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CELL-WISE 293 培養(yǎng)基(貨號:CW001)產(chǎn)品特性
產(chǎn)品特性
應用場景:專為HEK293 細胞(如 293-F、293-T、Expi-293F 等)的高密度懸浮培養(yǎng)及瞬時轉(zhuǎn)染開發(fā),支持細胞規(guī)?;瘮U增與高效外源基因表達。
成分優(yōu)勢:
無蛋白、無動物源成分、化學成分wan全限定,排除血清 / 動物源組分帶來的批次差異、病毒污染風險,確保實驗結(jié)果的穩(wěn)定性與可重復性。
即用型配方,無需額外添加血清、生長因子等成分,開瓶后可直接用于細胞培養(yǎng),簡化操作流程。
技術(shù)參數(shù)
檢測項目 | 指標要求 |
外觀 | 澄清透明紅色液體 |
滲透壓 | 275±15 mOSM |
pH 值 | 6.9~7.4 |
無菌性 | 經(jīng)培養(yǎng)法檢測無微生物生長 |
內(nèi)毒素水平 | <5 EU/mL |
儲存條件 | 2~8℃避光保存 |
有效期 | 12 個月(未開封) |
適用范圍
僅供科研用途(如細胞生物學研究、重組蛋白生產(chǎn)、病毒載體制備等),嚴禁用于人類或動物的診斷、治療或臨床應用。
細胞馴化操作指南
一、直接馴化(常規(guī)場景推薦)
對于多數(shù)已適應無血清懸浮培養(yǎng)體系的 HEK293 細胞株,可直接通過常規(guī)傳代稀釋切換至 Balance CD 293 培養(yǎng)基,無需逐步過渡。
二、漸進式馴化(敏感細胞或特殊需求場景)
前提條件:選擇 ** 低代次(≤P10)、處于對數(shù)生長期(活率 > 95%)** 的細胞進行馴化。
操作步驟:
基礎(chǔ)適應階段
在原培養(yǎng)基中復蘇細胞,連續(xù)傳代2~3 次至細胞生長狀態(tài)穩(wěn)定。
當細胞密度達 2×10? cells/mL 時,以 0.5~0.6×10? cells/mL 的密度傳代,使用 75% 原培養(yǎng)基 + 25% Balance CD 293 培養(yǎng)基 的混合體系。
培養(yǎng)條件
環(huán)境參數(shù):37℃,5% CO?,恒溫搖床轉(zhuǎn)速 110~175 rpm(根據(jù)培養(yǎng)體積調(diào)整)。
比例調(diào)整階段
培養(yǎng) 3~4 天后,若細胞密度達 3×10? cells/mL 且活率 > 90%,傳代時將混合比例調(diào)整為 50% 原培養(yǎng)基 + 50% Balance CD 293 培養(yǎng)基,接種密度維持 0.5×10? cells/mL。
若細胞生長緩慢:可離心收集細胞(保留 20% 上清條件培養(yǎng)基),加入 80% 新配的 75% 原培養(yǎng)基 + 25% Balance CD 293 培養(yǎng)基 繼續(xù)培養(yǎng)。
wan全切換階段
重復上述步驟,逐步提高 Balance CD 293 培養(yǎng)基比例(如 25:75→10:90),直至wan全使用 100% 目標培養(yǎng)基。
適應驗證
細胞在 100% Balance CD 293 培養(yǎng)基中傳代3~4 次后,若密度可達 2~3×10? cells/mL 且活率 > 90%,即完成馴化。
后續(xù)傳代起始密度可降至 0.3×10? cells/mL,建議再傳代2~3 次后進行轉(zhuǎn)染實驗。
注意事項:
馴化初期(前 3 代)可能出現(xiàn)細胞密度增長緩慢、活率波動等現(xiàn)象,通常從第 4 代開始恢復穩(wěn)定。
馴化過程中需定期監(jiān)測細胞形態(tài)、密度及活率,避免污染或代謝物積累影響細胞狀態(tài)。
如需進一步補充實驗數(shù)據(jù)或操作細節(jié),請?zhí)峁┚唧w需求。
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