大鼠食管上皮原代細(xì)胞公司正在銷售的產(chǎn)品：大鼠原代食管上皮細(xì)胞 EL4(小鼠淋巴瘤細(xì)胞) THP-1 人急性單核細(xì)胞白血病細(xì)胞 1ml/T75 JeKo-1 人套細(xì)胞淋巴瘤細(xì)胞 HCC827 人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞 小鼠原代氣管平滑肌細(xì)胞

大鼠食管上皮原代細(xì)胞

培養(yǎng)信息：

包被條件 鼠尾膠原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等

換液頻率 每2-3天換液一次

生長特性 貼壁

細(xì)胞形態(tài) 上皮細(xì)胞樣

傳代特性 可傳1-2代

消化液 0.25%

培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%

 

大鼠食管上皮細(xì)胞分離自食管組織；食管是咽和胃之間的消化管，食管在系統(tǒng)發(fā)生上起初很短，隨著頸部的伸長和心肺的下降，而逐漸增長。食管可分為頸段、胸段和腹段。脊椎動(dòng)物食管的頸段位于氣管背后和脊柱前端，胸段位于左、右肺之間的縱膈內(nèi)，胸段通過膈孔與腹腔內(nèi)腹相連，腹段很短與胃相連。在發(fā)育過程中，食管的上皮細(xì)胞增殖，由單層變?yōu)閺?fù)層，食管使管腔變狹窄，甚至一度閉鎖，以后管腔又重新出現(xiàn)。哺乳動(dòng)物的食管結(jié)構(gòu)上由內(nèi)向外分四層：黏膜層、黏膜下層、肌層和外膜。其中，黏膜層，包括上皮、固有層和黏膜肌層。上皮為較厚的未角化的復(fù)層扁平上皮，耐摩擦，有保護(hù)作用。在食管與胃賁門交界處，復(fù)層扁平上皮突然變成單層柱狀上皮。食管被一層線性排列的、無角化、潮濕的復(fù)層扁平上皮細(xì)胞覆蓋，其頂端細(xì)胞膜和細(xì)胞間連接復(fù)合體聯(lián)合在一起產(chǎn)生有效滲透屏障，防止食管內(nèi)容物的滲入。特別的是，層屏障使表層細(xì)胞的基質(zhì)外側(cè)細(xì)胞膜和深層細(xì)胞的全部細(xì)胞膜不暴露于食管腔內(nèi)規(guī)律的大幅波動(dòng)的滲透壓之下。從組織學(xué)上講，食管上皮由兩層組成，基底層和分化層；其中，僅基底層的細(xì)胞可以增殖，然后向食管腔移行。移行過程伴隨有分化的發(fā)生和分化標(biāo)記的依序表達(dá)。食管上皮細(xì)胞的培養(yǎng)是研究食管正常生理機(jī)制和食管癌變機(jī)制的非常好的體外模型。

方法簡介：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠食管上皮細(xì)胞采用蛋白酶-膠原酶聯(lián)合消化法，并通過上皮細(xì)胞專用培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。

質(zhì)量檢測(cè)：

公司實(shí)驗(yàn)室分離的大鼠食管上皮細(xì)胞經(jīng)PCK免疫熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、細(xì)菌、酵母和真菌等。

① 組織塊培養(yǎng)法

　　組織塊培養(yǎng)是常用、簡便易行和成功率較高的原代培養(yǎng)方法。其基本方法是將剪成的小組織團(tuán)塊接種于培養(yǎng)瓶(或皿)中，瓶壁可預(yù)先涂以膠原薄層，以利于組織塊粘著于瓶壁，使周邊細(xì)胞能沿瓶壁向外生長。

　?、?消化培養(yǎng)法

　?、?懸浮細(xì)胞培養(yǎng)法

　　對(duì)于懸浮生長的細(xì)胞，如白血病細(xì)胞、淋巴細(xì)胞、骨髓細(xì)胞、胸水和腹水中的癌細(xì)胞和免疫細(xì)胞無需消化，可采用低速離心分離，直接培養(yǎng)，或經(jīng)淋巴細(xì)胞分層液分離后接種培養(yǎng)。

　?、芷鞴倥囵B(yǎng)

　　器官培養(yǎng)是指從供體取得器官或組織塊后，不進(jìn)行組織分離而直接在體外的特定環(huán)境條件下培養(yǎng)，器官培養(yǎng)可保持器官組織的相對(duì)完整性，可用于重點(diǎn)觀察細(xì)胞間的聯(lián)系、排列情況和相互影響，以及局部環(huán)境的生物調(diào)節(jié)作用。

客戶收到細(xì)胞后，請(qǐng)按照以下方法進(jìn)行操作。(該細(xì)胞傳代次數(shù)有限約 2 代，建議客戶收到細(xì)胞后盡快安排后續(xù)實(shí)驗(yàn))

1、取出細(xì)胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培養(yǎng)箱中靜置 6-8 小時(shí)，以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。

2、待細(xì)胞達(dá)到 80%匯合時(shí)準(zhǔn)備進(jìn)行傳代培養(yǎng)。

3、細(xì)胞傳代：

1)吸出細(xì)胞瓶中的培養(yǎng)基，用 PBS 清洗細(xì)胞一次。

2)加入 0.125%消化液約 1mL 至培養(yǎng)瓶中，37℃消化 3min 左右；顯微鏡下觀察，待細(xì)胞回縮變圓后吸棄消化液，再加入培養(yǎng)液終止消化。

3)用吸管輕輕吹打混勻，按 1:2 或 1:3 等適當(dāng)?shù)谋壤M(jìn)行接種傳代，然后補(bǔ)充新鮮的培養(yǎng)基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

4)待細(xì)胞貼壁后，培養(yǎng)觀察，每隔 2-3 天更換新鮮的培養(yǎng)基。

BRL細(xì)胞，肝細(xì)胞 人前列腺癌細(xì)胞,9L-E細(xì)胞 人上皮細(xì)胞RNAHMEpiC miRNA5 μg  YAC-1(小鼠淋巴瘤細(xì)胞)     RL95-2, 人子宮內(nèi)膜腺癌細(xì)胞系 羊膜細(xì)胞,H.A.細(xì)胞 WERI-Rb-1(人視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤)  EB病毒轉(zhuǎn)化的人B淋巴細(xì)胞;KM0501 羊原代附睪上皮細(xì)胞 兔原代乳腺導(dǎo)管上皮細(xì)胞

FABP(brain 0.5mgFABP(brain) (Fatty acid-binding protein brain) 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗原

CGB7 Protein Human 重組人 CGB7 蛋白

CNTN3重組大鼠 Contactin 3 / CNTN3 蛋白 (Fc 標(biāo)簽) Protein

DDR2 Protein Mouse 重組小鼠 DDR2 Kinase / CD167b 蛋白

VSIG2重組人 VSIG2 / CTXL 蛋白 Protein

小鼠骨膠原交聯(lián)(Cr)ELISA 試劑盒

Rat annexin V (ANX- V) ELISA Kit 大鼠膜聯(lián)蛋白Ⅴ(ANX-Ⅴ)試劑盒

Humansecretieceptor,SRELISAKit 人促胰液素/分泌素受體(SR)試劑盒 進(jìn)口分裝

Humanai-Reticulinaibody,ARA試劑盒人抗網(wǎng)硬蛋白抗體(ARA)試劑盒

植物細(xì)胞原生質(zhì)體電轉(zhuǎn)試劑盒10次

HumaumornecrosisfactorsolublereceptorⅡ,TNFsR-ⅡELISAKit人腫瘤壞死因子可溶性受體Ⅱ(TNFsR-Ⅱ)試劑盒

小鼠性激素結(jié)合球蛋白(mouse SHBG)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠超氧化物歧化酶(mouse SOD)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠(mouse Somatostatin)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

小鼠受體亞型(mouse SS2)   作用：   ELISA   規(guī)格：      進(jìn)口分裝

大鼠食管上皮原代細(xì)胞豚鼠鈣調(diào)素(CAM)試劑盒 ，英文名： CAM ELISA Kit

Human dopamine (DA) ELISA Kit 人多巴胺(DA)試劑盒

Rabbitai-neuophilgranulesaibody,ANGAELISAKit 兔子抗中性粒細(xì)胞顆?？贵w(ANGA)試劑盒 96T/48T 進(jìn)口分裝

CLIAKitforBFELISAKit大鼠B因子

細(xì)菌鐵型亞鹽還原酶活性比色法定量試劑盒20次

rabbitiercellularadhesionmolecule1,ICAM-1/CD54ELISAKit兔子細(xì)胞間粘附分子1(ICAM-1/CD54)試劑盒規(guī)格：96T/48T

CDH17重組大鼠 Cadherin-17 / LI-cadherin / CDH17 蛋白 Protein

GLUT2(Glucose transporter type 2 0.5mgGLUT2(Glucose transporter type 2) 葡萄糖轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白2(抗原)

TPH1重組人 Tryptophan Hydroxylase 1 / TPH1 蛋白 Protein

IL20 Protein Human 重組人 IL20 / Interleukin-20 蛋白

LGALS1 Protein Mouse 重組小鼠 Galectin-1 / LGALS1 蛋白