详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Hoechst 33342 Stain solution(ready-to-use) | 10ml|50mL | 1~3天 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
商品介绍:
本Hoechst 33342染色液为即用型,可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。 Hoechst 33342,也称bisBenzimide H 33342或HOE 33342,是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,对细胞的毒性较低。Hoechst 33342染色常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。Hoechst 33342也常用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。Hoechst 33342的大激发波长为346nm,大发射波长为460nm;Hoechst 33342和双链DNA结合后,大激发波长为350nm,大发射波长为461nm。 储存条件:-20℃避光,有效期一年。 |
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
比卡鲁英文名称: Atenolol结蛋白样蛋白CGNL1抗体包装10g
吡非尼,哌非尼英文名称: Atorvastatin calcium生长调节蛋白CGREF1抗体包装50g
吡美莫司;匹美莫司英文名称: Atorvastatin calcium富含亮软骨蛋白抗体包装1g
达卡巴英文名称: Azacitidine (5-Azacytidine)软骨蛋白样蛋白抗体包装25g
达沙替尼(无)英文名称: Azacitidine (5-Azacytidine)卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD3抗体包装5g
达沙替尼一合物英文名称: Azacitidine (5-Azacytidine)卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD10抗体包装100g
地西他滨/ 5-氮杂-2'-脱氧胞嘧啶核苷英文名称: Azelastine HCl卷曲螺旋结构域蛋白CHCHD7抗体包装25g
多韦替尼乳盐英文名称: Azelastine HClATP依赖的解旋CHD1抗体包装5g
多烯紫杉三合物英文名称: Azithromycin染色质解旋DNA结合蛋白抗体包装100g
多烯紫杉无/多西他赛英文名称: Azithromycin染色质解旋DNA结合蛋白2抗体包装25g
二磺拉帕替尼英文名称: Aztreonam染色质解旋DNA结合蛋白3抗体包装5g
二氢卟吩e6英文名称: Aztreonam染色质解旋DNA结合蛋白Mi2β抗体包装1g
凡德他尼英文名称: Baccatin IIIATP依赖的解旋CHD6抗体包装5g
反铂英文名称: Baccatin IIIATP依赖的解旋CHD7抗体包装1g
达拉宾英文名称: BaclofenATP依赖的解旋CHD8抗体包装25g
: A208资源名称: 浅紫灰链霉菌 质量规格:>99%,BR胰岛抗体试剂盒杨梅苷;Myricitrin
易变链霉菌Streptomyces│mutabilis 质量规格:HPLC>99%,标准品胰岛自身抗体试剂盒*泊苷;Etoposide
枯草芽孢杆菌Bacillus│subtilis 质量规格:效价≥1300U/MG,BR胰岛原试剂盒烟酰;Nicotinamide
Hoechst 33342 染色液(即用型)*蜜环 5-乙?;奏そ鹗綦暮“宸从Φ鞍?Elisa
波茨坦芽孢杆 壬二酸二(2-乙基己基)酯骨?;づ涮錏lisa
新城疫病 2-氯-5-硝基嘧啶骨?;づ涮錏lisa
藤黄檀根瘤 2--4-氟苯甲型肝炎病Elisa
大肠埃希氏杆 普仑司特丁型肝炎病Elisa
黑灵芝 [1,3-双(2,4,6-三基)-2-咪唑烷亚基][[2-(1-甲基-2-氧代氧基)苯基]亚单纯疱疹病IElisa
酿酒酵母 4-氟间苯二酚单纯疱疹病IIElisa
链霉 (R)-(-)-1-氨基茚盐酸盐单纯疱疹病IIIElisa
短密青霉 DL-白氨酸瘤病Elisa
巨大芽胞杆 1-氯-4-丁烷金属肽含血小板反应蛋白7Elisa
木层孔 2-吡啶丁酸金属肽含血小板反应蛋白12Elisa
泡囊短波单胞 三己角蛋白18-M65Elisa
*蜜环 1,3,5-三(4-氨基苯氧基)苯血管紧张转化2Elisa
节杆 2,5-二氯吡啶-4-甲RHOGElisa
长孢链霉 2-苯基二酰ARHGAP9Elisa