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技術(shù)文章

Annexin V流式檢測細(xì)胞凋亡的數(shù)據(jù)分析方法

閱讀:674          發(fā)布時間:2019-12-19

示例:

細(xì)胞用FITC-Annexin V / PI熒光雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒檢測效果圖。

 

Jurkat細(xì)胞用1μM喜樹堿(Camptothecin) ()或未加藥 ()處理4h,F(xiàn)ITC-Annexin V/PI熒光雙染細(xì)胞凋亡檢測試劑盒染色后,流式細(xì)胞儀熒光檢測。

Annexin V-FITC單陽性細(xì)胞為早期凋亡細(xì)胞,Annexin V-FITCPI染色雙陽性的細(xì)胞為壞死細(xì)胞或者晚期凋亡。PI單染色陽性位裸核細(xì)胞。

實(shí)測數(shù)據(jù)可能會因細(xì)胞類型、細(xì)胞凋亡情況,檢測儀器等的不同而存在差異,圖中數(shù)據(jù)僅供參考。

 

 

流式檢測細(xì)胞凋亡的數(shù)據(jù)分析方法:

1) 選中所有顆粒,將FSC和SSC設(shè)置成對數(shù)坐標(biāo)軸模式備用;

2) 將橫軸和縱軸分別設(shè)成Annexin通道和PI通道(7-AAD與此類似),選取雙陰細(xì)胞群;

3) 在雙陰細(xì)胞門中,將橫軸和縱軸分別設(shè)成FCSSSC,將數(shù)據(jù)呈現(xiàn)方式改為輪廓圖,找到細(xì)胞碎片,劃出碎片門,應(yīng)用于所有細(xì)胞;

4) 在所有細(xì)胞中,反選碎片門,得到所有細(xì)胞;

5) 將橫軸和縱軸分別設(shè)成Annexin通道和PI通道,參照未經(jīng)藥物處理的對照組,劃出十字門,確定不同群細(xì)胞的比例。

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