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關(guān)于國產(chǎn)液相色譜柱的再生處理技巧

閱讀:474        發(fā)布時(shí)間:2018/8/24
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   關(guān)于國產(chǎn)液相色譜柱的再生處理技巧
  1.常規(guī)處理
  硅膠、氧化鋁、極性鍵合相色譜柱每一次用完后用低流速長時(shí)間的二氯甲烷或正己烷等溶劑沖洗;鍵合相硅膠色譜柱、離子交換色譜柱和凝膠色譜柱先用蒸餾水沖洗,再用甲醇沖洗,然后用甲醇與蒸餾水以一定比例混合的溶液沖洗后過夜。
  對于已使用一段時(shí)間后柱效下降的色譜柱可按以下方法進(jìn)行再生。再生處理包括活化和凈化兩種。
  硅膠、氧化鋁、極性鍵合相色譜柱按下列順序沖洗:
  3甲基戊烷或己烷-3氯乙烷-乙酸乙脂-丙酮-乙醇-水。
  鍵合相硅膠柱:
  蒸餾水-甲醇。
  離子交換樹脂柱:
  高濃度的NaCl溶液可使大部分樹脂再生,油脂等少數(shù)與樹脂緊密結(jié)合的物質(zhì)可用低濃度堿溶液沖洗,酸性有機(jī)物吸附在固定相的用低pH緩沖液沖洗,堿性有機(jī)物用高pH緩沖液沖洗,然后再用蒸餾水-甲醇-二氯甲烷-甲醇-蒸餾水沖洗。
  凝膠色譜柱:
  由于凝膠色譜柱是根據(jù)被分離物質(zhì)的分子量大小而分離物質(zhì),通常用稀的氫氧化鈉或非離子型去垢劑沖洗可除去大部分的結(jié)合物質(zhì),如果一些污染物仍然不能清除時(shí),用24%或30%乙腈沖洗過夜可除去疏水蛋白,用30%-50%乙酸可除去親水蛋白,用蛋白水解酶處理可分解凝膠中剩余的痕量胃蛋白酶,然后再用蒸餾水-甲醇-蒸餾水沖洗。
  已污染的國產(chǎn)液相色譜柱處理:
  因保留強(qiáng)的物質(zhì)污染,流動(dòng)相或樣品中不溶物沉積于柱頭,可用下列方法洗滌:去除脂類可用四氫呋喃、乙腈或甲醇洗滌;去除蛋白質(zhì)可用乙腈、丙醇和1%3Cl乙酸進(jìn)行梯度洗脫;一些高疏水性化合物可用乙腈或甲醇洗脫,同時(shí)反復(fù)注入100-200ml的四氫呋喃。

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