大鼠肌源性干原代细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠肌源性干细胞分离自肌肉组织；肌源性干细胞（MDSCs）属于成体多能干细胞，具有多细胞系分化和自我更新能力。通过诱导刺激，MDSCs可以分化为脂肪、骨骼、软骨、平滑肌和神经细胞等多种细胞和组织类型；作为基因治疗和组织工程的供体细胞，已成为治疗心肌梗死、Duchenne氏肌营养不良等疾病的研究热点；近年来，肌源性干细胞在治疗尿失禁等方面的应用逐步得到重视。需注意的是，肌源性干细胞主要存在于骨骼肌组织中，只是成熟组织的很少部分细胞；平时处于静止状态，在细胞应激和组织缺失时才会激活；并且随着年龄的增加，所含细胞数量逐渐减少，而目前临床疾病的治疗主要是针对成体进行。肌源性干细胞的体外扩增对细胞移植和干细胞介导的基因治疗至关重要。对肌源性干细胞的扩增研究发现，EGF、FGF-2和SCF可以通过减数分裂或促使不分裂细胞进入有丝分裂周期，从而刺激细胞增生。更重要的是，细胞因子诱导的体外扩增可以通过自我更新不刺激细胞分化，从而保持干细胞表型。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠肌源性干细胞采用胶原酶-蛋白酶-蛋白酶联合消化法结合密度梯度离心、差速贴壁法，最后通过肌源性干细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠肌源性干细胞经Sca-1免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　?、?消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

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　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

ACO2 Others Human 人 ACO2 / Aconitase 2 杆状病毒-昆虫细胞裂解液   AXR2 Others Mouse 小鼠 AXR2 / CMG2 人细胞裂解液   犬肾细胞;MDCK(NBL-2)  新生儿表皮角化细胞Many   Caco-2， 猪原代颈动脉平滑肌细胞 兔原代颌骨骨髓间充质干细胞

GABA/KLH γ1氨基偶联血蓝蛋白 1mgGABA/KLH γ1氨基偶联血蓝蛋白

IL36G Protein Human 重组人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169)

IL1RN重组大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 标签) Protein

KIT Protein Mouse 重组小鼠 c-kit / CD117 蛋白

CD22重组人 Siglec-2 / CD22 蛋白 Protein

小鼠缺血修饰白蛋白(IMA)ELISA 试剂盒

Human urokinase (UK) ELISA Kit 人(UK)试剂盒

HumanoligomericproteinELISAKit 人寡聚蛋白(oligomeric)试剂盒 96T/48T 进口分装

GuineaPiglipidperoxlde,LPO试剂盒豚鼠过氧化脂质/乳过氧化物酶(LPO)试剂盒规格：96T/48T

真菌/酵母细胞高质化线粒体分离试剂盒10次

MouseBromodeoxyuridine,BrdUELISAKit小鼠溴脱氧核苷尿(BrdU)试剂盒规格：96T/48T

人周期素依赖性激酶7(CDK-7)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人周期素依赖性激酶2(CDK-2)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人周期素依赖性激酶1(CDK-1)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

人0酸化腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)ELISAKit   ELISA.   96T/48T

大鼠肌源性干原代细胞豚鼠催产素(OT)试剂盒 ，英文名： OT ELISA Kit

Human poly serum protein (PHSA) ELISA Kit 人多聚血清蛋白(PHSA)试剂盒

rabbitprocollagenⅢN-terminalpeptide,PⅢELISAKit 兔子Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢ)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBeta-LPH(HumanBeta-lipoopichormone)ELISAKit人β-促脂素

细菌细胞趋化作用(chemotaxis)软琼脂试剂盒10次

rabbitImmunoglobulinA,IgAELISAKit兔子免疫球蛋白A(IgA)试剂盒规格：96T/48T

BMP2重组斑马鱼 BMP-2 / BMP2A 蛋白 Protein

TRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2 0.5mlTRAF2/TNF-R2 (TNF receptor-associated factor 2) 坏死因子受体相关因子2抗原

ACVRL1重组人 ALK-1 / ACVRL1 蛋白 (His 标签) Protein

ACTR3 Protein Human 重组人 ACTR3 蛋白 (His & GST 标签)

TFPI Protein Human 重组人 TFPI 蛋白 (His 标签)