大鼠骨骼肌原代细胞

培养信息：

包被条件 PLL（0.1mg/ml）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 成纤维细胞样

传代特性 可传5代左右；3代以内状态最佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠骨骼肌细胞分离自四肢肌肉组织；骨骼肌又称横纹肌，肌肉中的一种，约占全身重量的40%。骨骼肌纤维为长柱形的多核细胞，肌膜的外面有基膜紧密贴附。属于横纹肌，横纹肌还包括心肌与内脏横纹肌，其中骨骼肌主要分布于四肢。每块肌肉都是具有一定形态、结构和功能的器官，有丰富的血管、淋巴分布，在躯体神经支配下收缩或舒张，进行随意运动。肌肉可根据共形状、大小、位置、起止点、纤维方向和作用等命名。依形态命名的如斜方肌、菱形肌、三角肌、梨状肌等。骨骼肌细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方。肌细胞内有许多沿细胞长轴平行排列的细丝状肌原纤维。每一肌原纤维都有相间排列的明带（Ⅰ带）及暗带（A带）。明带染色较浅，而暗带染色较深。暗带中间有一条较明亮的线称H线。H线的中部有一M线。明带中间，有一条较暗的线称为Z线。两个Z线之间的区段，叫做一个肌节。骨骼肌细胞也称横纹肌细胞，细胞呈纤维状，不分支，有明显横纹，核很多，且都位于细胞膜下方，细胞多呈梭行，具有一定的方向性。骨骼肌细胞原代分离培养3天后，可见细胞贴壁伸展，细胞形态大小不一，呈梭形、不规则形、三角形或扇形，核卵圆形、居中；2周后细胞汇合，多数细胞伸展呈长梭形，胞浆丰富，有分枝状突起，细胞平行排列成单层或部分区域多层重叠生长，高低起伏；细胞密度低时，常交织成网状；密度高时，则排列为旋涡状或栅栏状。传代后细胞生长较快，4-6天即可汇合，并保持上述形态学特征和生长特点。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠骨骼肌细胞采用胶原酶消化法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠骨骼肌细胞经α-Sarcometric actin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　?、?消化培养法

　?、?悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

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　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

A-427细胞，人肺癌细胞 小鼠成纤维细胞,L929细胞 CM-R103大鼠脑静脉血管平滑肌细胞769-P(人细胞腺癌细胞)     人星形胶质细胞 人肺癌细胞，NCI-H1869[H1869]细胞 YAC-1(淋巴瘤细胞)  卵巢颗粒细胞Many 猪原代乳腺成纤维细胞 猪原代肺成纤维细胞

BMP4(bone morphogenetic protein 4 0.5mgBMP4(bone morphogenetic protein 4) 骨形态发生蛋白4(抗原)

CFD Protein Human 重组人 Adipsin / Complement Factor D / CFD 蛋白

PRLR重组小鼠 PRLR / Prolactin Receptor 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

CSF2RB Protein Rat 重组大鼠 CD131 / CSF2RB / IL3RB / IL5RB 蛋白 (Fc 标签)

KIT重组人 KIT / c-KIT / CD117 蛋白 (aa 540-972, His & GST 标签) Protein

小鼠铜蓝蛋白(CP/CER)ELISA 试剂盒

Kappa B subunit p65 factor - nucleus of rat affinity peptide (NF- kappa B p65) ELISA Kit 大鼠核因子-κB亚基p65亲和肽(NF-κB p65)试剂盒

Humanserineprotease,PRSSELISAKit 人丝蛋白酶(PRSS)试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickenSolubleIercellularAdhesionMolecule-1,sICAM-1试剂盒鸡可溶性细胞间粘附分子1(sICAM-1)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞PI-3KINASEP110BETA蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit小鼠Ⅸ(FⅨ)试剂盒规格：96T/48T

猪α干扰素试剂盒   猪α干扰素试剂盒   规格型号：96T/48T   猪α干扰素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪α干扰素试剂盒、猪α干扰素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

猪白介素10试剂盒   猪白介素10试剂盒   规格型号：96T/48T   猪白介素10试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪白介素10试剂盒、猪白介素10eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

猪B细胞淋巴瘤因子2试剂盒   猪B细胞淋巴瘤因子2试剂盒   规格型号：96T/48T   猪B细胞淋巴瘤因子2试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪B细胞淋巴瘤因子2试剂盒、猪B细胞淋巴瘤因子2eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

猪Bcl-2相关X蛋白试剂盒   猪Bcl-2相关X蛋白试剂盒   规格型号：96T/48T   猪Bcl-2相关X蛋白试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪Bcl-2相关X蛋白试剂盒、猪Bcl-2相关X蛋白eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

大鼠骨骼肌原代细胞小鼠糖蛋白130(gp130)ELISA 试剂盒 96T/48T

Rat leinizing hormone releasing hormone (LHRH) ELISA Kit 大鼠黄体生成素释放激素(LHRH)试剂盒

HumanCytochromeP450c21/21-hydroxylase,CYP21AELISAKit 人细胞色素P450c21A/21-羟化酶(CYP21A)试剂盒 96T/48T 进口分装

cit瓜规格：96T/48T

载玻片细胞钙ATP酶PMCA蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

Mouseeosinophilcationicprotein,ECPELISAKit小鼠嗜酸性粒细胞阳离子蛋白(ECP)试剂盒规格：96T/48T

FKBP1A重组人 FKBP12 蛋白 Protein

神经颗粒素(NRGN)重组蛋白 Recombinant Neurogranin (NRGN)

LPAL2重组人 LPAL2 蛋白 (Fc 标签) Protein

IL3RA Protein Human 重组人 IL3RA / CD123 蛋白 (His & Fc 标签)

HA Protein Influenza 重组甲型流感 H1N1 (A/England/195/2009) 血凝素 (Hemagglutinin / HA) 蛋白