高效液相色譜儀的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)
高效液相色譜儀(HPLC)是一種基于液態(tài)流動(dòng)相分離和分析樣品的精密儀器,其結(jié)構(gòu)設(shè)計(jì)緊密圍繞 “高效分離" 和 “精準(zhǔn)檢測(cè)" 需求,具有以下顯著的結(jié)構(gòu)特點(diǎn):
HPLC 采用模塊化組合結(jié)構(gòu),各部件可獨(dú)立控制與維護(hù),同時(shí)通過(guò)軟件系統(tǒng)協(xié)同工作,靈活性高,便于根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求擴(kuò)展功能。主要模塊包括:
輸液系統(tǒng)(泵):
進(jìn)樣系統(tǒng):
手動(dòng) / 自動(dòng)進(jìn)樣器:手動(dòng)進(jìn)樣器(如 7725i 型)通過(guò)定量環(huán)(10~200 μL)精準(zhǔn)進(jìn)樣;自動(dòng)進(jìn)樣器可實(shí)現(xiàn)高通量樣品的自動(dòng)加載,避免手動(dòng)操作誤差。
結(jié)構(gòu)特點(diǎn):進(jìn)樣針采用耐高壓不銹鋼或陶瓷材質(zhì),進(jìn)樣閥(如六通閥)密封性強(qiáng),可在高壓下穩(wěn)定工作。
分離系統(tǒng)(色譜柱):
檢測(cè)系統(tǒng):
數(shù)據(jù)處理系統(tǒng):
高壓輸送能力:
由于固定相粒徑?。ㄈ?UHPLC 柱填料粒徑 < 2 μm),流動(dòng)相通過(guò)時(shí)阻力大,需高壓泵提供穩(wěn)定壓力(常規(guī) HPLC 壓力≤400 bar,UHPLC 可達(dá) 1000 bar),確保流動(dòng)相以恒定流速通過(guò)色譜柱,實(shí)現(xiàn)快速高效分離。
高精度流量控制:
泵的流量精度誤差≤±0.1%,梯度洗脫時(shí)各流動(dòng)相比例調(diào)節(jié)精度達(dá) ±0.5%,避免因流量波動(dòng)導(dǎo)致保留時(shí)間漂移和分離度下降。
管路與接口優(yōu)化:
儀器內(nèi)部管路采用細(xì)內(nèi)徑(如 0.1~0.5 mm)不銹鋼或 PEEK 管,連接接口短且密封性好,減少管路死體積(總死體積 < 100 μL),避免樣品在流動(dòng)相中擴(kuò)散,保持色譜峰形尖銳。
檢測(cè)器流通池設(shè)計(jì):
流通池體積?。ㄈ?UV 檢測(cè)器流通池體積 1~5 μL),且連接管路短,降低樣品通過(guò)檢測(cè)器時(shí)的擴(kuò)散效應(yīng),提升分離效率和檢測(cè)靈敏度。
柱溫箱:
內(nèi)置高精度溫控裝置(控溫范圍 20~80℃,精度 ±0.1℃),通過(guò)加熱或冷卻維持色譜柱溫度穩(wěn)定。溫度波動(dòng)會(huì)影響固定相和流動(dòng)相的理化性質(zhì)(如保留時(shí)間、柱效),溫控系統(tǒng)可顯著提升實(shí)驗(yàn)重復(fù)性。
其他溫控部件:
部分儀器對(duì)進(jìn)樣器或流動(dòng)相瓶進(jìn)行溫控(如低溫保存生物樣品),防止樣品降解或性質(zhì)變化。
材料選擇:
與流動(dòng)相接觸的部件(如泵頭、管路、進(jìn)樣針)多采用不銹鋼、PEEK、陶瓷或藍(lán)寶石等耐腐蝕性材料,可兼容水相、有機(jī)相、緩沖鹽溶液及強(qiáng)酸強(qiáng)堿流動(dòng)相(如 0.1 mol/L 磷酸溶液、乙腈等)。
流動(dòng)相管理:
配備在線脫氣機(jī)(如四通道真空脫氣機(jī)),通過(guò)膜過(guò)濾去除流動(dòng)相中的溶解氣體(如 O?、CO?),防止氣泡影響泵壓和檢測(cè)器基線穩(wěn)定性。
全自動(dòng)化流程:
自動(dòng)進(jìn)樣器可存儲(chǔ)數(shù)十至數(shù)百個(gè)樣品,按序列自動(dòng)進(jìn)樣;梯度洗脫、柱溫控制、檢測(cè)器參數(shù)切換等均由軟件自動(dòng)執(zhí)行,減少人工干預(yù),適合高通量分析。
智能監(jiān)控與故障診斷:
儀器內(nèi)置傳感器實(shí)時(shí)監(jiān)測(cè)壓力、流量、溫度等參數(shù),當(dāng)出現(xiàn)異常(如壓力過(guò)高、漏液)時(shí)自動(dòng)報(bào)警并停機(jī),同時(shí)工作站軟件可生成故障日志,便于快速排查問(wèn)題。
與質(zhì)譜(MS)聯(lián)用:
通過(guò)接口裝置(如電噴霧離子源 ESI)將 HPLC 與質(zhì)譜連接,實(shí)現(xiàn)分離 - 檢測(cè)一體化(如 LC-MS),適用于痕量物質(zhì)定性定量分析。
與其他檢測(cè)器聯(lián)用:
可串聯(lián)多個(gè)檢測(cè)器(如 UV+FLD+ELSD),同時(shí)獲取樣品的多維度信息,滿足復(fù)雜樣品的分析需求。
高效液相色譜儀的結(jié)構(gòu)特點(diǎn)可概括為 “模塊化協(xié)同、高壓高精度、低死體積、溫控精準(zhǔn)、耐腐兼容、自動(dòng)化智能",這些設(shè)計(jì)共同保障了其在藥物分析、環(huán)境監(jiān)測(cè)、食品檢測(cè)等領(lǐng)域的高效分離與精準(zhǔn)檢測(cè)能力。隨著技術(shù)發(fā)展,UHPLC(超高效液相色譜)進(jìn)一步通過(guò)減小填料粒徑、優(yōu)化流路設(shè)計(jì),將分離效率和速度提升至新高度
液相色譜儀的三種常見故障情況




