詳細(xì)介紹
羊傳染性胸膜肺炎PCR檢測試劑盒(Movi)(Contagious caprine pleuropneumonia,CCPP)
俗稱“爛肺病”,是山羊*的急性或慢性高度接觸性傳染病,以呈現(xiàn)纖維素性
肺炎和胸外膜炎為特征。該病病原較為復(fù)雜,由多種支原體組成,主要有病綿羊
肺炎支原體(Movi)、絲狀支原體山羊亞種(Mmc)、山羊支原體山羊肺炎亞種
(Mccp)等,這些病原體在一個羊群中可單一感染,也可混合感染。
因此有必要建立一種準(zhǔn)確、快速、靈敏的檢測方法對其進行監(jiān)控。本產(chǎn)品針
對 Movi 支原體提供了一對特異性檢測引物,基于 PCR 方法對 CCPP 進行快速
檢測。
羊傳染性胸膜肺炎PCR檢測試劑盒(Movi)具有下列特點:
1. 即開即用,用戶只需要提供樣品 DNA 模板,操作簡單。
2. 本產(chǎn)品只適用于科研,不能用于臨床診斷。
規(guī)格及成分 成分 編號 50 次熱封袋包裝
即用型 PCR Mix 3.0 90805 1.5 mL
Movi 專一性引物對 yw13501351 100 μL
Movi 陽性對照 yw13521353 50 μL
超純水 100935 1 mL
使用手冊 1 份
運輸及保存 低溫運輸,-20℃保存,保存期限一年。
自備試劑 樣品等
使用方法 一、樣品 DNA 的制備
用自選方法純化待測樣品的 DNA。
二、陽性對照
1. 為增加產(chǎn)品穩(wěn)定性和避免擴散傳染性病原,本產(chǎn)品不提供活體菌做陽性對
照,只提供沒有傳染性的、可以直接使用的 DNA 片段作為陽性對照。
2. 使用本陽性對照時,由于其濃度較高,一定要注意不要污染其他試劑和成分。
zui在專門的區(qū)域操作。
三、設(shè)置 PCR 反應(yīng)(25 uL 體系)
3. 在 PCR 管中加入下列成分:
成 份 樣品 陽性對照 陰性對照
Movi 專一性引物對 2 uL 2 uL 2 uL
待測樣品 DNA 1-5 uL 無 無
Movi 陽性對照 無 2 uL 無
補超純水到 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
即用型 PCR Mix 3.0 12.5 uL 12.5 uL 12.5 uL
4. 輕柔混勻后上機,按下面參數(shù)進行 PCR。
過程 溫度 時間
預(yù)變性 94℃ 5 min
PCR 反應(yīng)
(35 個循環(huán))
94℃ 30 s
55℃ 30 s
72℃ 30 s
延伸 72℃ 10 min
5. 電泳檢測 PCR 產(chǎn)物。預(yù)期的 PCR 產(chǎn)物長度為 361 bp。
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