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人脂肪微血管內(nèi)皮細胞，HAMECC細胞培養(yǎng)的過程
閱讀：180 發(fā)布時間：2024-6-27人脂肪微血管內(nèi)皮細胞，HAMECC細胞培養(yǎng)的一般過程：
一、準備工作
1.器皿的清潔、干燥和消毒；
2.培養(yǎng)基與其他試劑的配制、分裝及滅菌；
3.無菌室或超凈臺的清潔與消毒；
4.培養(yǎng)箱及其他儀器的檢查與調(diào)試等等。
二、取材
在無菌環(huán)境下從機體取出某種組織細胞。理論上各種動物和人體組織都可用于培養(yǎng)，但幼體組織尤其是胚胎組織更易培養(yǎng)。取材時應在無菌環(huán)境下盡快處理并培養(yǎng)。
三、培養(yǎng)
1.組織塊培養(yǎng)，直接放置于器皿底部，幾個小時后再加入培養(yǎng)基；細胞系培養(yǎng)，先行計數(shù)，按一定量接入器皿并直接加入培養(yǎng)基。細胞進入培養(yǎng)器皿后立即放入培養(yǎng)箱中，使細胞今早進入生長狀態(tài)。
2.每隔一定時間觀察細胞生長狀況、形態(tài)、有無污染、PH值以及二氧化碳濃度等等。
3.原代細胞一般有一段潛伏期，潛伏期內(nèi)細胞不分裂，但可貼壁或游走。過了潛伏期細胞便進入分裂期。細胞長滿平底之后要代傳培養(yǎng)。
四、凍存及復蘇
一般采用-196℃的液氮凍存，凍存管中加入含有保護劑的培養(yǎng)基。復蘇即從液氮中取出凍存管后，立即放入37℃的水中迅速融解，然后將人脂肪微血管內(nèi)皮細胞，HAMECC細胞轉(zhuǎn)入培養(yǎng)器皿中進行培養(yǎng)。