大鼠肝内胆管上皮原代细胞

培养信息：

包被条件 鼠尾胶原Ⅰ（2-5μg/cm2）

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 上皮细胞样

传代特性 可传1-2代

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

大鼠肝内胆管上皮细胞分离自肝脏组织；肝脏是身体内以代谢功能为主的一个器官，并在身体里面起着去氧化、储存肝糖、分泌性蛋白质的合成等作用；肝脏也制造消化系统中之胆汁。肝脏是机体内脏里最大的器官，位于机体中的腹部位置，在右侧横隔膜之下，位于胆囊之前端且于右边肾脏的前方，胃的上方。肝脏是机体消化系统中最大的消化腺，为一红棕色的V字形器官。肝脏是尿素合成的主要器官，又是新陈代谢的重要器官。肝脏在机体位置和形态结构：肝脏位于右上腹，隐藏在右侧膈下和肋骨深面，大部分肝为肋弓所复盖，仅在腹上区、右肋弓间露出并直接接触腹前壁，肝上面则与膈及腹前壁相接。通过控制激素调控的分泌和吸收，在保持、调整和扩大胆小管的结构中发挥重要作用，肝内胆管上皮细胞在先天性和获得性免疫应答方面起着积极作用。肝内胆管上皮细胞约占肝细胞总数的5%，其在肝内胆道系统内形成复杂的网状管形结构。肝内胆管上皮细胞具有复杂的生理代谢功能，参与肝脏的代谢、排泌、免疫等生理过程，在肝脏疾病的发生发展过程中起一定的作用。研究表明，常见的肝内胆管病变例如原发性硬化性胆管炎、胆管癌等疾病，都是以肝内胆管上皮细胞为病变靶位，进而引起肝内胆管上皮损伤。因此，了解正常肝内胆管上皮细胞的生物学特征和病变肝内胆管上皮细胞的病理特征对研究肝内胆管病变的发病机制、诊断和治疗具有重要意义。

方法简介：

公司实验室分离的大鼠肝内胆管上皮细胞采用胶原酶灌注消化法后，再用胶原酶-DNA酶联合消化，接种至预先包被鼠尾胶原的培养瓶中，通过上皮细胞专用培养基培养筛选制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的大鼠肝内胆管上皮细胞经Cytokeratin-19免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　?、?消化培养法

　?、?悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

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　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

A-204细胞，人横纹肌肉瘤细胞 两歧双歧杆菌 人肝永生化细胞;THLE-3  F81(猫细胞)     人羊膜间充质基质细胞 Sars蛋白表达株，293001A细胞 NCI-H596 [H596](人肺癌细胞)  CL-0065CoC1/DDP(人卵巢耐药细胞亚株) 猪原代肾小球系膜细胞 大鼠原代胎盘间充质干细胞

PTEN/MMAC1 一种抑制基因抗原 0.5mgPTEN/MMAC1 一种抑制基因抗原

CECR1 Protein Human 重组人 CECR1 / ADA2 蛋白

NS2重组甲型流感 H1N1 (A/Puerto Rico/8/34/Mount Sinai) Non-structural Protein 2 / NS2 Protein

EFNA5 Protein Human 重组人 Ephrin-A5 / EFNA5 蛋白 (Fc 标签)

FCGR2A重组人 CD32a / FCGR2A 蛋白 (166 Arg, His 标签) Protein

小鼠仙台病毒抗体(HVJ-Ab)试剂盒

Rat bone morphogenetic protein 2 (BMP-2) ELISA Kit 大鼠骨成型蛋白2(BMP-2)试剂盒

Humannon-neuronalenolase,NNEELISAKit 人非神经元性烯醇化酶(NNE)试剂盒 进口分装

ChickenHeatShockProtein70,Hsp-70试剂盒鸡热休克蛋白70(HSP-70)试剂盒

载玻片细胞CDK3蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseHeatShockProtein90,Hsp-90ELISAKit小鼠热休克蛋白90(HSP-90)试剂盒

鱼类释放激素试剂盒   鱼类释放激素试剂盒   规格型号：96T/48T   鱼类释放激素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：鱼类释放激素试剂盒、鱼类释放激素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

鱼类白介素1α试剂盒   鱼类白介素1α试剂盒   规格型号：96T/48T   鱼类白介素1α试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：鱼类白介素1α试剂盒、鱼类白介素1αeisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

鱼促上腺皮质激素试剂盒   鱼促上腺皮质激素试剂盒   规格型号：96T/48T   鱼促上腺皮质激素试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：鱼促上腺皮质激素试剂盒、鱼促上腺皮质激素eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

猪甘油三酯试剂盒   猪甘油三酯试剂盒   规格型号：96T/48T   猪甘油三酯试剂盒，规格型号：96T/48T，来源：试剂盒（进口分装），产品别名：猪甘油三酯试剂盒、猪甘油三酯eisa试剂盒   保存条件：2-8℃   保质期：6个月。

大鼠肝内胆管上皮原代细胞小鼠褪黑素(MT/MLT)ELISA 试剂盒 96T/48T

Human keratan sulfate (KS) ELISA Kit 人角质素(KS)试剂盒

Humannonmethylatedoligonucleotide,NONELISAKit 人非甲基化寡核苷酸(NON)试剂盒 96T/48T 进口分装

ChickensecretoryimmunoglobulinA,SIgA试剂盒鸡分泌型免疫球蛋白A(SIgA)试剂盒规格：96T/48T

载玻片细胞PARP蛋白表达荧光显微镜试剂盒10/20次

MouseFibronectin,FNELISAKit小鼠纤连蛋白(FN)试剂盒规格：96T/48T

IL1RN重组大鼠 IL-1RA / IL1RN 蛋白 (Fc 标签) Protein

GABA/KLH γ1氨基偶联血蓝蛋白 1mgGABA/KLH γ1氨基偶联血蓝蛋白

CD22重组人 Siglec-2 / CD22 蛋白 Protein

IL36G Protein Human 重组人 IL36G / IL1F9 蛋白 (aa 18-169)

KIT Protein Mouse 重组小鼠 c-kit / CD117 蛋白

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。