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技術文章

雅吉教您原代細胞與細胞系有什么區(qū)別

閱讀:1085          發(fā)布時間:2019-12-12

上海雅吉生物科技有限公司專業(yè)經(jīng)驗細胞系和原代細胞,如何區(qū)分原代和細胞系呢,這里就和您分析一下:  

細胞培養(yǎng)物來源于原代外植體或分散的細胞懸液。通常在這樣的培養(yǎng)物中細胞增殖形成匯合地單層細胞或密集地細胞懸液。根據(jù)傳統(tǒng)定義,一次收獲和接種的細胞被稱為原代細胞[Freshney, R.I. (1987). Culture of Animal Cells. A Manual of Basic Technique. (New York, Alan R. Liss, Inc.)]. 這類細胞生命周期有限,在有限的生命周期內(nèi)需掌握好細胞大的生長空間,以保持細胞群中基因型和表型的一致性。
       細胞系是不斷生長,分化的細胞群,因其經(jīng)過遺傳改造,致使其具有無限增長的潛能。體外生長的細胞系用于醫(yī)療或科研。實際上,連續(xù)細胞系可以用大量次培養(yǎng)基培養(yǎng),隨著代數(shù)的增加細胞的基因型和表型都有可能發(fā)生改變。

 

       需要指出的是,在不同的科研小組中這些術語的定義會有所不同。許多研究員不用細胞系這個詞表示細胞群除非細胞經(jīng)過了遺傳改造。

 

二、倍增和代數(shù)有什么區(qū)別?

      倍增是培養(yǎng)物中細胞總數(shù)加倍,通常是指細胞指數(shù)或?qū)?shù)生長期。代數(shù)是指細胞群從培養(yǎng)瓶中移出,傳代培養(yǎng)過程的次數(shù),傳代培養(yǎng)的目的是使細胞處于低密度以刺激其進一步生長。

 

三、接收到的凍存細胞該如何處理?

      收到包裝箱后,立即將凍存細胞從干冰移入液氮中凍存。此過程盡量快以避免升溫。不要將細胞儲存在-80℃,這樣會對細胞造成不可挽回的傷害。

 

四、有多少經(jīng)驗才能開始正常人類細胞培養(yǎng)?

      推薦有經(jīng)驗者在無菌環(huán)境下用層流凈化罩工作,如果有經(jīng)驗的話對其它細胞類型也是很有利的。如果你是細胞培養(yǎng)的初學者或打算建立細胞培養(yǎng)實驗室,我們會為你提供幫助。請聯(lián)系我們的細胞培養(yǎng)專家。

 

五、凍存的細胞該如何開始培養(yǎng)?
(1) 將一管細胞從液氮罐中取出,注意保護手和眼睛。
(2) 用10秒鐘時間將小管的蓋子擰松1/4以去除殘留在螺紋處的液氮,然后將蓋子蓋緊。
(3) 將小管放入37℃水浴中,輕輕握住并旋轉(zhuǎn),直到管內(nèi)物體*融化。
(4) 將小管立即從水浴中拿出,擦干,轉(zhuǎn)入無菌環(huán)境。
(5) 用70%的酒精沖洗小管,然后擦去多余酒精。
(6) 打開蓋子,注意手指不要碰到里面的螺紋。用1ml離心管離心內(nèi)容物。
(7)平衡管內(nèi)物,用多聚賴氨酸包被培養(yǎng)瓶(多數(shù)細胞用T-75的培養(yǎng)瓶)。多數(shù)細胞類型推薦接種密度為每平方厘米5000細胞。
(8) 蓋好蓋子,輕輕搖晃培養(yǎng)瓶以使細胞分布均勻。若需要氣體交換可打開蓋子。
(9) 將培養(yǎng)瓶放放培養(yǎng)箱中(37℃,5%CO2,95%空氣)
(10) 植入培養(yǎng)后第6-16小時更換一次培養(yǎng)基以去除殘留的二甲基亞楓和未貼壁的細胞。

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