大鼠胎盘绒毛膜滋养层原代细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞分离自胎盘组织；胎盘（placenta）是哺乳动物妊娠期间由胚胎的胚膜和母体子宫内膜联合长成的母子间交换物质的过渡性器官，由羊膜、叶状绒毛膜和底蜕膜构成。胎儿在子宫中发育，依靠胎盘从母体取得营养，而双方保持相当的独立性。胎盘还产生多种维持妊娠的激素，是一个重要的内分泌器官。有些爬行类和鱼类也以胎生方式繁殖后代，胚胎生长出一些辅助结构如卵黄囊、鳃丝等与母体组织紧密结合，以达到母子间物质的交换，这样的结构称假胎盘。绒毛膜是由滋养层和胚外中胚层的壁层构成。胚泡植入子宫内膜后，在胚泡表面形成许多绒毛样的突起，以细胞滋养层为中轴，外裹合体滋养层，称初级干绒毛。胚外中胚层长入初级干绒毛的中轴，使初级干绒毛变成了次级干绒毛。当绒毛膜的胚外中胚层内形成血管网和结缔组织，并与胚体内的血管相通时，次级干绒毛改称三级干绒毛。三级干绒毛末端的细胞滋养层细胞形成细胞滋养层壳。随着胚胎发育，丛密绒毛膜与基蜕膜共同构成了胎盘，而平滑绒毛膜则和包蜕膜一起逐渐与壁蜕膜融合。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞采用蛋白酶-DNA酶联合消化法结合密度梯度离心法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠胎盘绒毛膜滋养层细胞经Cytokeratin-7免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　?、?消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

　　④器官培养

　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

C127细胞，小鼠细胞 Y1(肾上腺皮质细胞) 人胚肺成纤维细胞;MRC-5  HCT 116(人结肠癌细胞)     HSC-T6, 大鼠肝星状细胞系 人绒癌细胞VP16耐药株TNFa转染，JEG-3/VP16-TNFa细胞 7F2(小鼠杂交瘤细胞)  KG-1 羊原代II型肺泡上皮细胞 小鼠原代视网膜色素上皮细胞

CD4分子(CD4)重组蛋白 Recombinant Cluster Of Differentiation 4 (CD4)

IRAK4 Protein Human 重组人 IRAK4 / IRAK-4 蛋白

CD33重组小鼠 CD33 / Siglec-3 蛋白 Protein

FAS Protein Rat 重组大鼠 FAS / CD95 / APO-1 / TNFRSF6 蛋白

MSLN重组人 MSLN / Mesothelin 蛋白 (aa 296-580, Fc 标签) Protein

小鼠半胱酸蛋白酶抑制剂/胱抑素C(Cys-C)ELISA 试剂盒

Rat aldosterone (ALD) ELISA Kit 大鼠固酮(ALD)试剂盒

Humanexacellularsignal-regulatedkinase,ERKELISAKit 人细胞外信号调节激酶(ERK)试剂盒 进口分装

HumanBrucellaAibodyIgG,BrucellaAbIgG试剂盒人菌抗体IgG(BrucellaAbIgG)试剂盒

植物组织叶绿体DNA萃取试剂盒10/20次

Humansolublevascularendothelialgrowthfactorreceptor-2,VEGFR-2/sFLK-1ELISAKit人可溶性血管内皮生长因子受体2(VEGFR-2/sFLK-1)试剂盒

小鼠细胞外基质金属蛋白酶诱导因子/CD147   英文名称：   mouse Exacellular Maix Metalloproteinase Inducer /CD147   规格：      英文缩写：   EMMPRIN/CD147

小鼠抗可提取核抗原抗体ENA抗体   英文名称：   Mouse Exactable Nuclear Aibody   规格：      英文缩写：   ENA

小鼠β内啡肽   英文名称：   Beta-Endorphin   规格：      英文缩写：   β-EP

小鼠表皮生长因子   英文名称：   epidermal growth factor-like growth factor   规格：      英文缩写：   EGF

大鼠胎盘绒毛膜滋养层原代细胞猪促胃液素受体(GsaR)ELISA 试剂盒

Human alternative macrophage activation associated chemical factor 1 (AmAC-1) ELISA Kit 人巨噬细胞替代激活相关化学因子1(AmAC-1)试剂盒

PorcineD-Dimer,D2DELISAKit 猪D二聚体(D2D)试剂盒 进口分装

CLIAKitforAlpha1-AGPELISAKit大鼠α1酸性糖蛋白

血液0酸二酯酶3(PDE3)活性酶连续循环光谱法定量试剂盒10次

Mouseβmannosidase,βManaseELISAKit小鼠β甘露糖苷酶(βManase)试剂盒

BID重组小鼠 BID 蛋白 (His & GST 标签) Protein

ACTH (Adrenorticotrophin hormons 0.5mgACTH (Adrenorticotrophin hormons)(18-39) 促肾上腺皮质激素(18-39)(抗原)

CABP5重组人 CABP3 / CABP5 蛋白 Protein

IL2 Protein Human 重组人 Interleukin-2 / IL-2 蛋白

IL2RG Protein Rat 重组大鼠 IL2RG / CD132 蛋白