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详细介绍
以下是细胞生物学试剂的详细介绍：
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
Acridine Orange(AO)/EB Double Stain Kit | 50ml*2|250ml*2 | 1～3天 |
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
商品介绍：
橙能透过胞膜完整的细胞，嵌入细胞核DNA，与双链DNA结合后发出绿色荧光，溴化乙锭(EB)仅能透过胞膜受损的细胞，嵌入核DNA，发橘红色荧光。凋亡的细胞呈现为染色增强，荧光更为明亮，均匀一致的圆状或固缩状、团块状结构。非凋亡细胞核呈现荧光深浅不一的结构样特征。二者很容易判别。在荧光显微镜下观察，可见四种细胞形态：活细胞(VN)，核染色质着绿色并呈正常结构;早期凋亡细胞(VA)，核染色质着绿色呈固缩状或圆珠状;晚期凋亡细胞(NVA)，核染色质为橘红色并呈固缩状或圆珠状;非凋亡的死亡细胞(NVN)，核染色质着橘红色并呈正常结构。本产品AO、EB溶液浓度分别为100ug/ml，所含稳定剂不影响实验效果。 使用方法：(仅供参考) 使用前先根据用量，将AO溶液和EB溶液按1:1混合成工作液，先用现配。 对于贴壁细胞或爬片，去掉培养基，用PBS洗两遍去除残余培养基和未贴壁细胞，加入新的PBS;如果需要观察全部细胞特性，保留未贴壁细胞，可以直接在培养基中加入工作液。按照每毫升培养基或PBS中加入20ul工作液即可。室温放置2-5min后于荧光显微镜下观察。 对于悬浮细胞，可直接加入工作液或离心收集细胞后在PBS中加入工作液。按照每毫升培养基或PBS中加入20ul工作液即可。室温放置2-5min后于荧光显微镜下观察。 注意事项： 含酚红培养基对观察有轻微影响。建议使用无酚红培养基。 染色液工作浓度和染色时间可根据具体实验情况适当调整，以期达到佳效果。 储存条件：4℃避光密封保存，有效期一年 |
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
Ⅱ型前胶原基端原肽(PⅡNT)英文名称：PⅡNT ELISA Kit磷化热休克蛋白β5/α晶状体球蛋白B/αB-crystallin抗体包装50mg
Ⅱ型胶原交联羧基端肽(CTXⅡ)英文名称：CTXⅡ ELISA Kit1号染色体开放阅读框167抗体包装1g
Ⅱ型胶原(COL2)英文名称：COL2 ELISA Kit1号染色体开放阅读框168抗体包装250mg
ⅡD组磷脂A2(PLA2G2D)英文名称：PLA2G2D ELISA Kit1号染色体开放阅读框170抗体包装250mg
ⅡA组磷脂A2(PLA2G2A)英文名称：PLA2G2A ELISA Kit1号染色体开放阅读框172抗体包装1g
Ⅰ型前胶原羧基端原肽(PⅠCP)英文名称：PⅠCP ELISA Kit1号染色体开放阅读框173抗体包装5g
Ⅰ型前胶原基端原肽(PⅠNP)英文名称：PⅠNP ELISA Kit1号染色体开放阅读框174抗体包装25g
Ⅰ型前胶原(PCⅠ)英文名称：PCⅠ ELISA Kit1号染色体开放阅读框177抗体包装5g
Ⅰ型胶原交联羧基端肽(CTXⅠ)英文名称：CTXⅠ ELISA Kit1号染色体开放阅读框180抗体包装1g
Ⅰ型胶原交联基端肽(NTXⅠ)英文名称：NTXⅠ ELISA Kit1号染色体开放阅读框182抗体包装1g
Ⅰ型胶原α2(COL1α2)英文名称：COL1α2 ELISA Kit1号染色体开放阅读框183抗体包装25g
Ⅰ型胶原α1(COL1α1)英文名称：COL1α1 ELISA Kit1号染色体开放阅读框187抗体包装5g
Ⅰ型胶原(COL1)英文名称：COL1 ELISA Kit1号染色体开放阅读框189抗体包装5g
90kDa热休克蛋白β1(HSP90β1)英文名称：HSP90β1 ELISA Kit1号染色体开放阅读框190抗体包装100ml
90kDa热休克蛋白αA1(HSP90αA1)英文名称：HSP90αA1 ELISA Kit1号染色体开放阅读框192抗体包装25ml
轮枝菌Verticillium│sp. 质量规格：HPLC>98%,标准品乙肝表面抗原大蛋白试剂盒原花青B2;Procyanidin B
球孢白僵菌Beauveria│bassiana (Bals.-Criv.) Vuill. 质量规格：>98%,BR乙脱氢试剂盒原花青B1;Procyanidin B
链霉菌属菌种Streptomyces│sp. 质量规格：HPLC>98%,标准品乙呋试剂盒乙酰紫堇灵;Acetylcorynoli
吖啶橙-EB双染色试剂盒 叔丁基二硫抗mannobioside糖抗体Elisa
亮白曲霉 2,2-二氟-3-羟基戊酸乙酯锌-α2脂蛋白Elisa
乌克兰毛霉 2-溴-3,4-二氟苯岩藻糖基化触珠蛋白Elisa
短柄帚霉 6-甲基-3H-噻吩[2,3-d]嘧啶-4-酮胆固-25-羟化Elisa
鼠李糖乳杆 氯磺酚S受体自身抗体Elisa
产气肠杆* 3,5-二溴-2-氯吡受体Elisa
新疆盐单胞 5-溴-4-甲基-1H-吲唑S转移Mu1Elisa
禾谷镰孢 2-氯-3-氟-5-硝基吡啶乙酰CoA羧化Elisa
总状共头霉 噻吩并[3,2-b]吡啶-7-蛋白激M2Elisa
大孢联轭霉 5-溴吲唑-3-甲酸系统性红斑狼疮IgGElisa
黑曲霉 2-乙硫基-5-硝基吡啶系统性红斑狼疮IgAElisa
围小丛壳 L-肌肽锌系统性红斑狼疮IgMElisa
蜡样芽胞杆 4-苯氧基苄糖化血红蛋白Elisa
博斯氏属 2-叔丁苯纤维蛋白单体Elisa
叶球形微杆 4,6-二氯-2-甲氧基嘧啶酮酸激M2Elisa
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