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中級(jí)會(huì)員 | 第8年

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Aigtek知識(shí)科普:什么是細(xì)胞微粒分選?

時(shí)間:2022/3/25閱讀:292
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了解細(xì)胞分選儀之前,先來(lái)了解一下,什么是細(xì)胞分選。

細(xì)胞分選是根據(jù)細(xì)胞所具有的特性將某種特定的細(xì)胞亞群從混合的細(xì)胞樣品中分離出來(lái)的一種技術(shù),是細(xì)胞學(xué)研究的重要課題。在需要對(duì)某種特定的細(xì)胞進(jìn)行功能分析時(shí),如對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)上清液通過ELISA分析檢測(cè)細(xì)胞分子、細(xì)胞共培養(yǎng)檢測(cè)細(xì)胞功能等研究都以獲得高純度的目的細(xì)胞為前提。

常見細(xì)胞分選的方法有兩大類:一類是基于免疫識(shí)別特性的方法包括流式細(xì)胞分選和免疫磁性細(xì)胞分選;另一類是基于細(xì)胞物理性質(zhì)的密度梯度離心法,它主要是由于不同細(xì)胞群之間存在沉降系數(shù)差異,在一定的離心力作用下不同種類的細(xì)胞會(huì)以各自不同的速度沉降,在密度梯度不同的區(qū)域會(huì)形成區(qū)帶,從而實(shí)現(xiàn)分選目的,但分離得到細(xì)胞純度低且特異性差導(dǎo)致應(yīng)用較少。

細(xì)胞分選儀的原理就是當(dāng)經(jīng)熒光染色或標(biāo)記的單細(xì)胞懸液放入樣品管中,電信號(hào)經(jīng)由高壓功率放大器產(chǎn)生一個(gè)高壓,將細(xì)胞壓入流動(dòng)室內(nèi)。流動(dòng)室內(nèi)充滿鞘液,在鞘液的包裹和推動(dòng)下,細(xì)胞被排成單列,以一定速度從流動(dòng)室噴口噴出。在流動(dòng)室的噴口上配有一個(gè)超高頻的壓電晶體,充電后振動(dòng),使噴出的液流斷裂為均勻的液滴,待測(cè)細(xì)胞就分散在這些液滴之中。將這些液滴充以正、負(fù)不同的電荷,當(dāng)液滴流經(jīng)過帶有幾千伏的偏轉(zhuǎn)板時(shí),在高壓電場(chǎng)的作用下偏轉(zhuǎn),落入各自的收集容器中,沒有充電的液滴落入中間的廢液容器,從而實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的分離。

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細(xì)胞分選儀能夠分選出你想得到的任何一亞群細(xì)胞,只要你想得到的某一亞群細(xì)胞有合適的單克隆抗體標(biāo)記。隨著多標(biāo)記及胞內(nèi)細(xì)胞因子標(biāo)記流式細(xì)胞技術(shù)的出現(xiàn),使對(duì)細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞因子的研究推向了一個(gè)新的階段,目前,細(xì)胞分選儀在血液研究領(lǐng)域的應(yīng)用,包括DNA倍體分析及細(xì)胞周期分析,淋巴細(xì)胞亞群測(cè)定,白血病免疫分型,淋巴瘤免疫分型,紅細(xì)胞疾病診斷,血小板功能分析和血小板病診斷,微小殘留白血病檢測(cè),白細(xì)胞吞噬功能測(cè)定,NKLAK細(xì)胞活性測(cè)定,造血干/祖細(xì)胞測(cè)定等領(lǐng)域都有很大應(yīng)用前景。

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