详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍:
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
MTT | 250mg | 1~3天 |
商品介绍:
噻唑兰(Methylthiazolyldiphenyl-tetrazolium bromide, MTT),也称作溴化噻唑蓝四氮唑,是一种黄色染料,已经普遍替代传统的台盼蓝染色法或者放射性同位素插入法,用来检测细胞的活力,细胞增殖以及细胞毒性分析。检测原理在于:MTT是一种可接受氢离子的化合物染料,带正电荷,具有细胞膜渗透性。活细胞线粒体中的琥珀酸脱氢酶能够将外源进入的MTT还原成为水不溶性的深蓝色MTT-甲臜结晶,而死细胞不具有此功能。甲臜结晶是不能穿透细胞膜,因此沉积在处于增殖且未受损伤的细胞内。甲臜结晶可用DMSO或者酸化的异丙醇溶解出来,酶标仪下测定570 nm的吸光度反映甲臜的生成量。而甲臜的生成量与活细胞数目成正比,用以评估细胞存活状况。 MTT也可用作免疫组化/细胞化学染色试剂,也可用来检测NAD。MTT被快速还原成甲臜后,能够螯合镍,铜和钴。钴螯合物可参与机体氧化系统。 CAS:298-93-1 分子式:C18H16N5SBr 外观:淡黄色至橙色粉末 分子量:414.3 纯度:≥98% 熔点:187℃ 溶解性:溶于水,甲醇 储存条件:4℃ |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程:
一.培养基及培养冻存条件准备:
1)准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640:GIBCO),90%;优质胎牛血清,10%。
2)培养条件: 气相:空气,95%;二氧化碳,5%。 温度:37℃,培养箱湿度为70%-80%。
3)冻存液:90%血清,10%DMSO,现用现配,液氮储存。
二.细胞处理:
1)复苏细胞:将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于冻存管盖部)摇晃解冻,移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟,弃去上清液,加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
对于悬浮细胞,传代可参考以下方法:
方法一:收集细胞,1000RPM,常温条件下离心5分钟,弃去上清液,补加1-2mL培养液后吹匀,将细胞悬液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
操作步骤:
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer(10×)稀释成1×Binding buffer工作液备用(1ml Binding Buffer(10×)需加入9ml无菌去离子水)。
2) 对于悬浮细胞,500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞,要用不含EDTA的胰酶消化细胞,胰酶消化时间不宜过长或过短,最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时,加入细胞培养液,将细胞轻轻吹打下来,转移到离心管内,500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后,加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤,离心收集细胞,共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液,重悬细胞,使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液(细胞总数为1×105 cell)至一新管中,加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI,轻轻混匀,室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测:
染色孵育后,每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液,混匀后使用流式细胞仪检测(1小时内检测)。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组,正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析,绘制双色散点图(two-color dot plot),FITC为横坐标,PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时,活细胞仅有很低强度的背景荧光,早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光,晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测:
染色孵育后涂片,显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞,细胞核显示红色,膜上有绿色光环。
泛(Ub)英文名称:Ub ELISA Kit原癌基因CD39样蛋白4抗体包装100g
泛醌C还原核心蛋白Ⅱ(UQCRC2)英文名称:UQCRC2 ELISA Kit胶原样蛋白抗体包装500g
翻译调节肿瘤蛋白1(TPT1)英文名称:TPT1 ELISA Kit肿瘤易感性候选基因5抗体包装5g
法尼酯X受体(FXR)英文名称:FXR ELISA Kit钙调蛋白激激β抗体包装1g
二?;视?/span>(DAG)英文名称:DAG ELISA Kit中心体肌动蛋白γ1/增强型PI3K蛋白抗体包装5g
二酰甘油-O-?;仆次?(DGAT1)英文名称:DGAT1 ELISA Kit分裂周期相关蛋白JPO2抗体包装100g
二肽基肽Ⅳ(DPP4)英文名称:DPP4 ELISA Kit半胱蛋白-2抗体包装25g
二肽基肽9(DPP9)英文名称:DPP9 ELISA Kit7号染色体开放阅读框63抗体包装25g
二肽基肽8(DPP8)英文名称:DPP8 ELISA KitCD2结合蛋白3抗体包装5g
二氢乳清脱氢(DHODH)英文名称:DHODH ELISA Kit胶原三股螺旋重复蛋白1抗体包装5g
二氢嘧啶脱氢(DPYD)英文名称:DPYD ELISA Kit20号染色体开放阅读框72抗体包装100g
二氢硫辛转乙?;?/span>(DLAT)英文名称:DLAT ELISA Kit2号染色体开放阅读框6抗体包装25g
二氢硫辛脱氢(DLD)英文名称:DLD ELISA KitCD318抗体包装5g
二级淋巴组织趋化因子(SLC)英文名称:SLC ELISA Kit着丝粒蛋白B抗体包装25g
儿茶酚-O-基转移(COMT)英文名称:COMT ELISA Kit1号染色体开放阅读框111抗体包装5g
谷棒杆菌Corynebacterium│glutamicum 质量规格:HPLC≥98%,标准品孕受体试剂盒延胡索;Corydaline
传染性法氏囊病病毒禽双RNA病毒属│ 质量规格:USP,进分sigmaD8809 孕和adipoQ 受体家族成员Ⅶ试剂盒月桂氮卓;Laurocapram
大肠埃希菌Escherichia│coli 质量规格:>99.5%,BR,可用于培养孕激诱导阻断因子试剂盒油;cis-9-Octadecenoi
MTT(噻唑兰)多色节杆 2-[2-(3-甲氧基苯)乙烯]苯酚膜结合HLA-G亚型Elisa
皮氏罗尔斯通氏 3-环戊烯-1-膜结合HLA-E亚型Elisa
产气荚膜梭 D型 苯氧基乙酸酐艰难梭AElisa
暗黄紫色小单孢 铬酸锂鞘氨激Elisa
Pseudomonas 2-吡啶基硫脲酸性神经鞘磷脂Elisa
总状毛霉原变型 甘氨酸锰二羟环氧苯并芘Elisa
酿酒酵母 6-氟烟酸甲酯神经鞘磷脂Elisa
酿酒酵母 2-氯乙氧基乙酸乙酯葡萄糖-6-磷酸Elisa
巴西固氮螺 N,N-二乙基对苯二草酸盐霍乱B亚基Elisa
咖啡拟盘多毛孢 H-D-Phe-Pna布病Elisa
少疣曲霉 反式-4-羟基-D-脯氨酸盐酸盐磷酸化腺苷酸活化蛋白激Elisa
冷温木拉克酵母 恩替卡韦骨特异性碱性磷酸Elisa
苏云金芽胞杆 草酸铁铵β-防御118Elisa
枯草芽孢杆 N-乙?;?D-半乳糖脱氧砒啶啉Elisa
戊糖片球 3--4-羧酸乙酯过氧亚硝基阴离子Elisa