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技術(shù)文章

ELISA標準曲線樣品檢測4個要點分享

閱讀:698          發(fā)布時間:2019-3-7

     ELISA中,標準曲線的繪制與計算是整個實驗流程的必要步驟,也是關(guān)鍵步驟之一。今天為大家?guī)砹?ELISA試劑盒標準曲線樣品檢測要點分享,一起來看下吧:

1.樣品的濃度等指標是根據(jù)標準曲線計算出來的,所以首先要把做標準曲線看作是比做正式實驗還要重要的一件事,否則后面的實驗結(jié)果無從談起。

2.設置標準曲線樣品的標準濃度范圍要有一個比較大的跨度,并且要能涵蓋你所要檢測實驗樣品的濃度,即樣品的濃度要在標準曲線濃度范圍之內(nèi),包括上限和下限。而對于呈s型的標準曲線,盡量要使實驗樣品的濃度在中間坡度陡段,即曲線幾乎成直線的范圍內(nèi)。

3.采用倍比稀釋法配制標準曲線中的標準樣品濃度,這樣就能夠保證標準樣品的濃度不會出現(xiàn)較大的偏離。

4.檢測標準樣品時,應按濃度遞增順序進行,以減少高濃度對低濃度的影響,提高準確性。

5.標準曲線的樣品數(shù)一般為7個點,但至少要保證有5個點。

6.做出的標準曲線相關(guān)系數(shù)因?qū)嶒炓蟛煌兴儎?,但一般來說,相關(guān)系數(shù)r至少要大于0.98,對于有些實驗,至少要0.99甚至是0.999。

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