人真皮微血管内皮原代细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传2-3代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

人真皮微血管内皮细胞分离自真皮组织；真皮，位于表皮深层，向下与皮下组织相连，真皮结缔组织的胶原纤维和弹性纤维互相交织在一起，埋于基质内。其内分布着各种结缔组织细胞和大量的胶原纤维弹性纤维，使皮肤既有弹性，又有韧性。其由两层组成——乳头层与网状层。真皮的结构组成是胶原蛋白、弹性纤维以及基质。微血管内皮细胞（MEC）在炎症反应、肿瘤生长、创面愈合过程中起着非常重要的作用。在创面愈合研究领域，由于表皮细胞、真皮成纤维细胞体外培养技术的成熟，人们对这两种细胞早已进行了大量深入的研究。与之相比，对参与创面愈合过程的另一种主要细胞——真皮微血管内皮细胞，则因其体外分离培养技术的困难而使相关的研究受限。

方法简介：

公司实验室分离的人真皮微血管内皮细胞采用胶原酶-蛋白酶混合消化法结合密度梯度离心法、后通过内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人真皮微血管内皮细胞经CD31免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　?、?消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

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　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

COC1 人卵巢癌细胞  SCaBER(人膀胱鳞癌细胞)     RNASET2 Others Human 人 RNASET2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液   SHH Others Human 人 SHH / Sonic hedgehog (aa 1-197) 人细胞裂解液 小鼠原代肾近端小管上皮细胞 大鼠原代嗅球神经元细胞

胎盘碱性0酸酶(ALPP)重组蛋白 Recombinant Alkaline Phosphatase, Placental (ALPP)

HIST1H3A Protein Human 重组人 Histone H3.1 / HIST1H3A / H3FA 蛋白

KLK13重组人 KLK13 / Kallikrein-13 蛋白 Protein

HA Protein H11N2 重组甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白

SEMA3A重组人 Semaphorin 3A / SEMA3A 蛋白 (Fc 标签) Protein

大鼠组织金属蛋白酶抑制因子4(TIMP4)试剂盒 ，英文名： TIMP4 ELISA Kit

Mouse ai thyroid stimulating hormone receptor aibody (Ab) ELISA Kit 小鼠抗促甲状腺素受体抗体(Ab)试剂盒

MousehepatitisBviruscoreaibody,HBcAbELISAKit 小鼠乙型肝核心抗体(HBcAb)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforHumanMaixGlaProtein,MGPELISAKit人基质γ羧基谷蛋白

透射电镜(TEM)制片处理包埋液A液：10毫升B液：30毫升

ELISAKitGzms-B大鼠颗粒酶B

兔素(Renin)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子胰岛素样生长因子2(IGF-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子胰岛素样生长因子1(IGF-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

兔子胰岛素(INS)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人真皮微血管内皮原代细胞小鼠透明质酸(HA)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human heparan sulfate (HS) ELISA Kit 人类肝素(HS)试剂盒

Humanformylmethionine,fMetELISAKit 人甲酰甲硫(fMet)试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickensolubleE-selectin,sE-selectin试剂盒鸡可溶性E选择素(sE-selectin)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞PDGF-B蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

Mouseferritin,FEELISAKit小鼠铁蛋白(FE)试剂盒规格：96T/48T

HA重组甲型流感 H7N9 (A/Shanghai/1/2013) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

phospho-eIF4E(pSer209 0.5mgphospho-eIF4E(pSer209)(phospho-Eukaryotic translation initiation factor 4E) 0酸化eIF-4E(Ser209)抗原

PVRL1重组人 CD111 / Nectin-1 / PVRL1 蛋白 Protein

HEXB Protein Human 重组人 Hexosaminidase B / HEXB 蛋白

CTSA Protein Human 重组人 Cathepsin A / CTSA 蛋白