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液氮研磨的應用原理及注意事項

閱讀:10167      發(fā)布時間:2021-11-12
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  原理
  分子生物學是當前生命科學領域的前沿學科,其理論與技術已滲透到各學科領域,而分子生物學實驗在生命科學研究中顯得相當重要。在實際工作中,許多實驗材料比如動物身上的肌肉組織、結締組織、骨組織、毛發(fā)組織等,植物的根、莖、葉、種子等均需磨碎,隨后才能對其成分、基因與蛋白質(zhì)及結構和功能進行研究。
  液氮研磨在分子生物學實驗中應用廣泛,特別是有關核糖核酸(RNA)、脫氧核糖核酸(DNA)的分離。液氮的溫度為一196℃,它既能使各種組織成分不易被破壞或降解,又能使組織變硬,脆性增加易于磨碎。正是由于液氮的溫度極低,操作時要特別小心。液氮研磨,一是為了終止細胞內(nèi)外一切生物反應,比如提取RNA時,防止RNA酶的降解反應等;還有一個原因,就是在液氮中的細胞*凍硬了,研磨可以達到很好的破胞效果,將細胞磨成粉,使里邊的物質(zhì)釋放出來。
  液氮研磨注意事項:
  1、把樣品放入研缽中,倒入少量液氮,液氮就會像沸騰了一樣,這時候迅速研磨。動作一定不要太大,最好是用手心的力量往下旋轉著碾碎,動作太大會把樣品濺飛,如果樣品量很少直接就可能磨沒了。大約幾秒沸騰就結束,再磨幾下就可以再加入點液氮,重復以上過程,直到認為磨得比較細了為止。
  2、液態(tài)氮在常壓時的溫度相當?shù)牡?,一旦與物體表面接觸將迅速地沸騰,同時也會帶走相當大量的熱能。因此,使用液態(tài)氮時須額外注意,避免與皮膚的直接接觸。
  3、裝填時應穿戴護具,如:防凍手套。切忌使用棉質(zhì)手套,棉質(zhì)手套會借由毛細現(xiàn)象吸著大量的液態(tài)氮而提高凍傷的可能性(甚至比不穿戴還要危險)。
 

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