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六、檢測步驟1、取出所需要使用的微孔板板孔（室溫放置5-10分鐘），注意不要破壞剩余微孔板的板膜，并將剩余板孔放入密封袋中4-8℃避光保存，防止板孔變干。2、將50ml待測樣品加入檢測孔中，并同時設(shè)立陰性對照（不含抗生素的牛奶）和陽性對照（含較高濃度抗生素的牛奶，如含10mg/L青霉素G的牛奶）。3、用蓋板膜蓋好板孔，置于65℃培養(yǎng)箱或水浴鍋中培養(yǎng)，反應(yīng)時間參考試劑盒標(biāo)簽提示。4、反應(yīng)結(jié)束后，將檢測板倒扣靜置，待板條冷卻回室溫后，從檢測孔側(cè)面觀測顏色變化，并進(jìn)行結(jié)果判讀

。七、結(jié)果判定將反應(yīng)完畢的檢測板冷卻回室溫后，從檢測孔側(cè)面目視觀察檢測孔的顏色變化。（1）若測試孔的顏色為紫色，則表明測試樣品為陽性；（2）若測試孔的顏色為黃色，則表明測試樣品為陰性；（3）若測試孔的顏色介于紫色和黃色之間或變色不*，則表明樣品抗生素含量處于檢測限范圍內(nèi)，樣本可疑。 

注：陰性對照變?yōu)辄S色，陽性對照仍為紫色，表明實驗成立，對于可疑樣品建議做重復(fù)試驗。若陰性對照未*變黃可適當(dāng)延長反應(yīng)時間。

八、檢測注意事項：取出所需檢測板孔后，請將未用板孔重新放進(jìn)自封袋密封。因部分抗生素對反應(yīng)時間比較敏感（如：磺胺類、四環(huán)素類），若需要進(jìn)行精確檢測靈敏度檢測時，建議用陰性對照控制確切的反應(yīng)時間，具體操作方法為：當(dāng)檢測時間到2h15min后開始對陰性對照孔進(jìn)行顏色觀察，建議每10min觀察一次，直至陰性對照檢測孔變?yōu)辄S色為止開始對其它檢測反應(yīng)孔進(jìn)行結(jié)果判讀。（此法對磺胺類、四環(huán)素類檢測靈敏度要求高的樣品尤為適用）建議每次檢測時做陰性對照和陽性對照。陰性對照為一個不含抗生素的牛奶樣品；陽性樣品為一個含有高濃度抗生素的牛奶樣品（如含10mg/L青霉素G的牛奶樣品）。實驗中必須使用一次性吸頭，在吸取不同試劑或樣品時需要更換吸頭。本試劑盒對生物素和其他抑菌類的一些物質(zhì)十分敏感，如清潔劑、消毒劑或防腐劑等。實驗過程中需避免此類物質(zhì)的污染。樣品中少量的天然抑菌素不會影響到試劑盒的檢測結(jié)果，但初乳、產(chǎn)奶末期和乳腺炎中含有較高濃度的抑菌素，會影響到檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。該試劑盒*反應(yīng)溫度為65℃，溫度過高或過低以及溫度波動過大都會影響反應(yīng)時間以及檢測結(jié)果的準(zhǔn)確度。建議利用精確方法進(jìn)行檢測反應(yīng)，具體操作步驟見注意事項2。當(dāng)未使用板孔培養(yǎng)基顏色出現(xiàn)異常，請勿繼續(xù)使用。