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ELISA試劑盒如何做好標(biāo)準(zhǔn)曲線
閱讀：1251 發(fā)布時間：2018-10-24若要給美好人生一個定義，那就是愜意。若要給愜意一個定義，那就是三五知己、談笑風(fēng)生。若要給上海雅吉生物公司一個定義，那就是科研朋友們的買ELISA試劑盒的*。
周老師是蘇州大學(xué)在校研究生，老師在我司買了相應(yīng)的抗體自己包被ELISA試劑盒。也是剛剛接觸ELISA實驗的新手，研究大鼠白介素相關(guān)指標(biāo)的實驗，做完大鼠白介素5ELISA實驗后反應(yīng)標(biāo)準(zhǔn)曲線的梯度都不好。剛加完顯色劑的時候梯度還算明顯，但是顯色比較淺，隨著時間延長（大概6、7分鐘）以后梯度就不明顯了。終止反應(yīng)后測得的值梯度就沒有了。特咨詢我司技術(shù)幫忙分析原因所在。我司技術(shù)分析：
1、剛加完顯色劑時梯度明顯：顯色液可能是從高濃度向低濃度孔加的。
2、酶濃度太高，導(dǎo)致后顯色結(jié)果都是高的
3、包被-酶標(biāo)系統(tǒng)不匹配或者酶標(biāo)的非特異反應(yīng)太強，或者酶標(biāo)儀讀數(shù)范圍不夠，
4、樣本中有能夠催化底物的物質(zhì)，沒洗下來。
5、建議：包被、酶標(biāo)重新做梯度，先用較低的濃度把梯度摸索好，然后再優(yōu)化靈敏度，后調(diào)出所需的靈敏度、線性范圍
6、有條件的話，可以把酶免的蛋白系統(tǒng)移植到板式化學(xué)發(fā)光上，加完底物三分鐘讀數(shù)。
7、蛋白系統(tǒng)靈敏度夠的話，顯色十分鐘就差不多了。
8、酶是自己標(biāo)的這種情況的，HRP比例不要太高。
上海雅吉生物一直秉著以質(zhì)量求生存，以信譽求發(fā)展的精神，精益求精，力求做到更好。全體員工孜孜不倦為國內(nèi)科研事業(yè)單位以及高校等提供的產(chǎn)品服務(wù)！本公司ELISA試劑盒具有質(zhì)量可靠，靈敏度好，更具有免費代測及技術(shù)指導(dǎo)服務(wù)，歡迎科研者來電詳詢！
