人成骨原代细胞

培养信息：

培养基 含FBS、生长添加剂、Penicillin、Streptomycin等

换液频率 每2-3天换液一次

生长特性 贴壁

细胞形态 梭形、多角形

传代特性 可传5代左右；3代以内状态佳

消化液 0.25%

培养条件 气相：空气，95%；CO2，5%

人成骨细胞分离自颅骨组织；颅骨位于脊柱上方，由23块形状和大小不同的扁骨和不规则骨组成。除下颌骨及舌骨外，其余各骨彼此借缝或软骨牢固连结，起着?；ず椭С帜浴⒏芯跗鞴僖约跋骱秃粑鞯钠鹗疾糠值淖饔?。颅分脑颅和面颅两部分。脑颅位于颅的后上部，内有颅腔，容纳脑，共8块。面颅为颅的前下部分，包含眶、鼻腔、口腔等结构，构成面部的支架，共15块。成骨细胞是骨形成的主要功能细胞，负责骨基质的合成、分泌和矿化。骨不断地进行着重建，骨重建过程包括破骨细胞贴附在旧骨区域，分泌酸性物质溶解矿物质，分泌蛋白酶消化骨基质，形成骨吸收陷窝；其后，成骨细胞移行至被吸收部位，分泌骨基质，骨基质矿化而形成新骨；破骨与成骨过程的平衡是维持正常骨量的关键。成骨细胞培养不仅有助于了解骨形成机制、骨骼系统疾病的分子和细胞学基础，也是药物筛选、生物材料开发和生物工程研究的重要手段。

方法简介：

公司实验室分离的人成骨细胞采用先用蛋白酶短时间消化、后用胶原酶反复消化制备而来，细胞总量约为5×10?cells/瓶。

质量检测：

公司实验室分离的人成骨细胞经ALP染色检测，纯度可达90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。

① 组织块培养法

　　组织块培养是常用、简便易行和成功率较高的原代培养方法。其基本方法是将剪成的小组织团块接种于培养瓶(或皿)中，瓶壁可预先涂以胶原薄层，以利于组织块粘着于瓶壁，使周边细胞能沿瓶壁向外生长。

　?、?消化培养法

　?、?悬浮细胞培养法

　　对于悬浮生长的细胞，如白血病细胞、淋巴细胞、骨髓细胞、胸水和腹水中的癌细胞和免疫细胞无需消化，可采用低速离心分离，直接培养，或经淋巴细胞分层液分离后接种培养。

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　　器官培养是指从供体取得器官或组织块后，不进行组织分离而直接在体外的特定环境条件下培养，器官培养可保持器官组织的相对完整性，可用于重点观察细胞间的联系、排列情况和相互影响，以及局部环境的生物调节作用。

客户收到细胞后，请按照以下方法进行操作。(该细胞传代次数有限约 2 代，建议客户收到细胞后尽快安排后续实验)

1、取出细胞瓶，75%酒精消毒后拆下封口膜，放入 37℃，5%CO2 培养箱中静置 6-8 小时，以稳定细胞状态。

2、待细胞达到 80%汇合时准备进行传代培养。

3、细胞传代：

1)吸出细胞瓶中的培养基，用 PBS 清洗细胞一次。

2)加入 0.125%消化液约 1mL 至培养瓶中，37℃消化 3min 左右；显微镜下观察，待细胞回缩变圆后吸弃消化液，再加入培养液终止消化。

3)用吸管轻轻吹打混匀，按 1:2 或 1:3 等适当的比例进行接种传代，然后补充新鲜的培养基至 5mL，放入 37℃ 5% CO2 细胞培养箱中培养。

4)待细胞贴壁后，培养观察，每隔 2-3 天更换新鲜的培养基。

MFC细胞，小鼠胃癌细胞 BHK(幼仓鼠肾细胞) 猕猴肺细胞;MML2  小鼠单核巨噬细胞白血病细胞;RAW 264.7 [RAW264.7 小鼠淋巴管内皮细胞 A549, 人肺癌细胞系 T细胞白血病细胞,HPB-ALL细胞 RKO(结肠腺癌细胞 兔原代视网膜神经节细胞 兔原代胃cajal间质细胞

粒细胞集落刺激因子(GCSF)重组蛋白 Recombinant Colony Stimulating Factor 3, Granulocyte (GCSF)

CPB2 Protein Human 重组人 Carboxypeptidase B2 / CPB2 蛋白

CD200重组人 CD200 / OX-2 蛋白 (His & Fc 标签) Protein

NP Protein H3N2 重组甲型流感 H3N2 (A/Hong Kong/1/1968) 核蛋白 (Nucleoprotein / NP)

PSMA3重组人 PSMA3 / Proteasome 20S alpha 3 蛋白 Protein

大鼠尼克酰胺腺嘌呤二核苷酸0酸氧化酶1(NOX1)试剂盒 ，英文名： NOX1 ELISA Kit

Mouse platelet derived growth factor (PDGF) ELISA Kit 小鼠血小板衍生生长因子(PDGF)试剂盒

RatFcoagulationfactorⅨ,FⅨELISAKit 大鼠IX(FIX)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforGM(HumanGasicMucin)ELISAKit人胃粘液素

细胞繁殖与毒性高通量筛选荧光试剂盒500次

RatsubstancePreceptor,SP-RELISAKit大鼠P物质受体(SP-R)试剂盒规格：96T/48T

小鼠基质细胞衍生因子1a(SDF-1a/CXCL12)试剂盒   96T/48T

小鼠基质裂解素(ST2)试剂盒   96T/48T

小鼠基质金属蛋白酶抑制因子4(TIMP-4)试剂盒   96T/48T

小鼠基质金属蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)试剂盒   96T/48T

人成骨原代细胞豚鼠胰岛素样生长因子1(IGF1)试剂盒 ，英文名： IGF1 ELISA Kit

Human Mycoplasma pneumoniae aibody (MP-Ab) ELISA Kit 人肺支原体抗体(MP-Ab)试剂盒

rabbitmaixmetalloproteinase9,MMP-9ELISAKit 兔子基质金属蛋白酶9(MMP-9)试剂盒 96T/48T 进口分装

CLIAKitforBcl-2(MouseB-cellleukemia/lymphoma2)ELISAKIT小鼠B细胞淋巴瘤因子2

纤维蛋白溶酶(PLASMIN)活性荧光定量试剂盒20次

rabbitCoicosterone,COELISAKit兔子皮质同/肾上腺同(CO)试剂盒规格：96T/48T

SLAMF8重组小鼠 SLAMF8 / BLAME 蛋白 Protein

Alpha-AF/ Alpha-Afa(alpha-L-arabinofuranosidase 0.5mgAlpha-AF/ Alpha-Afa(alpha-L-arabinofuranosidase) α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗原

AGER重组人 AGER / RAGE 蛋白 Protein

CXCL1 Protein Human 重组人 CXCL1 / MGSA / NAP-3 蛋白 (His & SUMO 标签)

BST1 Protein Rat 重组大鼠 CD157 / BST1 蛋白