ID8小鼠卵巢癌细胞转染了NTKmT逆转录病毒载体，表达多瘤病毒中T抗原。血管性血友病因子的分泌和吸收荧光标记的低密度脂蛋白（LDL）证实了该细胞株的内皮细胞特性。细胞因子和脂多糖（LPS）可诱导细胞分泌MAdCAM-1和E选择素。TNF-α、IL-1和LPS的诱导是时间和浓度依赖。早代数的未刺激细胞会分泌MAdCAM-1和VCAM-1，但找过30代不分泌

产品特点
种属：小鼠
组织来源：乳腺组织
生长特性：贴壁
细胞形态：上皮细胞样
ID8小鼠卵巢癌细胞背景描述该细胞转染了NTKmT逆转录病毒载体，表达多瘤病毒中T抗原。血管性血友病因子的分泌和吸收荧光标记的低密度脂蛋白（LDL）证实了该细胞株的内皮细胞特性。细胞因子和脂多糖（LPS）可诱导细胞分泌MAdCAM-1和E选择素。TNF-α、IL-1和LPS的诱导是时间和浓度依赖。早代数的未刺激细胞会分泌MAdCAM-1和VCAM-1，但找过30代不分泌。细胞会组成型分泌ICAM-1，并且表达量会在LPS、IL-1和TNF-α刺激下增多。P选择素在早代数和晚代数细胞中受TNF-α诱导分泌，但30代后分泌量增加。

生长培养基：RPMI-1640(货号:PM150110)＋10% FBS(货号:164210-500)＋1% P/S(货号:PB180120)
培养条件
气相：空气，95%；CO2，5%
温度：37℃

ID8小鼠卵巢癌细胞消化法：

实验材料    细胞
试剂、试剂盒    胰蛋白酶酒精PBS
仪器、耗材    超净工作台酒精灯酒精棉球培养箱显微镜吸管离心管离心机
实验步骤    
一、传代前准备
 
1.  预热培养用液：把已经配制好的装有培养液、PBS液和胰蛋白酶的瓶子放入37℃水浴锅内预热。
 
2.  用75%酒精擦拭经过紫外线照射的超净工作台和双手。
 
3.  正确摆放使用的器械，保证足够的操作空间，不仅便于操作而且可减少污染。
 
4.  点燃酒精灯，注意火焰不能太小。
 
5.  准备好将要使用的消毒后的空培养瓶，放入微波炉内高火，8分钟再次消毒。
 
6.  取出预热好的培养用液，用酒精棉球擦拭好后方能放入超净台内。
 
7.  从培养箱内取出细胞，注意取出细胞时要旋紧瓶盖，用酒精棉球擦拭显微镜的台面，再在镜下观察细胞。
 
8.  打开瓶口：将各瓶口一一打开，同时要在酒精灯上烧口消毒。
 
9.  稍微摇摇，然后从对侧倒掉培养液，用酒精棉球擦拭后一滴，注意要靠近酒精灯。
 
二、胰蛋白酶消化
 
1.  加入消化液：用PBS清洗（冲洗），加入适量消化液（胰蛋白酶液），注意消化液的量以盖住细胞，消化温度是37℃。
 
2.  显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察消化细胞，若胞质回缩，细胞之间不再连接成片，表明此时细胞消化适度，然后让其停止消化。
 
3.  倒掉消化液加入培养液，弃去胰蛋白酶液，加入新鲜的培养液。注意要在对测加入培养液。
 
三、吹打分散细胞

1.  吹打制悬：用吸管将已经消化细胞吹打成细胞悬液。
 
2.  吸细胞悬液入离心管：将细胞悬液吸入10 ml 离心管中。
 
3.  平衡离心：平衡后将离心管放入台式离心机中，以1 000转/分钟离心5分钟。
 
4.  弃上清液，加入新培养液：弃去上清液，加入2 ml 培养液，用滴管轻轻吹打细胞制成细胞悬液。
 
四、分装稀释细胞
 
1.  分装：将细胞悬液吸出分装至2~3个培养瓶中，加入适量培养基旋紧瓶盖。
 
2.  显微镜下观察细胞：倒置显微镜下观察细胞量，必要是计数。注意密度过小会影响传代细胞的生长，传代细胞的密度应该不低于5×105/ml，后要做好标记。
 
五、传代培养
 
用酒精棉球擦拭培养瓶，适当旋松瓶盖，放入CO2培养箱中继续培养。传代细胞2小时后开始贴附在瓶壁上。当生长细胞铺展面积占培养瓶底面积25%时为一个+，占50%为++，占75%时为+++。
收起 
注意事项    
1.  严格的无菌操作
 
2.  适度消化：消化的时间受消化液的种类、配制时间、加入培养瓶中的量等诸多因素的影响，消化过程中应该注意培养细胞形态的变化，一旦胞质回缩，连接变松散，或有成片浮起的迹象就要立即终止消化。
 
附：0.25% 胰酶（胰蛋白酶，Trypsin）
 
配方：100 ml PBS，0.25 g 胰酶。
 
步骤：先配100 ml PBS。 称胰酶0.25 g。加入PBS中，低速搅拌。调pH7.4。过滤，分装，-20℃保存，4℃短期内用完。
 
4T1小鼠乳腺癌细胞注意：低速很重要，机械搅拌对酶是一种冲击，如果起沫，酶就变性了。低温，防止酶失活；对难消化的细胞，在上述配方中，加入0.02 g 的EDTA（0.02%）