详细介绍
商品介绍:
本Hoechst 33258染色液可直接用于固定细胞或组织的细胞核染色,也可直接用于活细胞或组织的细胞核染色。 CAS号:23491-45-4 分子式:C25H24N6O·3HCl 分子量:533.88 储存条件:-20℃避光,有效期一年 |
产品属性:
英文名称:Hoechst 33258 Stain solution(ready-to-use)
产品规格:10ml|50mL
发货周期:1~3天
公司产品仅用于科研
细胞生物学研究有以下几个方面:
细胞生物学的研究内容十分广泛,主要包括:
①细胞核、染色体以及基因表达的研究;
②生物膜与细胞器的研究;
③细胞骨架体系的研究;
④细胞增殖及其调控;
⑤细胞分化及其调控;
⑥细胞的衰老与编程性死亡(凋亡);
⑦细胞的起源与进化;
⑧细胞工程.
实验报告:
一、分离与培养:
1、无菌条件下,取出1-3d 龄SD大鼠心房组织,然后用PBS将此组织块清洗2次,最后将1mm3左右大??;
2、往组织块中加入4 mL酶消化液(0.1% 和0.1% I型胶原酶),混悬10s,置37℃条件下消化10min,之后用滴管吹打制成单细胞悬液,自然沉淀并收集上清,用含10% FBS培养基终止消化后4℃放置;
3、剩下的组织再加入3~4mL酶消化液,混悬10s,置37℃消化10 min后,按上述方法收集上清并终止消化后4℃放置,重复此步骤2-3次,直至组织*被消化;
4、用200目不锈钢筛网过滤细胞消化液,1200r/min 离心10min,弃去上清,沉淀细胞用含有10% FBS DMEM/F12培养基混悬,接种于25cm2培养瓶,放置于37℃ ,5%CO2 培养箱中培养;
5、差速贴壁1h后,吸出培养基,按实验需要接种于6孔板中继续培养;
二、免疫荧光鉴定:
1、待心房肌细胞生长至80%融合时,弃去培养基,用温育的PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后用4%多聚甲醛在室温条件下固定细胞15min;
2、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在4℃条件下,用0.1%Triton X-100透膜15min;
3、PBS冲洗细胞2次,每次10min,然后在室温条件下,用4% BSA封闭细胞30min;
4、按1: 100的比例稀释α-actin一抗,然后将其放在4℃冰箱中孵育细胞过夜;
5、PBS冲洗细胞3次,每次10min,按1:150的比例稀释抗α-actin的二抗, 37℃条件下放置1h;
6、用PBS冲洗3次,每次10min,最后在倒置荧光显微镜下观察图像并拍照。
操作规程
1、在96孔板加入细胞100μL/孔,通常细胞增殖实验每孔加入100微升2000个细胞,细胞毒性实验每孔加入100微升5000~10000个细胞(具体每孔所用的细胞的数目,需根据细胞的大小,细胞增殖速度的快慢等决定)。置37℃ 5%CO2细胞培养箱培养24小时.
2、.加入适当浓度的0~10μL 受试化合物。
3、将96孔板在37℃,含5% CO2空气及100%湿度的细胞培养箱中孵育适当时间。
4、将5×MTT 用稀释液稀释成1× MTT 溶液。
5、每孔加50μL 1× MTT 溶液,在37℃孵育4小时,使MTT 还原为甲臜。
6、吸出上清液,每孔加150μL DMSO 使甲臜溶解,用平板摇床摇匀。
7、酶标仪在570nm 波长处检测每孔的光密度(如无570nm 滤光片,可以使用560-600nm 的滤光片)。
8、结果分析
a、细胞的存活率:将各测试孔的OD 值减去本底OD 值(*培养基加MTT,无细胞)或空白药物孔OD 值(*培养基加受试药物的不同稀释度加MTT,无细胞),各重复孔的OD 值取平均数±SD。细胞的存活率以T/C%表示,T 为加药细胞的OD 值,C 为对照细胞的OD 值。细胞存活率% =(加药细胞OD/对照细胞OD)×100
b、求出T/C = 50% 时的药物浓度(IC50)及T/C = 10%时的药物浓度(IC90)
埃博霉B;帕土匹龙英文名称: Amikacin Sulfate CERD4蛋白抗体包装250mg
埃博霉C英文名称: Amikacin Sulfate CES1P1蛋白抗体包装5MG
埃博霉D英文名称: Amphotericin B羧酯2抗体包装1g
埃罗替尼英文名称: Amphotericin B羧酯3抗体包装5g
艾力替尼磺盐(AST1306)英文名称: Angiotensin Acetate羧酯4A抗体包装25g
磷?。ㄈ┯⑽拿疲?/span> Anastrozole羧酯6抗体包装100g
鲁米特英文名称: AnastrozoleCezanne蛋白抗体包装25g
奥拉帕尼英文名称: Apramycin sulfate内脏移位线管蛋白CFC1蛋白抗体包装5g
奥沙利铂英文名称: Apramycin sulfate补体因子H相关蛋白2抗体包装10ml
巴卡丁 III英文名称: Arbidol HCl补体因子H相关蛋白4抗体包装1g
白藜芦英文名称: Arbidol HCl补体因子H相关蛋白5抗体包装25g
白消安英文名称: Argatroban7号染色体开放阅读框28A抗体包装5g
蓓萨罗丁;贝沙罗汀英文名称: ArgatrobanCpG结合蛋白抗体包装1g
丁氮芥英文名称: Argipressin AcetateCGG结合蛋白1抗体包装25g
?;宙呒?/span>(PKC-412)英文名称: AtenololcGMP依赖性蛋白激2抗体包装5g
匍枝根霉Rhizopus│stolonifer (Ehrenb.) Vuill. 质量规格:效价测定胰淀试剂盒隐绿原;Cryptochlorogen
美澳型核果褐腐病菌Monilinia│fructicola (G. Winter) Honey 质量规格:>98.5%,BR胰淀粉试剂盒氧化槐果碱 ;Oxysophocarpi
红缘拟层孔菌Fomitopsis│pinicola (Sw.) P. Karst. 质量规格:HPLC>98%,标准品胰岛抗原2抗体/蛋白酪磷抗体试剂盒盐益母草碱;Leonurine hyd
Hoechst 33258 染色液(即用型)孔状短小茎点霉 5-氯-3-羧酸氧化低密度脂蛋白IgM抗体Elisa
枯草芽孢杆 阿替美唑鞘脂Elisa
申氏不动杆* 2-溴-5-(易)全式钴氨2Elisa
单色下皮黑孔 2-氯-6-氟三氟甲苯微管相关蛋白轻链3IElisa
海榄雌小单孢 8-溴茶碱血管内皮粘附分子Elisa
致密曲霉 3-氯-2,4-二羟基吡啶谷氨酸受体2A抗体Elisa
植物乳杆 3-氨基-5-氟苯甲酰蛋白酪氨酸磷酸抗体Elisa
云南红球 超干氯化镱(III) (REO)胰岛抗体Elisa
动球 4-乙基-3-甲酸(易)6酮前列腺F1aElisa
新城疫病 2-氟-5-羟基苯甲孕Elisa
嗜盐碱球 4-(溴甲基)--甲氧基苯可溶性甘露糖受体Elisa
紫萁小菇 1-(2-羰基苯)吡咯CD13分子Elisa
弯孢 5'-O-(4,4'-二甲氧基三苯基)-2'-甲氧基尿苷11β羟基类固脱氢2Elisa
Curvularia cocis Matsush. 六水高氯酸镉法尼基转移βElisa
谢瓦曲霉 4-基-2-甲酸甲酯酪氨酸激BElisa