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技術(shù)文章

酶標(biāo)記物方法注意事項有哪些

閱讀:1165          發(fā)布時間:2019-3-13

        酶標(biāo)記物包括酶標(biāo)記抗原、酶標(biāo)記抗體和酶標(biāo)記SPA等。酶標(biāo)記物質(zhì)量的好壞直接關(guān)系到免疫酶技術(shù)的成功與否,因此被稱為關(guān)鍵的試劑。酶標(biāo)記物中常用的是酶標(biāo)記抗體,它是將酶與特異性抗體經(jīng)適當(dāng)方法連接而成。酶標(biāo)記抗體的質(zhì)量主要取決于純度好、活性強及親和力高的酶和抗體,其次要有良好的制備方法。目前,高質(zhì)量的酶(如辣根過氧化物酶,簡稱HRP)國內(nèi)已有商品供應(yīng)。高質(zhì)量的抗體則可通過提取純化而獲得。在制備方法上,宜選用產(chǎn)率高、不影響結(jié)合物的活性和不混雜干擾性物質(zhì)且操作簡便易行的方法。

注意事項
1. 在具備高質(zhì)量HRP的條件下,所要標(biāo)記的抗體也要活性高,效價高(低1∶16),純度
高,親和力好,這是保證標(biāo)記物效價高,免疫活性好的首要條件。
2. 所使用試劑的PH和濃度及用量必須嚴(yán)格掌握。所用試劑,*(或必需)新鮮配
制。如在戊二醛標(biāo)記法中所用戊二醛應(yīng)為新鮮純品,因戊二醛儲存過久可形成縮和體(雜
質(zhì))。否則,影響標(biāo)記效果。
3. 室溫攪拌時須避光,室內(nèi)溫度一般在25℃為宜。標(biāo)記物每次透析前,須認真檢
查,防止漏液。
4. 濃的標(biāo)記物相當(dāng)穩(wěn)定,常加入30~40%甘油于-10℃下保存。4℃可保存1~2年,但稀釋成1∶10,只能保存數(shù)周。已配制的使用液應(yīng)在12小時內(nèi)用完。切忌反復(fù)凍融。

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