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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
上海雅吉的BeyoRT™ II cDNA*鏈合成試劑盒（RNase H-），即BeyoRT™II First Strand cDNA Synthesis Kit （RNase H minus），是一種采用了經(jīng)過(guò)改造和優(yōu)化的BeyoRT™ II M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶（RNase H-），用于以總RNA、mRNA等為模板反轉(zhuǎn)錄合成cDNA*鏈的試劑盒。
詳細(xì)介紹
上海雅吉的BeyoRT™ II cDNA*鏈合成試劑盒(RNase H-)，即BeyoRT™II First Strand cDNA Synthesis Kit (RNase H minus)，是一種采用了經(jīng)過(guò)改造和優(yōu)化的BeyoRT™ II M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)，用于以總RNA、mRNA等為模板反轉(zhuǎn)錄合成cDNA*鏈的試劑盒。本試劑盒包含了進(jìn)行cDNA*鏈合成所需的各種試劑。
使用本試劑盒合成的*鏈，可以直接用于后續(xù)的常規(guī)PCR、real-time PCR也稱定量
PCR(quantitative PCR, qPCR)、cDNA的第二鏈合成以及cDNA文庫(kù)的構(gòu)建等。
BeyoRT™ II cDNA*鏈合成試劑盒(RNase H-)可以輕松完成長(zhǎng)度為8 kb及以下基因的反轉(zhuǎn)錄(參考圖1)，反轉(zhuǎn)錄的zui大長(zhǎng)度可以超過(guò)10 kb。在采用BeyoRT™ II M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)的情況下，由于缺失了RNase H酶活性，RNA和DNA雙鏈復(fù)合物中的RNA不會(huì)被降解，這樣反轉(zhuǎn)錄出來(lái)的cDNA的長(zhǎng)度就會(huì)更長(zhǎng)，并且產(chǎn)量更高。
圖1. 使用本試劑盒對(duì)總RNA反轉(zhuǎn)錄后，對(duì)于不同長(zhǎng)度的cDNA進(jìn)行PCR擴(kuò)增后的電泳效果圖。圖中可見對(duì)于0.2-8kb的cDNA可以非常高效地被反轉(zhuǎn)錄。
本試劑盒中的BeyoRT™ II M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-)熱穩(wěn)定性高，zui適反應(yīng)溫度為42-45℃，但當(dāng)溫度達(dá)到50℃時(shí)仍具有很高活性，且可獲得較高產(chǎn)量的cDNA。
BeyoRT™ II cDNA*鏈合成試劑盒(RNase H-)中提供了RNase Inhibitor，確保在反轉(zhuǎn)錄過(guò)程中的RNA不會(huì)被RNA酶所降解并取得較好的反轉(zhuǎn)錄效果。
試劑盒還提供了Oligo(dT)18和random hexamer這兩種引物，前者適合用于帶有Poly(A)尾的mRNA的反轉(zhuǎn)錄，后者進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄時(shí)不需要poly(A)尾。也可以自行采用基因特異性引物進(jìn)行cDNA*鏈的合成。
用于體積為20微升的cDNA*鏈合成反應(yīng)時(shí)，不同包裝的本試劑盒足夠分別進(jìn)行20個(gè)，100個(gè)及500個(gè)cDNA*鏈樣品的合成。
包裝清單：
裝清單：
產(chǎn)品編號(hào) 產(chǎn)品名稱 包裝
D7168L-1 BeyoRT™ II M-MLV反轉(zhuǎn)錄酶(RNase H-) 500μl
D7168L-2 Reaction Buffer (5X) 2.5ml
D7168L-3 RNase Inhibitor (20U/μl) 500μl
D7168L-4 dNTP Mix (10 mM each) 1ml
D7168L-5 Oligo(dT)18 Primer (0.5μg/μl) 500μl
D7168L-6 Random Hexamer Primer (0.2μg/μl) 500μl
D7168L-7 DEPC-treated Water 7.5ml
— 說(shuō)明書 1份
保存條件：
-20℃保存。
注意事項(xiàng)：
對(duì)于GC含量比較高的RNA的反轉(zhuǎn)錄，產(chǎn)品的使用說(shuō)明中都給予了特別說(shuō)明，請(qǐng)予以關(guān)注。
BeyoRT™ II cDNA*鏈合成試劑盒(RNase H-)*于專業(yè)人員的科學(xué)研究用，不得用于臨床診斷或治療，不得用于食品或藥品，不得存放于普通住宅內(nèi)。
為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。