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详细介绍
商品介绍：
线粒体提取试剂盒用于从动物细胞或组织中分离出完整而纯化的线粒体。适合于动物软组织(肝或脑组织)和硬组织(肌肉)以及培养细胞的线粒体的制备。其制备物产量高，可以被用于细胞凋亡、信号传递、代谢和蛋白组学等的研究。 操作步骤： 1. 样本处理： a. 组织匀浆：称取100~200 mg新鲜组织如肝脏、脑、心肌等，PBS或生理盐水冲洗，洗净血水，滤纸吸干，用剪刀剪为碎块放入小容量玻璃匀浆器内。加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer，0℃冰浴上下研磨组织20次; b. 培养细胞匀浆：消化细胞，PBS洗涤，800g离心5~10 min收集细胞，计数。每次提取需要5×107个细胞，加入1.0 mL冰预冷的Lysis Buffer重悬细胞，将细胞悬液转移到小容量玻璃匀浆器内，0℃冰浴研磨30~40次。 2. 将组织或细胞匀浆物转移到离心管，4℃，1000g 离心5 min。 3. 取上清，转移至新的离心管中，4℃，1000g再次离心5 min。 4. 取上清，转移至新的离心管中，4℃， 12,000 g 离心10 min。离心后的上清含胞浆成分，可从中提取胞浆蛋白。将上清转移到新离心管，线粒体沉淀在管底。 5. 往线粒体沉淀中加入0.5 mL Wash Buffer重悬线粒体沉淀，4℃，1000 g 离心5 min。 6. 取上清，转移至新的离心管中，4℃， 12,000 g 离心10 min。弃上清，高纯度的线粒体沉淀在管底。 7. 用50 -100μL Store Buffer 或合适的反应缓冲液重悬线粒体沉淀，立即使用或-70℃保存。 储存条件：-20℃ |
以下是细胞生物学试剂的详细介绍：
中文名称 | 英文名称 | 产品规格 | 发货周期 |
50T|100T | 1～3天 |
操作步骤：
1. 样品染色
1) 将Binding Buffer（10×）稀释成1×Binding buffer工作液备用（1ml Binding Buffer（10×）需加入9ml无菌去离子水）。
2) 对于悬浮细胞，500-1000g离心5min收集细胞。
对于贴壁细胞，要用不含EDTA的胰酶消化细胞，胰酶消化时间不宜过长或过短，最好是在轻轻吹打可以使贴壁细胞吹打下来时，加入细胞培养液，将细胞轻轻吹打下来，转移到离心管内，500-1000g离心5min收集细胞。
3) 收集细胞后，加入预冷PBS溶液轻摇或用移液器轻柔吹打洗涤，离心收集细胞，共洗涤两次。
4) 在细胞沉淀中加入1×Binding buffer工作液，重悬细胞，使细胞浓度达到1×106 cell/ml。
5) 吸取100μl细胞悬液（细胞总数为1×105 cell）至一新管中，加入5μl Annexin V-FITC和5-10 μl PI，轻轻混匀，室温避光孵育15min。
2. 样品检测
1) 流式细胞仪检测：
染色孵育后，每管加入400μl 1×Binding Buffer工作液，混匀后使用流式细胞仪检测（1小时内检测）。
建议设置经凋亡诱导的正常细胞、PI单染和Annexin V-FITC单染3个对照组，正常细胞组可作为荧光补偿调节去除光谱重叠和设定十字门的位置。结果可用CellQuest等软件进行分析，绘制双色散点图（two-color dot plot），FITC为横坐标，PI为纵坐标。Annexin V-FITC和PI联合使用时，活细胞仅有很低强度的背景荧光，早期凋亡细胞仅有较强的绿色荧光，晚期凋亡细胞有绿色和红色双重荧光。
2) 荧光显微镜检测：
染色孵育后涂片，显微镜下观察。使用荧光显微镜上的蓝光和绿光通道分别观察FITC和PI。被Annexin V-FITC结合的细胞显示浆膜上有绿色光环。丧失细胞膜完整性的细胞，细胞核显示红色，膜上有绿色光环。
公司产品仅用于科研细胞培养操作规程：
一．培养基及培养冻存条件准备：
1）准备RPMI-1640培养基(RPMI-1640：GIBCO)，90%；优质胎牛血清，10%。
2）培养条件： 气相：空气，95%；二氧化碳，5%。 温度：37℃，培养箱湿度为70%-80%。
3）冻存液：90%血清，10%DMSO，现用现配，液氮储存。
二．细胞处理：
1）复苏细胞：将含有1mL细胞悬液的冻存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于冻存管盖部）摇晃解冻，移入事先准备好的含有4mL培养基的15ml离心管中混合均匀。在1000RPM条件下离心4分钟，弃去上清液，加入1mL培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液移入含有5ml培养基的培养瓶中培养过夜。第二天换液并检查细胞密度。
2）细胞传代：如果细胞密度达80%-90%，即可进行传代培养。
对于悬浮细胞，传代可参考以下方法：
方法一：收集细胞，1000RPM，常温条件下离心5分钟，弃去上清液，补加1-2mL培养液后吹匀，将细胞悬液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培养基的新皿中或者瓶中。
B-细胞κ-轻肽基因增强子抑制因子激β(IκBKβ)英文名称：IκBKβ ELISA Kit胃癌多药耐药相关蛋白包装5g
B-淋巴细胞趋化因子1(BLC1)英文名称：BLC1 ELISA Kit酪蛋白激casein kinase Iα抗体包装1g
B-淋巴细胞激活抗原B7-2(LAB7-2)英文名称：LAB7-2 ELISA Kit磷化酪蛋白激casein kinase Iα抗体包装1g
BMP结合内皮调节因子(BMPER)英文名称：BMPER ELISA Kit磷化酪蛋白激casein kinase Iα抗体包装5g
BH3相互作用域死亡激动剂(Bid)英文名称：Bid ELISA Kit肌动蛋白调节蛋白CAPG抗体包装5MG
Bcl2相关髓细胞白血病序列1(MCL1)英文名称：MCL1 ELISA KitⅠ型胶原/1型胶原a1抗体包装100mg
Bcl2关联X蛋白(Bax)英文名称：Bax ELISA KitⅢ型胶原蛋白/胶原蛋白3/3型胶原蛋白抗体包装25mg
A类清道夫受体3(SCARA3)英文名称：SCARA3 ELISA KitCD96抗体包装1g
ATP结合盒转运蛋白G2(ABCG2)英文名称：ABCG2 ELISA Kit猫眼综合征染色体候选基因2抗体包装25g
ATP结合盒转运蛋白C6(ABCC6)英文名称：ABCC6 ELISA Kit1号染色体开放阅读框146抗体包装5g
ATP结合盒转运蛋白A1(ABCA1)英文名称：ABCA1 ELISA Kit1号染色体开放阅读框150抗体包装100g
Apelin13蛋白(AP13)英文名称：AP13 ELISA Kit1号染色体开放阅读框156抗体包装25g
Apelin12蛋白(AP12)英文名称：AP12 ELISA Kit1号染色体开放阅读框159抗体包装5g
Apelin蛋白(APLN)英文名称：APLN ELISA Kit1号染色体开放阅读框162抗体包装5mg
AMPA离子能谷受体4(GRIA4)英文名称：GRIA4 ELISA Kit1号染色体开放阅读框163抗体包装1g
解脂耶罗威亚酵母Yarrowia│lipolytica 质量规格：>98.5%,BR 乙酰酯试剂盒洋川芎内酯I;Senkyunolide
刺黑乌霉菌Memnoniella│echinata 质量规格：HPLC>98%,标准品乙酰受体抗体试剂盒洋川芎内酯H;Senkyunolide
秦氏蜜环菌Armillaria│qinii H.C. Wang & J. Zhao 质量规格：含量960~1030µg/mg,USP30乙酰试剂盒洋川芎内酯A;Senkyunolide
线粒体提取试剂盒沙门氏马凝集试验抗原 5-氨基-3-甲基-1-苯基吡唑卵清蛋白Elisa
枯草芽孢杆 2-溴-3-甲氧基苯高迁移率族蛋白B1-IgG抗体Elisa
苏云金芽孢杆库尔斯塔克亚种 3-氯, 98+%高迁移率族蛋白B1-IgM抗体Elisa
产酸克雷伯氏 1-环基-6,7-二氟-1,4-二氢-8-甲氧基-4-氧代-3-喹啉羧酸高迁移率族蛋白B1-IgA抗体Elisa
果生链核盘 (2R,3S)-(-)-N-叔丁氧羰基-6-氧代-2,3-二苯基吗啉抗卵巢抗体Elisa
香栓 2-辛基-2H-苯并三唑抗心磷脂抗体Elisa
栗疫 2-溴咪唑并[1,2-a]吡啶肝结合Elisa
鸭疫里氏杆 Boc-DL-色白介1受体Elisa
空泡单胞 5-乙?；?2(1H)-吡啶酮氨基?；?Elisa
粪生黑蛋巢 4-乙氧基盐酸盐死骨片1Elisa
普利茅斯沙雷氏 2,3-二氟-4-基苯CD90分子Elisa
孟氏假单胞 4-磺酰杯[4]芳烃水合物胰蛋白Elisa
毕赤酵母 5-溴-2-氟苯酸JAGGED1蛋白Elisa
汉逊德巴利酵母 N-[(1R)-2-[3-(氨基磺酰基)-4-甲氧基]-1-甲基乙基]乙酰1Elisa
香矛假单胞 1-吡唑甲蛋白C抑制物Elisa
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