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生物毒性測試儀說明書

閱讀:3134        發(fā)布時間:2018-3-27

智能化生物毒性(污染)測試儀特點
DXY-3型智能化生物毒性(污染)測試儀是在DXY-2型 生物毒性(污染)測試儀基礎上改進,并加人智能化功能的新型號機,與上同類產(chǎn)品相當,但是,價格低廉,發(fā)光菌能保證供應。
該儀器是基于毒性物質(zhì)對特殊的發(fā)光細菌的發(fā)光度的抑制作用而設計的,它通過測定發(fā)光細菌發(fā)光度的變化,量度被測環(huán)境樣品中由重金屬和其它有機污染物所造成的急性生物毒性。與傳統(tǒng)的魚、蚤和其它水生生物作為生物檢測方法相比,發(fā)光細菌法簡便、快速、靈敏、適應性強、重復性好、精度高、費用低、用途廣,凡有毒化合物、廢水、廢棄物的生物毒性均可測定。因此,它是對受污染環(huán)境的生物毒性檢測進行初篩、監(jiān)測較為理想的工具,也是其他領域開拓新的實驗測試方法的新工具。
該儀器可測量和顯示待測液的毒性含量,測量所得數(shù)據(jù)可存儲,可一次存儲10組數(shù)據(jù),每組數(shù)據(jù)包含3個標準液測量值和3個待檢溶液的測量值,以便查看;同時,可以上傳到計算機,以便分析和長期保存。儀器顯示界面由液晶顯示屏提供,儀器的控制輸入由按鍵實現(xiàn)。
該儀器2型機為中國環(huán)境監(jiān)測總站監(jiān)制產(chǎn)品。
該儀器測定方法為國家標準,標準號:“GB/T15441-1995水質(zhì) 急性毒性的測定 發(fā)光細菌法”由中國標準出版社出標準文版。儀器標準號:Q寧/KTS 01-93。經(jīng)過近三十年的不斷開發(fā),已經(jīng)在環(huán)境科學、微生物學、免疫學、細菌學、生物化學和臨床檢驗等領域得到廣泛應用。
智能化生物毒性(污染)測試儀儀器用途
測定純化合物(包括有機分子、無機金屬離子)的急性毒性。
測定受污染水體(包括工業(yè)排放污水、礦山采礦和冶煉廢水、河水等水系)的急性毒性。
測定受污染土壤、河流和沿海帶底泥的急性毒性。
用于研究有毒元素以及化合物相互之間的相互作用-協(xié)同或拮抗效應。
用于慢性反應的化學發(fā)光分析等。
智能化生物毒性(污染)測試儀測試原理
測試原理:總體急性生物毒性。
明亮發(fā)光桿菌之所以發(fā)光,是由于菌的發(fā)光系統(tǒng)發(fā)生了如下反應:

    基質(zhì)

     ↓         ATP         ATP       ATP

還原型輔酶A → 黃素(H2) → 細胞色素 → 02

               ↓

        載氫黃素單核苷酸

   熒光酶(電子)↓

               02          RCH0  RCO0H

電子 → FMNH2 → 電子 → FMNH → 光+FMN+電子十H2O

                        ↓

                        OOH

                       黑暗↓

             電子十黃素單核苷酸十H2O2
當細胞活性高,處于積極分裂狀態(tài)時,細胞ATP含量高,發(fā)光強;休眠細胞ATP含量明顯下降,發(fā)光弱;當細胞死亡,ATP立即消失,發(fā)光停止。
處于活性期的發(fā)光菌,當加入毒性物質(zhì)(如重金屬離子Cu2+/Cd2+/Se4+/Zn2+/As3+/Pb2+,農(nóng)藥五氧吩嗪、福美雙,染料對氨基苯甲醚、對硝基鄰甲苯胺,酸、堿等),菌體就會受抑甚至死亡,體內(nèi)ATP含量也會隨之降低甚至消失,發(fā)光度便下降甚至到零。由于毒物濃度與菌體發(fā)光度呈線性負相關地變化,因而可據(jù)發(fā)光度確定毒物急性生物毒性。若此毒物知其成份而不知其濃度,則可根據(jù)先前測得的發(fā)光度——毒物濃度關系曲線(標準曲線),測定濃度。
智能化生物毒性(污染)測試儀技術指標

1、菌種名稱:明亮發(fā)光桿菌T3小種                         急性生物毒性測定靈敏度比較

化合物

濃度(毫克/升)

生物毒性測試儀EC50

96小時LC50

CU2

  3.239

 

Cd2

17.19

 

Zn2

 0.37

 

Pb2

82.23

 

Hg2

  0.126

0.010.9

AS3+

 0.55

 

2、測試范圍:0~1999mV(發(fā)光量)
3、測試精度:樣品3次重復,相對偏差不大于15%
4、靈 敏 度:相當或優(yōu)于魚體96小時培養(yǎng)測定急性
生物毒性試驗法,見表(列舉幾例)
5、顯 著 性:樣品濃度與發(fā)光細菌相對發(fā)光度P<0.05工業(yè)廢水或0.01的水平(純化合物溶液)
6、測試溫度:在室溫20~25℃范圍保持某一恒定值
7、測試時間:10~20min(單個樣品)
8、結(jié)果表示:樣品EC50值(稀釋百分濃度)或相對發(fā)光度(%)及相當?shù)膌v hua gong濃度值(mg/L)
9、供電電源:220V ±l0%
10、尺寸重量:300x240x130mm    5.5kg
該儀器外形、尺寸、重量,若有變化,恕不另行告知。
五、儀器操作
(一) 儀器樣品室:儀器樣品室為單管結(jié)構(gòu),可放入—只直徑為20毫米的測試樣品管(樣品溶液為5毫升)也可以預先放入塑料套管,用直徑為12毫米的測試樣品管(樣品溶液為2毫升)。
(二) 樣品溶液的制備、發(fā)光細菌的復蘇以及測量順序等:見附錄。
(三) 儀器預熱:在開始測試前,先確認暗室處于關閉狀態(tài)(具體為暗室向右轉(zhuǎn)至底)再接通儀器電源(這時面板上應是電源指示燈亮與停止指示燈亮),讓儀器預熱—刻鐘以上。
請注意!在接通電源前,—定要蓋好樣品室的蓋子,避免光電倍增管曝光,而疲勞受損。
(四) 功能按鍵:
儀器控制由按鍵實現(xiàn):[上/左]、[下/右]、[取消/返回]、[測量]、[存儲]、[確定]。
儀器開機后進入主界面,主界面有5個功能選項:[測量]、[校正]、[設置]、[查看]、[上傳]。
通過[上/左]、[下/右]選擇要進入的功能選項,選中的功能反白顯示,按[確定]后進入相應的菜單。
1、測量:
進入[測量]后,設置有兩個選項:
①、使用默認操作員編號進入測量(編號全為1);
②、使用手動輸入,設置操作員編號,有三組操作員,通過[上/左]、[下/右]按鍵設置,按[確定]進入測量界面。
測量界面分三個部分:
①、zui左邊顯示項目號、設置好的操作員編號、時間和日期;
②、上面顯示測量值,右上腳顯示溫度;
③、中間顯示測量結(jié)果,每屏顯示兩組測量結(jié)果;
下面顯示菜單,共四個菜單:[測量]、[上翻]、[下翻]、[返回]主界面。
[測量]  菜單是用于記錄和修改已記錄的穩(wěn)定的測量值的。當菜單處于[測量]時,按[確定]鍵,會將測量值記錄下來,并在屏幕中間顯示出來;按[取消]鍵,會將zui后記錄的一個數(shù)據(jù)清除,重新測量;按[上翻]、[下翻]查看已記錄的數(shù)據(jù)。一個項目包含10組數(shù)據(jù),每屏只能顯示2組數(shù)據(jù)。
測量完畢后如果需要保存數(shù)據(jù)的話,請按[儲存]鍵,屏幕會給出一個界面用于選擇是否保存當前項目所測數(shù)據(jù),保存是請您記住系統(tǒng)自動遞增,生成的項目編號,以便你查閱數(shù)據(jù)。
注意:測量時記錄的數(shù)據(jù)只是緩存,沒有存入ROM當中,如果測量完畢后的數(shù)據(jù)需要存儲的話,請務必按[存儲]鍵將數(shù)據(jù)保存。
2、校正:
進入[校正]后,有三個功能菜單:[零點校正]、[時間校正]、[返回]主界面。
通過[上/左]、[下/右]、[確定]、[取消/返回]按鍵進行具體操作,反白顯示的為當前選中的操作。
3、設置:
進入[設置]后,有五個功能菜單:[背光保持時間]、[聲音設置]、[倍率] 、[自動取樣時間]、[返回]主界面。
[背光保持時間]包括:15S、30S、60S、常亮;
[聲音設置]包括:開和關提示音;
[倍率]包括:*1、*2、*3、*4、*5  以此放大發(fā)光菌的發(fā)光量。
[自動取樣時間]包括:5S、10S、15S、手動;
選擇[自動取樣時間]后,在測量時,到達設定的時間后,會自動記錄測量結(jié)果。
4、查看:
進入[查看]后,會提示輸入項目號(左上腳顯示的項目號),輸入項目號后就會進入界面,可以查看當時測量后保存的數(shù)據(jù),界面跟測量界面相同,顯示此項目測量的時間、日期、溫度、操作員編號、測量的數(shù)據(jù),通過[上/左]、[下/右]按鍵上翻、下翻數(shù)據(jù)。按[返回]鍵退出查看,返回主界面。
5、上傳:
進入[上傳]后,會提示單一上傳或者選擇整片上傳,將ROM里面的數(shù)據(jù)全部上傳。
(五) 樣品測量:
1、向上拔出樣品室的蓋子(注意!拔出前,面板上應是停止指示燈亮),然后將盛有待測樣品溶液的瓶子放入樣品室,蓋好蓋子。
2、抓住蓋子,依逆時針方向旋轉(zhuǎn)(這時面板上停止指示燈熄滅,測量指示燈亮),約1-2秒,則可讀取樣品溶液的測定數(shù)據(jù)。
3、抓住蓋子按順時針方向旋轉(zhuǎn),回到原處(面板上測量指示燈熄滅,停止指示燈亮),這時,才可以向上拔出蓋子,取出已測過的樣品。此后,可作如下處理:
①、還有待測樣品,再取一瓶放入,蓋好蓋子,然后按上述步驟進行測量。
②、因樣品需要進一步處理,不能馬上測量,可以蓋上蓋子等待。
③、整批樣品已測試完畢,蓋好蓋子,將儀器電源切斷。
(六) 有色樣品液的測量:
對有色被測液,若用常規(guī)方法測會有干擾,因此需用下述方法進行校正。具體步驟如下:
1、從儀器樣品室取出黑色塑料管套。
2、取一只2m1管(即12毫米測試樣品管),加3% NaCI溶液2ml,將該管放進一只裝有適量3% NaCl溶液的5ml管(即20毫米的測試樣品管)內(nèi),并使外管與內(nèi)管的3% NaCl溶液面平齊,此作CK管。
3、另取一只2ml管,加3% NaCl溶液2ml,放入另一只裝有適量有色待測樣品液的5ml管內(nèi),要使外管與內(nèi)管的3% NaCl溶液面平齊,此作CKc管。
4、于CK和CKc二管的內(nèi)管中同時加復蘇發(fā)光菌液10μ(注意:必須是本批樣品測定所用同一瓶復蘇菌液),立即記時到秒,等反應滿15分鐘,迅即放入儀器樣品室,測定二只帶有內(nèi)管的5ml管的發(fā)光度。分別記下發(fā)光度L1(CK管)和L2(CKc管)。
5、計算因顏色引起的發(fā)光度校正值△L=Ll-L2。
6、測試帶色樣品管及其CK管(加3% NaCl溶液)的發(fā)光量。
但是,所有CK管測得之發(fā)光度均須減去校正值△L后才能作為CK發(fā)光度。
六、結(jié)果處理
數(shù)據(jù)的處理:見附一中之(五)測試數(shù)據(jù)處理
說明:當在一次系列樣品的測量過程中,“輸出幅度選擇”開關所處的位置有變動,則需換算成某—檔次的值,然后才進行數(shù)據(jù)處理。“Xl”檔與其它檔(“XN”檔)的關系如下:

                XN

          Xl = ---- 或 XN = Xl·N                N

式中:N--------為“輸出幅度選擇”開關所處的位置;

          X1 ,XN --為“輸出幅度選擇”開關處于“Xl”,“XN”檔時,數(shù)字表上的讀數(shù)。

七、分級標準
根據(jù)國外有關資料及國內(nèi)的一些實驗數(shù)據(jù),擬定如下水質(zhì)急性毒性的分級標準,供參考。

水質(zhì)急性毒性的分級標準

毒性等級

相對抑光率%

Hg(毫克/升)

毒性級別

I

< 30

< 0.07

低毒

II

30-50

0.07-0.09

中毒

III

50-70

0.09-0.12

重毒

IV

70-100

0.12-0.16

高毒

V

100

> 0.16

劇毒

注:相對抑光率% = 100% - 相對發(fā)光度%

八、注意事項
(一) 儀器要水平放置于工作臺上,并注意,千萬不要放置在溫度高、濕度大及電磁干擾大的地方。
(二) 當儀器不進行測試時,—定要蓋上樣品室的蓋子,防止灰塵進入及光電倍增管曝光;在測量時,要避免以強光照射光電倍增管,而產(chǎn)生疲勞現(xiàn)象。
(三) 在給各測試管加復蘇菌液后,蓋上瓶塞,用手顛倒5次;但是,在放回原位后,要拔去瓶塞?。?!
(四) 請?zhí)貏e注意:嚴防測試的樣品溶液漏在樣品室內(nèi)。如發(fā)現(xiàn)樣品管外壁已附著樣品液時,一定要先擦干凈后,再放入樣品室,避免樣品室產(chǎn)生銹蝕,致旋轉(zhuǎn)不自如或轉(zhuǎn)不動。若樣品室內(nèi)已沾附著樣品液時,馬上用濾紙吸干,并用稀機油在沾附處擦洗—下。
(五) 發(fā)光細菌的活性及使用菌液量的準確性都將對測量產(chǎn)生很大的影響,因此務必正確的操作。
(六) 當發(fā)現(xiàn)測量結(jié)果異常時,要認真檢查分析,找出原因,并加以解決:
1、操作的環(huán)境溫度、樣品溫度是否控制在200C;
2、菌種的復蘇情況,是否均勻;
3、用于測試的管子是否清洗干凈;
4、用10μl微量注射器吸取復蘇菌液時是否有小氣泡;
5、樣品與菌液的反應時間是否準確到秒;
6、當天使用的菌種復蘇液只能在當天使用。
(七) 請注意:
1、儀器處于“停”狀態(tài),旋轉(zhuǎn)“調(diào)零”,數(shù)字表上能出現(xiàn)正負值均勻變化,調(diào)節(jié)“調(diào)零”使顯示“0”,零點應穩(wěn)定;
轉(zhuǎn)動樣品室的蓋子,讓儀器處于“測”狀態(tài),然后慢慢拔起蓋子,使它與樣品室間有一小縫,讓室內(nèi)光線射入樣品室,數(shù)字表有顯示值,且隨隙縫大小而變化。蓋好蓋子,轉(zhuǎn)回原位,應顯“0”。
2、發(fā)光菌液在儀器中的顯示值符合規(guī)定要求,衰減情況正常。
以上兩項正常,出現(xiàn)測量結(jié)果異常,則屬于操作不嚴格、不規(guī)范,要認真重做一遍。
(八) 如果發(fā)光細菌不好,則更換發(fā)光菌凍干粉。當判定是儀器的故障,請發(fā)送我所檢修,千萬不要自拆。
(九) 儀器自提貨之日起,因元器件的質(zhì)量造成的故障,免費包修一年;該儀器長年保修

 

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