酶联免疫吸附试验（ELISA）原理：

该检测基于夹心ELISA技术，其中一种针对组装好的AAV衣壳上的构象表位的单克隆抗体（mab）被包被在板上，并用于捕获样本中的AAV颗粒。

捕获的AAV颗粒的检测是一个两步过程。

生物s偶联的mab与捕获的AAV颗粒结合。

链霉亲和素过氧化物酶结合物与生物s分子反应。加入底物后会产生颜色反应，该反应与特异性结合的病毒颗粒的数量成正比。

AAV定量方法比较：

每种常用的定量方法都有其优缺点：

定量PCR（qPCR）广泛使用，但存在样本制备、引物设计或PCR效率等问题，可能导致实验室间结果的高变异性。

数字滴液PCR方法克服了qPCR的一些限制。然而，由于不同的样本处理协议，实验室间的差异仍然可能发生。

斑点印迹是一种简单且定量的方法，如果使用可靠的参考材料。然而，它受到一般西方印迹法线性和动态范围有限的影响。

鉴于上述技术的实用缺陷，传统的夹心ELISA目前在实验室间和实验室内变异性以及易用性方面似乎更y越。因此，它代表了可靠和可重复定量总rAVV衣壳滴度的最佳格式。

使用重组/突变AAV：

重组/突变AAV载体的识别取决于受重组/突变影响的特定衣壳区域。PROGEN的AAV ELISA中使用的捕获抗体结合特定且在某些情况下定义明确的构象表位。这些表位是由相应AAV血清型的衣壳组装产生的。ELISA可能识别您的重组/突变AAV载体的第一个迹象是抗体结合表位的存在。然而，衣壳蛋白的蛋白质序列的变化也可能影响蛋白质的构象，因此影响AAV衣壳上呈现的表位的构象。这可能影响抗体的结合亲和力，并影响基于AAV ELISA试剂盒提供的（非重组）试剂盒对照的滴度测定。由于这些特性强烈依赖于特定的重组/突变，PROGEN不能保证成功和精确定量您的重组/突变AAV载体。即使重组/突变AAV衣壳上仍然存在抗体结合表位，您的检测也需要针对您的特定AAV载体进行测试和优化。

PROGEN强烈建议生产和校准合适的（重组/突变）试剂盒对照，以确保使用PROGEN ELISA试剂盒可靠地确定您个别重组/突变AAV载体的滴度。

作为PROGEN在中国的区域总代理，艾美捷科技强烈推荐PROGEN销售产品AAV2 滴度检测试剂盒。产品仅用于科研，不可用于临床诊断。

AAV2 滴度检测试剂盒：

数量96次测试

反应性 AAV2

储存 2-8°C

用途 仅供研究使用

应用 ELISA

产品描述 d特的微孔板酶免疫测定，用于定量AAV2的病毒粒子和组装好的空衣壳。捕获抗体检测到的构象表位不存在于未组装的衣壳蛋白上。

试剂盒对照/标准 AAV2的空衣壳制剂

供应形式试剂盒，12 x 8孔条状包装

AAV2 滴度检测试剂盒特点：

AAV2衣壳定量ELISA

完整和空AAV2衣壳的检测

A20抗体用作捕获和检测抗体

文献参考：

Hamann,M.V.et al.Improved targeting of human CD4+Tcells by nanobody-modified AAV2 gene therapy vectors.PLoS One 16,(2021).

Satkunanathan,S.,Thorpe,R.&Zhao,Y.The function ofDNA binding protein nucleophosmin in AAV replication.Virology 510,46-54(2017).

Lock M,McGorray S,et al.Characterization ofa recombinant Adeno-Associated Virus Type 2 referencestandard material;Hum Gene Therapy 21:1273-1285 (2010).

Lochrie,M.A.et al.Mutations on the External Surfaces ofAdeno-AssociatedVirus Type 2 Capsids That AffectTransduction andNeutralization.J.Virol.80,821-834 (2006).

Kells,A.P.et al.AAV-mediated gene delivery of BDNF orGDNF is neuroprotective in a model of Huntington disease. Mol.Ther.9,682-688(2004).

Grimm,D.et al.Titration of AAV-2 particles via a novelcapsidELISA:packaging of genomes can limit productionof recombinant AAV-2.Gene Ther.6,1322-30(1999).

PROGEN公司成立于1983年，总部位于德国海德堡，由海德堡大学教授联合创办，体外诊断试剂的制造商和供应商，也是德国癌症研究中心的合作伙伴。 主要产品线： 经过质检验证的抗体、体外诊断产品、抗体噬菌体展示技术、密度梯度分离液和AAV(腺相关病毒）检测试剂盒等。

作为PROGEN在中国的经销商，艾美捷科技有限公司将为中国客户提供全面的PROGEN以及客户订制化服务?；队蠹宜媸绷滴颐恰?/p>

AAV2 滴度检测试剂盒AAV2 滴度检测试剂盒