大鼠骨髓来源内皮祖原代细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml），明胶（0.1%）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 内皮细胞样

传代特性 可传1-2代；不建议多次传代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠骨髓来源内皮祖细胞分离自骨髓；骨髓是机体的造血组织，位于身体的许多骨骼内。成年动物的骨髓分两种：红骨髓和黄骨髓。红骨髓能制造红细胞、血小板和各种白细胞。血小板有止血作用，白细胞能杀灭与抑制各种病原体，包括细菌、病毒等；某些淋巴细胞能制造抗体。因此，骨髓不但是造血器官，它还是重要的免疫器官。骨髓是存在于长骨（如肱骨、股骨）的骨髓腔和扁平骨（如髂骨）的稀松骨质间的网眼中，是一种海绵状的组织，能产生血细胞的骨髓略呈红色，称为红骨髓。出生时，红骨髓充满全身骨髓腔，随着年龄增大，脂肪细胞增多，相当部分红骨髓被黄骨髓取代，最后几乎只有扁平骨骨髓腔中有红骨髓。内皮祖细胞是血管内皮细胞的前体细胞，亦称为成血管细胞（Angioblast），是一群具有游走特性，能进一步增殖分化的幼稚内皮细胞，缺乏成熟内皮细胞的特征性表型，不能形成管腔样结构，其功能主要为参与了出生后缺血组织的血管发生和血管损伤后的修复。研究显示，内皮祖细胞在心脑血管疾病、外周血管疾病、肿瘤血管形成及创伤愈合等方面均发挥重要作用，并为缺血性疾病的研究治疗提供了新思路，EPCs生物学特性和治疗作用的研究成为这一领域新的热点。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠骨髓来源内皮祖细胞采用冲洗骨髓、密度梯度离心、差速贴壁法结合内皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠骨髓来源内皮祖细胞经CD34免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　?、?消化培养法

　　③ 悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

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　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

A-498(人肾癌细胞)  小鼠单核巨噬细胞;J774A.1  ERBB4 Others Human 人 ErbB4 / HER4 人细胞裂解液   GPC3 Others Human 人 Glypican-3 / GPC3 人细胞裂解液   P3/NSI/1-Ag4-1 [NS-1] 猪原代前列腺成纤维细胞 人原代子宫瘤细胞

DR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5 0.5mgDR5/TNFRSF10B/CD262 (Death receptor 5) 细胞调亡素/死亡受体5抗原

IL17RC Protein Human 重组人 IL17RC 蛋白 (Fc 标签)

NT5E重组大鼠 CD73 / NT5E 蛋白 Protein

GHR Protein Mouse 重组小鼠 Growth Hormone Receptor / GHR / P 蛋白

PRDX6重组人 Peroxiredoxin 6 / PRDX6 蛋白 Protein

小鼠胎盘生长因子(PLGF)ELISA 试剂盒

Rat activin A (Activin-A) ELISA Kit 大鼠活化素A(Activin-A)试剂盒

Humangeneralanscriptioncomplex,GTCELISAKit 人通用转录复合体(GTC)试剂盒 进口分装

Deererythrocytemembraneprotein,EMP试剂盒红细胞膜蛋白(EMP)试剂盒

载玻片细胞脘蛋白(PRION)蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseEndothelialniicoxidesyhase,eNOSELISAKit小鼠内皮型合成酶(eNOS)试剂盒

小鼠晚期糖基化终末产物(AGEs)试剂盒   96T/48T

小鼠脱氧酚/脱氧啉(DPD)试剂盒   96T/48T

小鼠脱氢表雄酯(DHEA-S)试剂盒   96T/48T

小鼠脱氢表雄S7(DHEA-S7)试剂盒   96T/48T

大鼠骨髓来源内皮祖原代细胞小鼠胃泌素(Gas)试剂盒 96T/48T

Human phosphatidylinositol aibody IgG/IgM (PI Ab-IgG/IgM) ELISA Kit 人0脂酰肌醇抗体IgG/IgM(PI Ab-IgG/IgM)试剂盒

HumanElastaseELISAKit 人弹性蛋白酶(Elastase)试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenIerleukin18,IL-18试剂盒鸡白介素18(IL-18)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞GSK-3ALPHA蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseGlycogenphosphorylaseBB,GP-BBELISAKit小鼠糖原0酸化酶同工酶BB(GP-BB)试剂盒规格：96T/48T

IGFBP4重组食蟹猴 IGFBP4 蛋白 Protein

Melan-A/MART-1 黑色素-A(抗原 0.5mgMelan-A/MART-1 黑色素-A(抗原)

PDE9A重组人 PDE9A 蛋白 (His & GST 标签) Protein

CBFB Protein Human 重组人 CBFB / CBF-beta 蛋白

KLK7 Protein Mouse 重组小鼠 KLK7 / Kallikrein 7 蛋白