人胎盤羊膜原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 梭形、多角形

傳代特性 可傳3代左右

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

人胎盤羊膜細胞分離自胎盤組織；胎盤（placenta）是哺乳動物妊娠期間由胚胎的胚膜和母體子宮內(nèi)膜聯(lián)合長成的母子間交換物質(zhì)的過渡性器官，由羊膜、葉狀絨毛膜和底蛻膜構(gòu)成。胎兒在子宮中發(fā)育，依靠胎盤從母體取得營養(yǎng)，而雙方保持相當(dāng)?shù)莫毩⑿?。胎盤還產(chǎn)生多種維持妊娠的激素，是一個重要的內(nèi)分泌器官。有些爬行類和魚類也以胎生方式繁殖后代，胚胎生長出一些輔助結(jié)構(gòu)如卵黃囊、鰓絲等與母體組織緊密結(jié)合，以達到母子間物質(zhì)的交換，這樣的結(jié)構(gòu)稱假胎盤。羊膜是胎盤的內(nèi)層，與眼結(jié)膜組織結(jié)構(gòu)相似，含有眼表上皮細胞，包括結(jié)膜細胞和角膜上皮細胞生長所需要的物質(zhì)，其光滑，無血管、神經(jīng)及淋巴，具有一定的彈性；在電鏡下，其分為五層：上皮層、基底膜、致密層、纖維母細胞層和海綿層，羊膜基底膜和羊膜羊膜基質(zhì)層含有大量不同的膠元，主要為Ⅰ、Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ、Ⅶ型膠原和纖維粘連蛋白、層粘連蛋白等成份。羊膜細胞主要由羊膜上皮細胞和羊膜間充質(zhì)細胞組成，均具有多分化潛能，可轉(zhuǎn)化為神經(jīng)元，且還有合成、釋放生物活性物質(zhì)和神經(jīng)營養(yǎng)因子的功能。

方法簡介：

公司實驗室分離的人胎盤羊膜細胞采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測：

公司實驗室分離的人胎盤羊膜細胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　　④器官培養(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準(zhǔn)備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

CM-H107人軟骨細胞WISH細胞，人羊膜細胞 普通變形桿菌 中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO DUX B11 Carrying pBSCRLc/pTCSgpt clone 35.6  MN-h, 小鼠海馬神經(jīng)元 人肝上皮細胞，THLE-3細胞 EL4(淋巴瘤細胞) 小鼠原代食管平滑肌細胞 兔原代肝竇內(nèi)皮細胞

肌紅蛋白(MYO)天然蛋白 Native Myoglobin (MYO)

IL17F Protein Human 重組人 IL-17F / Interleukin-17F 蛋白

ENPP7重組小鼠 ENPP7 / NPP-7 蛋白 Protein

IL2 Protein Rat 重組大鼠 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

CD27重組人 CD27 / TNFRSF7 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

人幽門螺旋桿菌熱休克蛋白60(HP-HSP60)試劑盒

Major histocompatibility complex class III (MHC III /HLA- III) ELISA Kit 人主要組織相容性復(fù)合體Ⅲ類(MHCⅢ/HLA-Ⅲ)試劑盒

Humanmelanocytestimulatinghormone,MSHELISAKit 人黑色素細胞刺激素(MSH)試劑盒 96T/48T 進口分裝

Humanierferon-inducibleprotein10,IP-10試劑盒人干擾素誘導(dǎo)蛋白10(IP-10/CXCL10)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織精(arginine)含量高效液相色譜法定量試劑盒20次

HumanJo-1Aibody,Jo1/HRSELISAKit人Jo1抗體/抗組氨酰NA合成酶抗體(Jo1/HRS)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人載脂蛋白H(Apo-H)試劑盒   96T/48T

人載脂蛋白E(Apo-E)試劑盒   96T/48T

人載脂蛋白C3(APO-C3)試劑盒   96T/48T

人載脂蛋白C2(Apo-C2)試劑盒   96T/48T

人胎盤羊膜原代細胞豚鼠白介素1受體拮抗劑(IL1Ra)ELISA 試劑盒 96T/48T

Rat angiotensin conveing enzyme (ACE) ELISA Kit 大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶(ACE)試劑盒

Humanglomerularbasememembraneaibogy,GBMELISAKit 人抗腎小球基底膜抗體(GBM)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanCyclophosphamide,CTX試劑盒人環(huán)0酰胺(CTX)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織HCV(HEPATITISVIRUSC)病毒定量PCR擴增試劑盒20次

HumanPoliomyelitisVirus,PV-IgGELISAKit人脊髓灰質(zhì)病毒IgG(PV-IgG)試劑盒規(guī)格：96T/48T

KLK13重組人 KLK13 / Kallikrein-13 蛋白 Protein

胎盤堿性0酸酶(ALPP)重組蛋白 Recombinant Alkaline Phosphatase, Placental (ALPP)

SEMA3A重組人 Semaphorin 3A / SEMA3A 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

HIST1H3A Protein Human 重組人 Histone H3.1 / HIST1H3A / H3FA 蛋白

HA Protein H11N2 重組甲型流感 H11N2 (A/duck/Yangzhou/906/2002) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白