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上海徠同生物科技有限公司

CELL-WISE 293 培養(yǎng)基(貨號:CW001)產(chǎn)品特性

時間:2025-7-8閱讀:44
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CELL-WISE 293 培養(yǎng)基(貨號:CW001)產(chǎn)品特性

 

產(chǎn)品特性

  • 應用場景:專為HEK293 細胞(如 293-F293-T、Expi-293F 等)的高密度懸浮培養(yǎng)及瞬時轉(zhuǎn)染開發(fā),支持細胞規(guī)?;瘮U增與高效外源基因表達。

  • 成分優(yōu)勢

    • 無蛋白、無動物源成分、化學成分wan全限定,排除血清 / 動物源組分帶來的批次差異、病毒污染風險,確保實驗結(jié)果的穩(wěn)定性與可重復性。

    • 即用型配方,無需額外添加血清、生長因子等成分,開瓶后可直接用于細胞培養(yǎng),簡化操作流程。

技術(shù)參數(shù)

檢測項目

指標要求

外觀

澄清透明紅色液體

滲透壓

275±15 mOSM

pH

6.9~7.4

無菌性

經(jīng)培養(yǎng)法檢測無微生物生長

內(nèi)毒素水平

<5 EU/mL

儲存條件

2~8℃避光保存

有效期

12 個月(未開封)

適用范圍

僅供科研用途(如細胞生物學研究、重組蛋白生產(chǎn)、病毒載體制備等),嚴禁用于人類或動物的診斷、治療或臨床應用

細胞馴化操作指南

一、直接馴化(常規(guī)場景推薦)

對于多數(shù)已適應無血清懸浮培養(yǎng)體系的 HEK293 細胞株,可直接通過常規(guī)傳代稀釋切換至 Balance CD 293 培養(yǎng)基,無需逐步過渡。

二、漸進式馴化(敏感細胞或特殊需求場景)

前提條件:選擇 ** 低代次(≤P10)、處于對數(shù)生長期(活率 > 95%** 的細胞進行馴化。

 

操作步驟



  1. 基礎(chǔ)適應階段

    • 在原培養(yǎng)基中復蘇細胞,連續(xù)傳代2~3 至細胞生長狀態(tài)穩(wěn)定。

    • 當細胞密度達 2×10? cells/mL 時,以 0.5~0.6×10? cells/mL 的密度傳代,使用 75% 原培養(yǎng)基 + 25% Balance       CD 293 培養(yǎng)基 的混合體系。

  2. 培養(yǎng)條件

    • 環(huán)境參數(shù):37℃,5% CO?,恒溫搖床轉(zhuǎn)速 110~175 rpm(根據(jù)培養(yǎng)體積調(diào)整)。

  3. 比例調(diào)整階段

    • 培養(yǎng) 3~4 天后,若細胞密度達 3×10? cells/mL 且活率 > 90%,傳代時將混合比例調(diào)整為 50% 原培養(yǎng)基 + 50% Balance       CD 293 培養(yǎng)基,接種密度維持 0.5×10? cells/mL。

    • 若細胞生長緩慢:可離心收集細胞(保留 20% 上清條件培養(yǎng)基),加入 80% 新配的 75% 原培養(yǎng)基 + 25% Balance       CD 293 培養(yǎng)基 繼續(xù)培養(yǎng)。

  4. wan全切換階段

    • 重復上述步驟,逐步提高 Balance CD 293 培養(yǎng)基比例(如 25:75→10:90),直至wan全使用 100% 目標培養(yǎng)基。

  5. 適應驗證

    • 細胞在 100% Balance CD 293 培養(yǎng)基中傳代3~4 次后,若密度可達 2~3×10? cells/mL 且活率 > 90%,即完成馴化。

    • 后續(xù)傳代起始密度可降至 0.3×10? cells/mL,建議再傳代2~3 后進行轉(zhuǎn)染實驗。

 

注意事項



  • 馴化初期(前 3 代)可能出現(xiàn)細胞密度增長緩慢、活率波動等現(xiàn)象,通常從 4 代開始恢復穩(wěn)定。

  • 馴化過程中需定期監(jiān)測細胞形態(tài)、密度及活率,避免污染或代謝物積累影響細胞狀態(tài)。

 

如需進一步補充實驗數(shù)據(jù)或操作細節(jié),請?zhí)峁┚唧w需求。

 


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