘,棄去上清液,補(bǔ) 加 1-2mL 培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中培 養(yǎng)過夜(或?qū)?細(xì)胞懸液加入 10cm 皿中,加入約 8ml 培養(yǎng)基,培養(yǎng)過夜)。第二天換液并 檢查小鼠原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基密度。
2)細(xì)胞傳代:如果小鼠原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基密度達(dá) 80%-90%,即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的 PBS 潤洗小鼠原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于 37℃培 養(yǎng)箱中消化 1-2 分鐘,然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況,若小鼠原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基大部分 變圓并脫落,迅速拿回操作臺(tái),輕敲幾下培養(yǎng) 瓶后加少量培養(yǎng)基終止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶補(bǔ)加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在 1000RPM 條件下離心 4 分 鐘,棄去上清液,補(bǔ)加 1-2mL 培養(yǎng)液后吹勻。
4. 將細(xì)胞懸液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3)細(xì)胞凍存:待小鼠原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基生長狀態(tài)良好時(shí),可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為類;
1. 細(xì)胞凍存時(shí),棄去培養(yǎng)基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml ,細(xì)胞變圓 脫 落后,加入 1ml 含血清的培養(yǎng)基終止消化,可使用血球計(jì)數(shù)板計(jì)數(shù)。
2. 4 min 1000rpm 離心去掉上清。加 1ml 血清重懸細(xì)胞,根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加 入血 清和 DMSO,輕輕混勻,DMSO 終濃度為 10%,細(xì)胞密度不低于1x106/ml,每支凍存管凍存 1ml 細(xì)胞懸液,注意凍 存管做好標(biāo)識(shí)。
3. 將凍存管置于程序降溫盒中,放入-80 度冰箱,2 個(gè)小時(shí)以后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
IFNW1 Others Human 人 Ierferon omega-1 / IFNω / IFNW1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) | 轉(zhuǎn)移生長因子β受體2抗體(TGF-βRⅡ,TGFβRⅡ) |
酸化熱休克蛋白-70抗體 | 酸化紅細(xì)胞陰離子交換蛋白1抗體 |
蛋白激酶A2抗體 | 酸化自噬相關(guān)蛋白9A抗體 |
G蛋白γ 1/Gγ 1 抗體 | 酸化細(xì)胞間粘附分子1抗體 |
酸化周期素D3抗體 | 腺苷三酸結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體9抗體 |
CD349抗體 | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KMY0908 |
SW 1990人胰腺癌細(xì)胞系 1990 human pancreatic cancer cell line SW L-15+10%FBS | CD84 Others Cynomolgus 食蟹猴 CD84 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
FK506結(jié)合蛋白38抗體 | FGFR1 Others Mouse 小鼠 FGFR1 / CD331 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
腺苷酸環(huán)化酶5抗體 | RH-35(大鼠肝癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 甲型流感 H7N8 (A/mallard/Netherlands/33/2006) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
SV40T轉(zhuǎn)化的人胚腎細(xì)胞;293T | RTE(大鼠氣管上皮細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 |
腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白BAMBI抗體 | 肺大動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
酸化周期素依賴性激酶5抗體 | 小鼠原代甲狀旁腺細(xì)胞專用培養(yǎng)基SW1116(人結(jié)腸腺癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 小腸隱窩上皮細(xì)胞Many types of cells包裝:5 × 105次方(1ml) |
Caki-2(人腎透明細(xì)胞癌細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 人腎小管上皮細(xì)胞HRPTEpiC | MERTK Others Human 人 MERTK / Mer 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對照) |
THC-8307細(xì)胞,人高分化結(jié)腸腺癌細(xì)胞系 人低侵襲性脈絡(luò)膜黑色素素瘤細(xì)胞,OCM-1A細(xì)胞 綠色熒光蛋白標(biāo)記人胃癌細(xì)胞;MGC803-GFP | EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;HH-29 |
1.使用小鼠原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基時(shí)應(yīng)注意無菌操作,避免污染。
2.本產(chǎn)品含有血清和雙抗,如無特別需要不用額外再添加血清和雙抗,可以直接使用。
3.為保持本小鼠原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基的優(yōu)良使用效果,不宜將其長時(shí)間放置于室溫或較高的溫度環(huán)境中。
4.所有產(chǎn)品請于保質(zhì)期內(nèi)使用,超出保質(zhì)期,必須放棄使用。
5.本產(chǎn)品只供進(jìn)一步科研使用,不可應(yīng)用于臨床等其他方面。
6.培養(yǎng)基凍融后,可能會(huì)有少量絮狀物析出,不影響小鼠原代甲狀旁腺細(xì)胞培養(yǎng)基正常使用。