人腎小球內皮原代細胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 PLL（0.1mg/ml），明膠（0.1%）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細胞形態(tài) 內皮細胞樣

傳代特性 可傳2-3代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

人腎小球內皮細胞分離自腎組織；腎臟是機體的重要器官，它的基本功能是生成尿液，借以清除體內代謝產物及某些廢物、毒物，同時經重吸收功能保留水份及其他有用物質，如葡萄糖、蛋白質、氨基酸、鈉離子、鉀離子、等，以調節(jié)水、電解質平衡及維護酸堿平衡。腎臟同時還有內分泌功能，生成腎素、促紅細胞生成素、活性維生素D3、前列腺素、激肽等，又為機體部分內分泌激素的降解場所和腎外激素的靶器官。腎臟的這些功能，保證了機體內環(huán)境的穩(wěn)定，使新陳代謝得以正常進行。腎小球是腎元中的用于將血液過濾生成原尿的一團毛細血叢，被鮑氏囊所包裹，是尿液形成的重要構造。血液經由入球小動脈進入腎小球。腎小球內的微血管不像其他微血管，匯流入靜脈，而是流入出球小動脈。在腎小球內，微血管受到高壓，而加速了超濾作用（hyperfiltration）的進行。微血管中的血液經由超濾作用之后，形成濾液，滲入鮑氏囊內。腎小球與鮑氏囊合稱為腎小體，腎小球的過濾速率便稱為腎小球過濾率。腎小球內皮細胞是一類特殊微血管類型的細胞。細胞為圓形、多角形，單層貼壁生長；細胞質豐富，細胞核為圓形或卵圓形。腎小球內皮細胞被覆于腎小球毛細血管壁腔側，與血流直接接觸，是腎小球濾過膜的第一道屏障，可粘附細菌和白細胞，修復基底膜，并有抗凝、抗血栓的作用；所以，體外培養(yǎng)的腎小球內皮細胞在免疫學和病理生理學領域中具有重要的研究價值。

方法簡介：

公司實驗室分離的人腎小球內皮細胞采用先機械研磨過不銹鋼網篩分離得到腎小球、后用膠原酶消化，結合內皮細胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。

質量檢測：

公司實驗室分離的人腎小球內皮細胞經CD31免疫熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　　③ 懸浮細胞培養(yǎng)法

　　對于懸浮生長的細胞，如白血病細胞、淋巴細胞、骨髓細胞、胸水和腹水中的癌細胞和免疫細胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經淋巴細胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對完整性，可用于重點觀察細胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調節(jié)作用。

CL187/CCL187細胞，人大腸癌細胞 人黑色素瘤細胞,M14細胞 人多發(fā)性骨髓瘤細胞;RPMI-8226 [RPMI8826]  LRRTM4 Others Human 人 LRRTM4 人細胞裂解液   293T, SV40轉化的人胚腎上皮細胞系 小鼠原B細胞 小鼠原代室管膜細胞 人原代脂肪血管基質細胞

GSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha 0.5mgGSK-3 Alpha (Glycogen Synthase Kinase-3 alpha) 葡萄糖合成激酶-3α抗原(多肽抗原)

ING5 Protein Human 重組人 ING5 蛋白 (GST 標簽)

IL18R1重組大鼠 IL18R1 蛋白 (Fc 標簽) Protein

EREG Protein Mouse 重組小鼠 Epiregulin / EREG 蛋白 (Fc 標簽)

CAMKV重組人 CAMKV 蛋白 (His & GST 標簽) Protein

人真胰島素(TI)ELISA 試劑盒

Human tumor necrosis factor alpha conveing enzyme (TACE) ELISA Kit 人腫瘤壞死因子α轉化酶(TACE)試劑盒

Humanproliferatingcellnuclearaigenaibody,PCNAELISAKit 人抗增殖細胞核抗原抗體(PCNA)試劑盒 96T/48T 進口分裝

HumanImmunoreactivegrowthhormone,irGH試劑盒人免疫反應性生長激素(irGH)試劑盒規(guī)格：96T/48T

組織基質金屬蛋白酶(MMP-14)活性熒光定量試劑盒20次(10樣本)

HumanleukocyteaigenA，HLA-AELISAKit人類白細胞抗原A(HLA-A)試劑盒規(guī)格：96T/48T

人脂蛋白α(Lp-α)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人Ⅰ型前膠原C末端肽(CⅠCP)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人脫氧酚/脫氧啉(DPD)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人腎小球內皮原代細胞豚鼠白介素12(IL-12/P70)試劑盒 ，英文名： IL-12/P70 ELISA Kit

Human nonmethylated oligonucleotide (NON) ELISA Kit 人非甲基化寡核苷酸(NON)試劑盒

RabbitEpidermalgrowthfactor,EGFELISAKit 兔子表皮生長因子(EGF)試劑盒 96T/48T 進口分裝

CLIAKitforBeta2-GP1IgA/G/M(HumanBeta2-glycoprotein1aibodyIgA/G/M)ELISAKit人β2糖蛋白1抗體IgA/G/M

細菌印度墨負性染色試劑盒50次

RabbitE-SelectinELISAKit兔子E選擇素(E-Selectin/CD62E)試劑盒規(guī)格：96T/48T

HA重組甲型流感 H1N1 (A/New York/1/1918) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 蛋白 Protein

PACAP(1-38 Peptide 0.5mgPACAP(1-38 Peptide) 腺苷酸環(huán)化酶激活肽 1-38(全蛋白)

CD97重組人 CD97 蛋白 (Fc 標簽) Protein

ITGA5 & ITGB6 Protein Human 重組人 ITGA5 & ITGB6 Heterodimer 蛋白

ACVR2B Protein Human 重組人 ACVR2B / ActivinR-IIB 蛋白 (Fc 標簽)

客戶收到細胞后，請按照以下方法進行操作。(該細胞傳代次數有限約 2 代，建議客戶收到細胞后盡快安排后續(xù)實驗)

1、取出細胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時，以穩(wěn)定細胞狀態(tài)。

2、待細胞達到 80%匯合時準備進行傳代培養(yǎng)。

3、細胞傳代：

1)吸出細胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當的比例進行接種傳代，然后補充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。