详细介绍
1.产品名称:小鼠子宫成纤维细胞
2.组织来源:子宫组织
3.产品规格:5×10^5cells/T25细胞培养瓶
4.细胞简介:
小鼠子宫成纤维细胞分离自子宫组织;子宫是孕育胎儿的器官,位于盆腔中部,膀胱与直肠之间,其位置可随膀胱与直肠的充盈程度或体位而有变化。子宫的正常位置主要依靠子宫诸韧带、盆膈、尿生殖膈及会阴中心腱等结构维持,这些结构受损或松弛时,可以引起子宫脱垂。成纤维细胞(Fibroblast)是疏松结缔组织的主要细胞成分,由胚胎时期的间充质细胞分化而来;成纤维细胞较大,轮廓清楚,多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构,其细胞核呈规则的卵圆形,核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛,细胞质嗜弱碱性,具明显的蛋白质合成和分泌活动,在一定条件下,它可以实现跟纤维细胞的互相转化;成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的子宫成纤维细胞呈圆形、折光性良好,悬浮于培养基中。30min细胞贴壁,其中部分开始伸出伪足,表现为小的突起;6h后细胞基本贴壁*,伸展成梭形,胞核清晰,分布较均匀,散在生长,不聚集成团;细胞生长迅速,5-7天即呈融合状态,细胞排列紧密,有的交叉重叠生长,平坦、胞体较大,细胞质透明,细胞核较大,呈椭圆形,颜色淡。细胞融合,并彼此连接成网状;细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。子宫成纤维细胞的主要特征:①是子宫的重要细胞组成,在体外易于培养;②在子宫损伤后能修复和重塑子宫;③在子宫炎症时能有效控制炎症扩散。
本公司生产的采用胰蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来,细胞总量约为5×10^5cells/瓶;细胞经Vimentin免疫荧光鉴定,纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5.培养基信息:
DMEM[H]、FBS、成纤维细胞生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等
我们推荐使用*培养基(产品货号:CM-M054)作为体外培养的培养基。
三、使用方法
在技术部标准操作流程下,小鼠肺微血管内皮细胞可传3-5代;建议您收到
细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1. 取出T25细胞培养瓶,用75%酒精消毒瓶身,拆下封口膜,放入37℃、5%CO2、饱
和湿度的细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态。
2. 待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养。
3. 细胞传代
1) 吸出T25细胞培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液1mL至培养瓶中,轻微转动培养瓶至消化液覆盖整个培
养瓶底后,吸出多余胰蛋白酶消化液,37℃温浴1-3min;倒置显微镜下观察,待
细胞回缩变圆后,再加入5ml*培养基终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2-1:3适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的*
培养基至5mL,置于37℃、5%CO2、饱和湿度的细胞培养箱中静置培养;
4) 待细胞*贴壁后,培养观察;之后每隔2-3天更换新鲜的*培养基。
四、注意事项
1. 培养基于4℃条件下可保存3-6个月。
2. 在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作。
3. 传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态。
4. 建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和
技术部沟通;由于运输的原因,个别敏感细胞会出现不稳定的情况,请及时
和我们,详尽告知细胞的具体情况,以便我们的技术人员跟踪、回访直至问
题得到解决。
5. 只可用于科研。
备注:由于实验所用试剂、操作环境及操作手法的不同,以上方法仅供各实验室参考
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