本公司所有产品仅供科学实验，不做其他科学实验外的使用！

产品名称：人表皮成纤维原代细胞
英文名称：
规格：5×10?Cells/T25培养瓶
货号：GOY-01X1234
分类：人原代细胞

生长特性：贴壁

细胞形态：成纤维细胞样

人表皮成纤维细胞分离自皮肤组织；表皮位于动物皮肤的外层，由胚胎时期外胚层形成，具有抗摩擦和抗损伤的作用。表皮是皮肤的浅层结构，由复层扁平上皮构成。从基底层到表面可分为五层，即基底层、棘层、颗粒层、透明层和角质层。成纤维细胞（Fibroblast）是疏松结缔组织的主要细胞成分，由胚胎时期的间充质细胞分化而来。成纤维细胞较大，轮廓清楚，多为突起的纺锤形或星形的扁平状结构，其细胞核呈规则的卵圆形，核仁大而明显。成纤维细胞功能活动旺盛，细胞质嗜弱碱性，具明显的蛋白质合成和分泌活动，在一定条件下，它可以实现跟纤维细胞的互相转化；成纤维细胞对不同程度的细胞变性、坏死和组织缺损的修复有着十分重要的作用。刚分离的表皮成纤维细胞呈圆形、折光性良好，悬浮于培养基中。30min细胞贴壁，其中部分开始伸出伪足，表现为小的突起；6h后细胞基本贴壁，伸展成梭形，胞核清晰，分布较均匀，散在生长，不聚集成团；细胞生长迅速，5-7天即呈融合状态，细胞排列紧密，有的交叉重叠生长，平坦、胞体较大，细胞质透明，细胞核较大，呈椭圆形，颜色淡。细胞融合，并彼此连接成网状；细胞呈突起的纺锤形或星形的扁平分布。

方法简介：

公司实验室分离的人表皮成纤维细胞采用先蛋白酶消化、后蛋白酶-胶原酶混合消化法结合差速贴壁法制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人表皮成纤维细胞经Vimentin免疫荧光鉴定，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

1、培养基及培养冻存条件准备：

准备DMEM高糖，10% 优质胎牛血清。

1）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37摄氏度，培养箱湿度为70%-80%。

2）冻存液：90%培养基，10%DMSO，现用现配。液氮储存。

2、细胞处理：

1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管在37℃水浴中迅速摇晃解冻，加入4mL培养基混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培养过夜（或将细胞悬液加入10cm皿中，加入约8ml培养基，培养过夜）。第二天换液并检查细胞密度。

2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。

3）细胞冻存：待细胞生长状态良好时，可进行细胞冻存。贴壁细胞冻存时，弃去培养基后加入少量，细胞变圆脱落后，加入约1ml含血清的培养基后加入冻存管中，再添加10%DMSO后进行冻存。

1、收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好，培养液是否有漏液、浑浊等现象，若有上述现象发生请及时和我们联系。

2、仔细阅读细胞说明书，了解细胞相关信息，如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。

3、用75%酒精擦拭细胞瓶表面，显微镜下观察细胞状态。因运输问题贴壁细胞会有少量从瓶壁脱落，将细胞置于培养箱内静置培养过夜，隔天再取出观察。此时多数细胞均会贴壁，若细胞仍不能贴壁请用台盼蓝染色测定细胞活力，如果证实细胞活力正常，请将细胞离心后用新鲜培养基再次贴壁培养；如果染色结果显示细胞无活力，请拍下照片及时和我们联系，信息确认后我们为您再免费寄送一次。

4、请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用，细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合，使细胞逐渐适应培养条件;建议直接购买提供的培养基。

5、建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片，记录细胞状态，便于和微生物菌种查询网技术部沟通交流。

6、该细胞只能用于科研，不得用于临床应用。

MES-13细胞，小鼠肾小球系膜细胞 K562(慢性髓原白血病) 豚鼠肺细胞;GP-F1  NRK-52E(大鼠小管导管上皮细胞)     PANC-1, 人胰腺癌细胞 肝癌细胞,Hep G2细胞 U-937(组织细胞淋巴瘤细胞)   脂肪细胞系统 兔原代视网膜微血管周细胞 大鼠原代睾丸间质细胞

BKCa channels(calcium-activated potassium channel 0.5mgBKCa channels(calcium-activated potassium channel) 钙激活通道蛋白

CXCL1 Protein Human 重组人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & NusA 标签)

RBP4重组小鼠 RBP4 蛋白 Protein

CLEC14A Protein Rat 重组大鼠 CLEC14A / EGFR-5 蛋白 (Fc 标签)

VDR重组人 VDR / NR1I1 蛋白 Protein

大鼠尿卟啉原脱羧酶(UROD)试剂盒 ，英文名： UROD ELISA Kit

Monkey E selectin (E-Selectin/CD62E) ELISA Kit 猴E选择素(E-Selectin/CD62E)试剂盒

RatvonWillebrandFactor,vWFELISAKit 大鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素辅因子(VWF)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforGM-CSFAb(Humanai-Granulocyte-MacrophageColonyStimulatingFactoraibody)ELISAKit人粒细胞巨噬细胞集落刺激因子抗体

细胞氧化酶(DAO)活性荧光定量试剂盒20次

RatSuperOxidaseDimase,SODELISAKit大鼠超氧化物歧化酶(SOD)试剂盒规格：96T/48T

小鼠型纤溶酶原激活物受体   英文名称：   urokinase-plasmingen activator receptor   规格：      英文缩写：   uPA-R

小鼠超敏感度促甲状腺素   英文名称：   Mouse ulasensitive Thyroid Stimulating Hormone   规格：      英文缩写：   U.TSH

线粒体解偶联蛋白2   英文名称：   Mouse Mitochondrial Uncoupling Protein 2   规格：      英文缩写：   UCP2

小鼠血管细胞粘附分子-1   英文名称：   vascuiar endothelial cells adhesion molecule 1   规格：      英文缩写：   VCAM-1

人表皮成纤维原代细胞小鼠酪蛋白酶试剂盒 96T/48T

Human prostate specific aigen (PSA) ELISA Kit 人前列腺特异性抗原(PSA)试剂盒

Humaetinolbindingprotein4,RBP-4ELISAKit 人结合蛋白4(RBP-4)试剂盒 96T/48T 进口分装

humanadrencocoicoopichormone,ACTH试剂盒人促肾上腺皮质激素(ACTH)试剂盒规格：96T/48T

植物DNA甲基转移酶-1(MET-1)活性酶连续循环比色法定量试剂盒20次

Mouseadiponectin,ADPELISAKit小鼠脂联素(ADP)试剂盒规格：96T/48T

CTSE重组小鼠 Cathepsin E / CTSE 蛋白 Protein

ATF2 (Activating Transcription Factor2 0.5mgATF2 (Activating Transcription Factor2) 活化复制因子2(多肽)

CHEK1重组人 CHK1 / CHEK1 蛋白 (GST 标签) Protein

IL12A & IL12B Protein Human 重组人 IL-12 (IL12A & IL12B Heterodimer) 蛋白

FIGF Protein Rat 重组大鼠 VEGF-D / VEGFD / FIGF 蛋白 (Fc 标签)