质谱兼容型蛋白银染试剂盒布鲁氏菌病（brucellosis）又称地中海弛张热，马耳他热，波浪热或波状热，是由布鲁氏菌(Brucellae)引起的人畜共患性全身传染病。布鲁氏菌为革
兰氏阴性短小杆菌，初次分离时多呈球状，球杆状和卵圆形，故名。根据宿主
的不同，布鲁氏菌分为 10 个种。目前已知有 60 多种家畜、家禽，野生动物
是布鲁氏菌的宿主。与人类有关的传染源主要是牛布鲁氏菌（Brucella
abortus）、羊布鲁氏菌（Brucella melitensis）及猪布鲁氏菌（Brucella
suis）。临床上以羊、牛、猪三种意义zui大，羊种致病力zui强。因此基于 PCR
的快速检测羊、牛、猪种布鲁氏菌病具有重要的应用价值。

质谱兼容型蛋白银染试剂盒就是专门用
于检测羊、牛、猪种布鲁氏菌病的 PCR 试剂盒，它具有下列特点：
1. BA、BM 和 BS 分别用于定性检测牛、羊、猪布鲁氏菌病，灵敏度远高于
ELISA 检测法。
2. 专一性强，能分别检测到各菌的几乎所有亚型。
3. 引物根据全基因序列设计，特异性高。
4. 使用即用型 PCR 试剂盒，减少了操作步骤，降低了操作误差。
规格及成分 成 份 编 号 50 次塑料袋包装
即用型 PCR Mix 3.0 90805 1.5 mL
BA 专一性引物对（10 uM） Yw841、842 50 uL（仅 BA 有）
BA PCR 阳性对照 11-BA 50 uL（仅 BA 有）
BM 专一性引物对（10 uM） Yw843、844 50 uL（仅 BM 有）
BM PCR 阳性对照 11-BM 50 uL（仅 BM 有）
BS 专一性引物对（10 uM） Yw845、846 50 uL（仅 BS 有）
BS PCR 阳性对照 11-BS 50 uL（仅 BS 有）
超纯水 100935 1 mL
使用手册 1 份
运输及保存 低温运输、-20℃保存，有效期一年。
自备试剂 细菌 DNA 提取试剂盒
使用方法 一、样品 DNA 的制备
用自选方法纯化待测样品的 DNA，也可以另购本公司的细菌 DNAout 或
柱式细菌 DNAout，上述两款产品跟本试剂盒兼容。
二、阳性对照
1. 为增加产品稳定性和避免扩散传染性病原，本产品不提供活体细菌做阳性
对照，只提供没有传染性的、可以直接使用的 DNA 片段作为阳性对照。
2. 使用本阳性对照时，由于其浓度较高，一定要注意不要污染其他试剂和成
分。zui在专门的区域操作。
三、设置 PCR 反应（60 uL 体系）
3. 在 PCR 管中加入下列成分：
成 份 样品 阳性对照 阴性对照
牛、羊、猪布鲁氏菌专一性引物对
（三种之一） 2 uL 2 uL 2 uL
样品 DNA 1-5 uL 无 无
牛、羊、猪布鲁氏菌阳性对照
（三种之一） 无 2 uL 无
补超纯水到 30 uL 30 uL 30uL
即用型 PCR Mix 3.0 30 uL 30 uL 30 uL
4. 轻柔混匀后上机，按下面参数进行 PCR。
过程 温度 时间
预变性 95℃ 5 min
PCR 反应
（40 个循环）
95℃ 1 min
55℃ 1 min
72℃ 3 min
延伸 72℃ 10 min
5. 电泳检测 PCR 产物。BA 预期的 PCR 产物长度为 783 bp；BM 预期的
PCR 产物长度为 162 bp；BS 预期的 PCR 产物长度为 393 bp。
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