您好, 歡迎來(lái)到化工儀器網(wǎng)
會(huì)員.png)
8
教你怎樣選擇優(yōu)質(zhì)的新生牛血清
血清作為細(xì)胞常用的天然培養(yǎng)基被廣泛的應(yīng)用于細(xì)胞培養(yǎng)中，因此血清的好壞直接影響到細(xì)胞的優(yōu)劣，今天就給大家介紹下如果選擇一款適合自己的血清。
今天主要介紹的是牛血清。牛血清可分為培養(yǎng)較難養(yǎng)的細(xì)胞和干細(xì)胞，而新生牛血清通常適用于比較好養(yǎng)的細(xì)胞，特別用于病毒疫苗的工業(yè)生產(chǎn)以及廣泛的科研領(lǐng)域。新冠影響下疫苗生成用到的新生牛血清激增，選對(duì)培養(yǎng)的血清非常重要。
在實(shí)際應(yīng)用中，常需要確定牛血清的濃度。常用濃度為5%~20%，也有用更低濃度的牛血清，這主要依賴于所用的人工合成培養(yǎng)基的類型、組成和營(yíng)養(yǎng)程度。如果合成培養(yǎng)基的營(yíng)養(yǎng)較豐富，那么可適當(dāng)降低牛血清的濃度。它也依賴于所培養(yǎng)的細(xì)胞類型和培養(yǎng)的目的。下面以水牛卵母細(xì)胞為例。
在2008年，廣西大學(xué)等單位曾報(bào)道了不同濃度牛血清和白蛋白對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外成熟的影響。卵母細(xì)胞的體外成熟是胚胎體外生產(chǎn)技術(shù)中的關(guān)鍵環(huán)節(jié)。
研究人員將經(jīng)卵母細(xì)胞清洗2--3遍后，放入預(yù)先平衡過(guò)的不同濃度的牛血清(ECS，F(xiàn)CS，注：ECS為發(fā)情牛血清)及牛血清白蛋白(BSA)的成熟培養(yǎng)液中，其中對(duì)照組采用基礎(chǔ)培養(yǎng)液；并放入39℃、含5%CO及飽和濕度的培養(yǎng)箱內(nèi)培養(yǎng)?；A(chǔ)培養(yǎng)液為T(mén)CM199中加入一定量的激素（LH，F(xiàn)SH，雌二醇）。培養(yǎng)方式為微滴培養(yǎng)法，在60mm培養(yǎng)皿中作12～16個(gè)滴，每滴放30--40枚卵丘一卵母細(xì)胞復(fù)合體，并在培養(yǎng)液滴上面覆蓋石蠟油。
研究人員觀察了在基礎(chǔ)培養(yǎng)液中添加不同牛血清及其濃度分別0(對(duì)照)，10%ECS，20%ECS，10%FCS，20%FCS對(duì)水牛卵母細(xì)胞體外成熟的影響。結(jié)果顯示：10%ECS，20%ECS，10%FCS組的細(xì)胞成熟度顯著高于對(duì)照組，又以10%ECS組為突出。隨著FCS血清濃度的增加，成熟度逐漸提高，但無(wú)顯著差異。作者認(rèn)為，添加血清是必要的，但不需太高的濃度。