详细介绍
产品属性:
英文名称:Hoechst Staining Kit
产品规格:100次
发货周期:1~3天
公司产品仅用于科研
商品介绍:
英文名称:Hoechst Staining Kit 产品规格:100次 发货周期:1~3天 本试剂盒提供了一种经典而又快速简便的细胞凋亡检测方法。细胞发生凋亡时,染色质会固缩。所以Hoechst 33258染色后,在荧光显微镜下观察,正常细胞的细胞核呈正常的蓝色,而凋亡细胞的细胞核会呈致密浓染,或呈碎块状致密浓染,颜色有些发白。 试剂盒特点: 1. 只需25分钟即可完成细胞凋亡检测的整个过程。 2. 本试剂盒提供了固定液,染色液,及抗荧光淬灭封片液。 3. 本试剂盒对贴壁细胞,悬浮细胞和组织切片均适用。 4. 足够检测100个样品。 试剂盒组份: 固定液————————————50ml Hoechst 33258染色液 —————50ml 抗荧光淬灭封片液 —————— 5ml |
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大小;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
转化生长因子β2(TGF-β2)英文名称:TGF-β2 ELISA Kit载脂蛋白E4抗体包装25g
转化生长因子β2(TGFβ2)英文名称:TGFβ2 ELISA Kit自噬相关基因AMBRA1抗体包装10mg
转化生长因子β1(TGF-β1)英文名称:TGF-β1 ELISA Kit磷化自噬相关蛋白4C抗体包装50mg
转化生长因子β(TGFβ1)英文名称:TGFβ1 ELISA Kit磷化自噬相关蛋白4C抗体包装25g
转化生长因子α(TGF-α)英文名称:TGF-α ELISA Kit磷化凋亡信号调节激1抗体包装5g
转化生长因子α(TGFα)英文名称:TGFα ELISA Kit磷化失调症蛋白1抗体包装1g
主要组织相容性复合体Ⅲ类(MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ)英文名称:MHC-Ⅲ/H-2Ⅲ ELISA Kit脊髓小脑失调症蛋白1抗体包装5g
主要组织相容性复合体Ⅱ类(MHC-Ⅱ/H-2Ⅱ)英文名称:MHC-Ⅱ/H-2ⅡELISA Kit磷化APP淀粉样肽前体蛋白抗体包装25g
主要组织相容性复合体Ⅰ类(MHCⅠ/H-2Ⅰ)英文名称:MHCⅠ/H-2Ⅰ ELISA Kit磷化凋亡信号调节激1抗体包装5g
肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TSGF)英文名称:TSGF ELISA Kit磷化凋亡信号调节激1抗体包装1g
肿瘤特异生长因子/肿瘤相关因子(TGSF)英文名称:TGSF ELISA Kit磷化活化复制因子2抗体包装5g
肿瘤坏死因子样细胞凋亡弱诱导因子(TWEAK)英文名称:TWEAK ELISA Kit磷化钠ATP蛋白a1抗体包装100g
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体4(TRAIL-R4)英文名称:TRAIL-R4 ELISA Kit磷化钠ATP蛋白a1抗体包装25g
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体受体3(TRAIL-R3)英文名称:TRAIL-R3 ELISA Kit乙酰羧化抗体包装100g
肿瘤坏死因子相关凋亡诱导配体1(TRAIL-R1)英文名称:TRAIL-R1 ELISA Kit磷化乙酰羧化抗体包装25g
磷化热休克蛋白β5/αb晶体蛋白质/α-晶体蛋白b链抗体Pim-2原癌基因(PIM2)R406 (free base) is a potent Syk inhibitor with IC50 of 41 nM in a cell-free ass
细胞凋亡染色试剂盒(细胞Hoechst染色)立枯丝核 五-O-乙?;?β-D-吡喃葡萄糖1,25二羟基D检测试剂盒
盘长孢状盘孢 卡比多巴1,25-二羟基D3检测试剂盒
红鬼笔 紫苏1,3-二磷酸甘油酸检测试剂盒
伯克霍尔德 盐酸芬他林1,4,5-三磷酸肌检测试剂盒
环圈链霉 乙酰甲喹1,5-脱水葡萄糖;1,5-脱水山梨检测试剂盒
青霉 β-烟酰单核苷酸11去氢血栓烷B2检测试剂盒
阿舒假囊酵母 氟化锶11脱氢血栓素B2检测试剂盒
曲霉属 香叶木素1-3-β-D葡聚糖检测试剂盒
解脂假丝酵母 DL-薄荷14-3-3蛋白eta检测试剂盒
白布勒担孢酵母 N-(2',6'-二甲苯基)-2-甲酰15脂加氧酶检测试剂盒
白灵侧耳 高良姜素17β-雌二检测试剂盒
灵芝属 聚氧烯甘油GP17-羟皮质类固检测试剂盒
黑木耳 单双甘油脂肪酸脂17羟孕酮检测试剂盒
美澳型核果褐腐病 7-异氧基异黄酮17-酮皮质类固检测试剂盒
玉米大斑病 槐定碱1α羟化酶检测试剂盒
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)