您好, 欢迎来到化工仪器网
9
产品简介
I-Blue 中量质粒提取试剂盒（无内毒素）使用预装的阴离子交换树脂柱从50-150 ml培养的细菌中纯化质粒DNA。
详细介绍
I-Blue 中量质粒提取试剂盒（无内毒素）使用预装的阴离子交换树脂柱从50-150 ml培养的细菌中纯化质粒DNA。试剂盒中包含I-Blue裂解缓冲液 Lysis Buffer（可选的颜色指示），以防止常见的操作错误，从而确保有效的细胞裂解和SDS沉淀。在重新悬浮步骤中添加了I-Blue裂解缓冲液，然后添加了PM2缓冲液。加入PM2缓冲液后，在混合过程中，样品将*变成蓝色时，样品将开始变成蓝色。无色区域或棕色团块表明裂解不*，应继续混合直至样品*变蓝。在中和步骤中，添加PM3缓冲液，剧烈摇动试管将开始使样品变回中性色。一旦样品*无色，中和就完成了。现在可以添加PER缓冲液以去除内毒素。现在可以完成纯化质粒DNA的结合，洗涤和洗脱。
由于分离柱的高效率，整个过程无需超速离心机，HPLC或其他有毒试剂，即可在80分钟内完成。纯化的质粒DNA适用于转染，测序反应，酶连接，PCR，体外转录，显微注射，限制性内切酶切和基因枪。
通过从50 ml过夜培养的E.coli(DH5α)中分离质粒DNA，逐批测试了无内毒素质粒提取试剂盒的质量。大肠杆菌（DH5α）培养物，含有pBluescript（A600> 2U / ml）。经过纯化过程，产量超过250 µg，A260 / A280比在1.8-2.0之间。纯化的质粒（1 µg）用于EcoRI消化，并通过电泳进行分析。