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双酚A（BPA）elisa试剂盒实验操作注意事项
阅读：44 发布时间：2025-7-25双酚A（BPA）elisa试剂盒实验操作注意事项在实验过程中，需特别注意以下操作细节以确保检测结果的准确性：
1. 标准品稀释与加样
标准品需严格按照说明书梯度稀释，避免反复冻融导致效价降低。加样时枪头避免触碰微孔板内壁，防止交叉污染。建议设置复孔以减少偶然误差。
2. 温育条件控制
酶标板覆膜后需确保温育环境均匀，避免因温度波动影响抗原抗体结合。若使用水浴温育，需防止冷凝水渗入孔内导致浓度偏差。
3. 洗板操作规范
手动洗板时需拍干液体，但避免过度用力导致包被抗原脱落。自动洗板机需提前校准注液量，确保每孔洗涤液充盈一致。残留洗涤液可能干扰OD值读数。
4. 显色与终止时机
TMB显色时间应严格控制在说明书范围内，显色过深可能导致标准曲线高值区线性不佳。终止液加入后须在10分钟内完成检测，避免颜色衰退。
5. 数据记录与质控
每批次实验需同步检测空白孔、阴性对照及质控品。若CV值＞15%，需排查加样误差或试剂失效可能。建议保存原始酶标仪读数截图以备复核。
注意事项延伸：
- 样本预处理时，含脂质较多的血清需离心去除悬浮颗粒；
- 试剂盒从冷藏取出后需平衡至室温再使用，低温可能影响酶活性；
- 不同批号试剂组分不可混用，避免校准曲线偏移。
通过规范操作与细节管控，可显著提升BPA检测的重复性与灵敏度，为环境或生物样本中的痕量分析提供可靠依据。
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