大鼠脊髓神经元原代细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 神经元细胞样

传代特性 属于终末分化细胞；属于不增殖细胞群

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠脊髓神经元细胞分离自脊髓组织；脊髓是细细的管束状的神经结构，位于脊柱的椎管内且被脊椎保护；是源自脑的中枢神经系统延伸部分。中枢神经系统的细胞依靠复杂的联系来处理传递信息。脊髓的主要功能是传送脑与外周之间的神经信息。人和脊椎动物中枢神经系统的一部分，在椎管里面，上端连接延髓，两旁发出成对的神经，分布到四肢、体壁和内脏。脊髓的内部有一个H形(蝴蝶型)灰质区，主要由神经细胞构成；在灰质区周围为白质区，主要由有髓神经纤维组成；脊髓是许多简单反射的中枢。脊髓两旁发出许多成对的神经(称为脊神经)分布到全身皮肤、肌肉和内脏器官。脊髓是周围神经与脑之间的通路，也是许多简单反射活动的低级中枢。按脊神经的出入可把脊髓也分为相应的31节，31对脊神经就是由不同的脊椎发出的。神经系统最基本的结构和功能单位是神经元，即神经细胞，其大小和外观在中枢神经系统中差异很大。但都具有胞体和树突、轴突。胞体又叫核周体，内含神经丝、微管、内质网、游离核糖体和一个有明显核仁的核。一些大神经元突起的粗面内质网可用Nissl染色显示，在光镜下是灰蓝色斑块状，称为尼氏小体。树突和轴突是神经元的突起，能在神经元之间传递电冲动，突起的大小和形态各不相同，很难用常规的显微镜鉴别。脊髓组织内含有大量胶质细胞，神经元含量少，分离纯化难度大，且脊髓神经元细胞是高度分化的终末细胞，不能分裂增殖，培养要求高。刚接种的脊髓神经元呈圆形，体积小，透亮，无突起。培养2-3d，可见胞体增大，突起增多延长；培养6-7d，细胞体大饱满，突起明显增加延长并交织成网，光晕明显，立体感强。培养20d后，死亡细胞明显增加，细胞出现内空泡，突起粗细不均，甚至脱壁，发生细胞崩解。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠脊髓神经元细胞采用胶原酶&联合消化法、神经元专用培养基培养筛选结合化学试剂抑制法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠脊髓神经元细胞经β-Tubulin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　　② 消化培养法

　?、?悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

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　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

ACVR1C Others Cynomolgus 食蟹猴 ALK-7 / ALK7 / ACVR1C 人细胞裂解液   人颅骨造骨细胞 (HCO) NRK-52E，大鼠肾细胞 Rattus  MCF-7(MCF7)(ATCC来源), 人癌细胞  中国仓鼠卵巢细胞(亚系克隆);DUKXB11 猪原代骨髓间充质干细胞 大鼠原代肺大动脉外膜成纤维细胞

C-fos(i mmediate early gene, ieg 0.5mgC-fos(i mmediate early gene, ieg) 即刻早期基因(是一种原癌基因)抗原

IL36B Protein Human 重组人 IL36B / IL1F8 蛋白

IL18R1重组小鼠 IL-18R1 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

FSTL3 Protein Mouse 重组小鼠 FLRG / Fstl3 蛋白

CSF2重组人 GM-CSF / CSF2 蛋白 Protein

小鼠去甲(NE)试剂盒

Human urokinase type plasminogen activator receptor (PLAUR/uPAR) ELISA Kit 人型纤溶酶原激活物受体(PLAUR/uPAR)试剂盒

Humanmammaliaargetofrapamyein,mTORELISAKit 人雷帕霉素靶蛋白(mTOR)试剂盒 96T/48T 进口分装

GuineaPigmonocytechemotacticprotein4,MCP-4试剂盒豚鼠单核细胞趋化蛋白4(MCP-4/CCL13)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母细胞可溶性总蛋白制备试剂盒20次

MouseBrainderivedneuroophicfacor,BDNFELISAKit小鼠脑源性神经营养因子(BDNF)试剂盒规格：96T/48T

人重肽铁蛋白(FTH)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human FTH (Ferritin, Heavy Polypeptide) ELISA Kit

人Pirin蛋白(PIR)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human PIR (Pirin) ELISA Kit

人多药耐药相关蛋白1(MRP1)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human MRP1 (Multidrug Resistance Associated Protein 1) ELISA Kit

人突触足蛋白(SYNPO)酶联免疫吸附测定试剂盒   Human SYNPO (Synaptopodin) ELISA Kit

大鼠脊髓神经元原代细胞豚鼠免疫球蛋白A(IgA)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human cytotoxic T lymphocyte associated aigen 4 (CTLA-4/CD152) ELISA kit E 人细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4/CD152)试剂盒E

Humanai-cardiolipinaibodyIgA,ACA-IgAELISAKit 人抗心0脂抗体IgA(ACA-IgA)试剂盒 96T/48T 进口分装

HumancaneousTcell-atactingchemokine,CTACK试剂盒人皮肤T细胞虏获趋化因子(CTACK/CCL27)试剂盒规格：96T/48T

组织EPHB4激酶活性定量试剂盒(A/B/C)20次

HumanProgesterone，PROGELISAKit人孕激素/孕同(PROG)试剂盒规格：96T/48T

HA重组甲型流感 H10N3 (A/duck/Hong Kong/786/1979) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白 (His 标签) Protein

SDF-1/CXCL12 基质细胞衍生因子1 0.5mgSDF-1/CXCL12 基质细胞衍生因子1

CA10重组人 Carbonic Anhydrase X / CA10 蛋白 (His 标签) Protein

AMBP Protein Human 重组人 AMBP / Alpha 1 microglobulin 蛋白 (His 标签)

IL1RAPL2 Protein Human 重组人 IL-1R9 / IL1RAPL2 蛋白

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。