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阿菲波菌屬通用PCR進口試劑盒設置 PCR 反應

閱讀:215          發(fā)布時間:2020-5-21

 阿菲波菌屬通用PCR進口試劑盒設置 PCR 反應(40 uL 體系)  

1. 在 N+2 個 PCR 管中加入下列成分,下面以樣品數(shù)為 1 舉例(注意:如果一次使用DNA 釋放劑,*每個樣品設置兩個模板用量的 PCR 反應,兩個反應的模板使用量差 10 倍,由此確定*用量,以后就用效果*的那個模板用量):

2. 輕柔混勻后上機,按下面參數(shù)進行 PCR。

3. 電泳檢測 PCR 產物。預期的 PCR 產物長度為 216bp。陽性對照必須有此條帶出

現(xiàn),陰性對照必須無任何擴增,否則實驗無效。對沒有擴增產物的樣品,需要用通用引物(如真核生物專一 PCR 引物,需自備)測試是否有抑制劑或樣品是否濃度達到 PCR 的要求,如果通用引物也擴不出來,需要濃縮并再次純化 DNA 樣品,或者更換 DNA 提取方法,直到通用引物能夠擴增出預計大小的片段。

 

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